——效率高不高，一转便知道
>>>背景介绍
转染能够让我们更好的研究目的基因是如何在细胞中进行表达和调控。目前常见的转染方法有：磷酸钙共沉淀法、电穿孔法、DEAE-葡聚糖和ploybrene、机械法（如显微注射和基因枪法）、阳离子脂质体试剂等，其中阳离子脂质体试剂转染是目前常用的转染方法。
图1：不同转染方法转染示意图（图片来源于每日生物评论）
不同转染方法的优劣对比
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转染方法 |
优势 |
劣势 |
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磷酸钙共沉淀法 |
价格低廉，操作较为简单
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转染效率不稳定，易发生DNA聚集等影响转染的效率，高胞毒性，转染效率较差 |
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电穿孔法 |
效率高，适用于所有类型的细胞 |
电穿孔仪价格相对昂贵，细胞致死率高，核酸和细胞用量大 |
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DEAE-葡聚糖 |
对贴壁细胞转染比较有效，也可用于某些悬浮细胞，操作简单、结果可重复 |
对细胞有偏好性，对细胞有一定的毒副作用，且转染时需要血清抑制细胞生长 |
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ploybrene聚凝胺 |
操作相对简单、价格一般 |
效率低、应用性有一定的局限 |
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阳离子脂质体试剂 |
操作简单、效率高、适用性广、重复性好、毒性低 |
价格略高于其他化学试剂 |
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病毒侵染法 |
效率高、对难转染细胞、原代细胞的转染效果很好 |
病毒包装流程复杂、病毒有一定危险性 |
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聚乙烯亚胺(polyethylenimine,PEI) |
价格低、操作简单，适用范围较广 |
效率低于脂质体类转染试剂、一些细胞接触后产生敏感反应 |
Hieff Trans脂质体核酸转染试剂作为一款阳离子脂质体转染试剂，与应用广泛的Lipo2000相比，具有更高的转化效率和更加便捷的操作。目前已经在多种细胞系中得以验证，具体可参见下文中验证过的细胞系汇总。
>>>作用原理
阳离子能够通过表面所带正电荷的静电作用将核酸包裹，形成核酸-脂质体复合体。细胞膜表面带负电荷，能够将该复合体吸附，被吸附后的复合体能够通过膜的融合作用或者细胞内吞的方式形成包涵体进入细胞。有小部分的DNA 能够从包涵体中被释放，并进入细胞质中，再进一步进入细胞核内转录、表达。
图2：脂质体介导的转染和内吞过程
>>>Hieff Trans转染试剂产品特点
高效性： 可对大多数真核细胞进行转染，并且对于常见细胞系转染效率达90%以上；
低毒性：转染细胞形态良好并表达大量的转染基因蛋白；
操作简便：可以直接将脂质体复合物加入到含血清的培养基中；
多样性：适合瞬时转染和稳定转染试验。
>>>操作流程
图3：细胞转染实验流程
>>>产品数据
图4：转染试剂双质粒验证结果
验证过的细胞系汇总
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293T |
293FT |
HEK293 |
HEK 293T |
Caco2 |
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COS-7 |
DF-1 |
Lenti X-293T |
HeLa |
HepG2 |
|
LM3 |
MCF-7 |
MDA-MB-231 |
MEF |
NCI-H1975 |
|
NIH-3T3 |
PC12 |
Raw264.7 |
Vero |
H9c2 |
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Hepa1-6 |
MCF10A |
CHO |
5-8F |
BV-2 |
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A549 |
3t3 |
H520 |
HUVEC |
C6 |
|
HaCaT |
N2A |
SGC-7901 |
H9 |
MKN-28 |
|
Hep 3B |
SMCC7721 |
RKO |
C2C12 |
More… |
>>>客户反馈结果展示
Hieff Trans Liposomal 转染应用
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细菌蛋白激活细胞自噬体形成 细胞：Hela 转染质粒：细菌效应蛋白A LC3II:自噬体标记蛋白 |
细胞分裂纺锤体结构 细胞：Hela 转染质粒：Flag-tubulin 细胞核染色：Hoechst33342 |
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Hieff Trans |
Lipo3000 |
Hieff Trans |
Lipo2000 |
| 图片来源：复旦大学 细胞系：Hek293 核酸类型：DNA | 图片来源：长春应化所 细胞系：Hela 核酸类型：DNA | ||
流式荧光观察结果
|
Hieff Trans (13.27%) |
Lipo2000 (8.64%) |
FuGenHD (9.24%) |
| 细胞系：C2c12 荧光蛋白：EGFP 核酸类型：DNA 数据来源：华南农业大学 | ||
客户提供的部分细胞系转染数据（仅供参考）
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细胞 |
培养板 |
细胞密度 |
DNA |
Hieff Trans |
效率 |
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293T |
6孔 |
80% |
1μg |
2μL |
90% |
|
293FT |
24孔 |
85% |
1μg |
4μL |
90% |
|
Hela |
12孔 |
90% |
0.2μg |
0.6μL |
90% |
|
Raw264.7 |
35mm皿 |
80% |
1μg |
2μL |
90% |
|
Hek293 |
6孔 |
95% |
2μg |
10μL |
80-90% |
|
NCI-H1975 |
6孔 |
80% |
4μg |
10μL |
80% |
|
3t3 |
12孔 |
90% |
1μg |
5μL |
50% |
>>>价格比较
图5：单次转染反应各公司价格对比
>>>FAQ
Q1：配制核酸转染试剂复合物时能否有血清的存在？
答：血清的存在会影响脂质体的形成，建议配制核酸转染试剂复合物时采用无血清培养基（一般推荐MEM培养基）。
Q2：转染实验过程中是否需要更换成无血清培养基？
答：不需要，我们的转染试剂可以在含血清的介质中进行转染的过程。
Q3：转染后需要进行终止吗？
答：不需要。脂质体复合物可以稳定存在6个小时。如果在进行转染前没有进行细胞换液，为了保证细胞正常生长所需的营养，需要在4～6小时后换用新的培养基。但如果转染之前已进行过换液则在脂质体转染后不需要进行再次换液。
Q4：转染试剂的保存及使用过程中的注意事项？
答：本试剂一定要4℃保存，要注意避免反复多次长时间开盖，长时间开盖会导致脂质体氧化而影响转染效率。
Q5：若想提高转染效率，应该注意什么？
答：a:转染时细胞的密度，90%-95%。
b:转染时，核酸和脂质体稀释液要用MEM无血清培养基。
c:转染后4-6h可选择换液。
>>>使用客户已发表文章
[1]. Hao, H., et al., Loss of Endothelial CXCR7 Impairs Vascular Homeostasis and Cardiac Remodeling After Myocardial Infarction: Implications for Cardiovascular Drug Discovery. Circulation, 2017. 135(13): p. 1253-1264.（IF 18.881）
[2] Zhang K, Zhao X, et al. Enhanced Therapeutic Effects of Mesenchymal Stem Cell-Derived Exosomes with an Injectable Hydrogel for Hindlimb Ischemia Treatment. ACS Appl Mater Interfaces. 2018 Sep 12;10(36):30081-30091.（IF 8.09）
[3] Yang R, Yang E, et al. IL-12+IL-18 cosignaling in human macrophages and lung epithelial cells activates cathelicidin and autophagy, inhibiting intracellular mycobacterial growth. J Immunol. 2018 Apr 1;200(7):2405-2417.（IF 4.539）
[4] Cheng H, Fan X, et al. Cyclodextrin-Based Star-Like Amphiphilic Cationic Polymer as a Potential Pharmaceutical Carrier in Macrophages. Macromol Rapid Commun. 2018 May 28:e1800207. （IF 4.441）
>>>产品订购
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产品名称 |
产品编号 |
规格 |
价格（元） |
|
Hieff Trans Liposomal Transfection Reagent 脂质体核酸转染试
|
|||
|
40802ES03 |
1.0 mL |
1308 |
|
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40802ES08 |
5×1 mL |
4878 |
>>>相关产品推荐
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应用场景 |
名称 |
货号 |
规格 |
|
细胞类型：贴壁/悬浮 核酸类型：DNA、siRNA |
40802ES02 |
0.5 mL |
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|
40802ES03 |
1.0 mL |
||
|
40802ES08 |
5×1 mL |
||
|
细胞类型：贴壁/悬浮 |
40803ES70 |
200 T |
|
|
用途：病毒感染、DNA转染 |
40804ES76 |
500 μL |
|
|
40804ES86 |
5×500 μL |
||
|
细胞类型：悬浮 |
40805ES02 |
0.5 mL |
|
|
40805ES03 |
1.0 mL |
||
|
40805ES08 |
5×1 mL |
||
|
细胞类型：贴壁/悬浮 |
40806ES01 |
0.1 mL |
|
|
40806ES02 |
0.5 mL |
||
|
40806ES03 |
1.0 mL |
||
|
细胞类型：贴壁/悬浮 |
40808ES02 |
0.5 mL |
|
|
40808ES03 |
1 mL |
||
|
40808ES08 |
5×1 mL |
||
|
细胞类型：贴壁/悬浮 |
40809ES01 |
0.1 mL |
|
|
40809ES03 |
1 mL |
||
|
细胞类型：贴壁/悬浮 |
40815ES03 |
1 g |
|
|
40815ES08 |
5×1 g |
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|
细胞类型：贴壁/悬浮 |
40816ES02 |
100 mg |
|
|
40816ES03 |
1 g |
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|
细胞类型：293 |
40820ES04 |
1.5 mL |
|
|
40820ES10 |
10 mL |
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|
40820ES60 |
100 mL |
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|
细胞类型：293 核酸类型：DNA 用途：AAV/LV载体大规模生产 |
40821ES10 |
10 mL |
|
|
40821ES60 |
100 mL |
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|
40821ES80 |
1 L |
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HB20190220
