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产品简介
PEI 40000是一种分子量为40000的高电荷阳离子聚合物，容易结合带负电荷的核酸分子，形成复合物，并使该复合物进入细胞中。PEI 40000是一种瞬时转染试剂，细胞毒性低，转染效率高，在HEK293和CHO等细胞中基因表达效率较高。目前已经验证线性PEI转染试剂广泛适用于多种细胞系包括HEK-293、HEK293T、CHO-K1、COS-1、COS-7、NIH/3T3、Sf9、HepG2和Hela细胞等，转染效率高达80%~90%。
PEI 40000与PEI 25000转染试剂相比，具有很多优点。包括：1. PEI 40000较易溶解，可直接在水中溶解，PEI 25000需要先把水调成弱酸性助其溶解，溶解后再用NaOH把pH调至中性；2. PEI 40000操作简便，更易于使用，且比PEI 25000的转染效果好；3. PEI 25000含有4-11%的丙酰基残留，其能阻止聚合物主链与DNA结合。相较于PEI 25000，PEI 40000是完全脱落的结构，因此其性能始终高效如一。
本产品为速溶型，溶解迅速，配制方便。
产品信息
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货号 |
40816ES01 / 40816ES02/ 40816ES03 |
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规格 |
5 mg / 100 mg / 1 g |
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中文名（Chinese Name） |
线性聚乙烯亚胺PEI 40000 |
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英文名（English Name） |
Polyethylenimine Linear (PEI) MW40000 |
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CAS号（CAS No.） |
49553-93-7 |
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分子式（Molecular formula） |
(CH2CH2NH)n |
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分子量（Molecular weight） |
40,000 |
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外观（Appearance） |
白色至灰白色固体 |
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溶解性（Solubility） |
溶于水，不溶于有机溶剂：苯，乙醚和丙酮 |
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结构式（Structure） |
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组分信息
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组分名称 |
40816ES01 |
40816ES02 |
40816ES03 |
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Hieff Trans®Polyethylenimine Linear(PEI) MW40000（rapid lysis） 线性PEI转染试剂（速溶型）MW40000 |
5 mg |
100 mg |
1g |
储存条件
室温密封保存，有效期2年。储存液在4 ºC保存，有效期3个月。
使用说明
储存液配置（1 mg/mL）
1）材料
PEI 40000、Milli-Q® 水/注射用水（WFI）或类似的生物级水、1 mol/L氢氧化钠（NaOH）、一次性0.1~0.2 μm PES真空无菌过滤器、无菌HDPE或聚丙烯储存瓶。
2）配置储存液（1 mg/mL）
- 于1 L玻璃烧杯，将1 g PEI 40000粉末加入900 mL Milli-Q®超纯水或其他相当级别的生物用水中，在磁子搅拌器上搅拌均匀。
- 待PEI 40000完全溶解（通常不到5 mins）。
- 用氢氧化钠(1 mol/L)溶液调节pH为6.80 - 6.90。
- 将溶液转入量筒内，并加水定容到1 L。
- 用一次性0.1~0.2 µm PES真空过滤器过滤除菌，即得到1 mg/mL的储存液。
- 根据需要分装并储存在4 °C，3个月稳定。
1.贴壁细胞转染操作流程（以6孔板为例）
1）接种细胞：为了提高转染效率，建议在转染前一天接种细胞，以转染时细胞密度在70%~80%为宜。
2）准备DNA-PEI复合物：按照以下体系配制DNA-PEI核酸-转染试剂复合物：
- 对于每孔细胞，使用100 μL无血清培养基稀释2 μg目的DNA，充分混匀成DNA稀释液。
- 立刻向100 μL的DNA稀释液中加入4 μL的PEI 40000转染试剂，轻轻混匀。
- 在室温下孵育10~15 min，使得形成DNA-PEI阳离子核酸转染试剂复合物。
3）转染细胞：
- 在形成复合物过程中，移除细胞生长培养基，每孔中加入2 mL新鲜预热的完全培养基。
- 直接将100 μL DNA-PEI核酸-PEI复合物加入细胞中，摇动培养板，轻轻混匀。
- 37 ℃，5% CO2培养箱培养，转染后最快5 h即可检测到转入基因的表达。请自行确定适合检测时间。
不同细胞培养容器转染用量（仅供参考）：
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培养皿 |
表面积（cm2） |
DNA的量（μg） |
转染试剂的量（μL） |
稀释液体积（μL） |
培养基总量 |
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96孔板 |
0.3 |
0.1 |
0.1 |
10 |
100 μL |
|
48孔板 |
0.7 |
0.2 |
0.3 |
20 |
200 μL |
|
24孔板 |
1.9 |
0.5 |
1 |
50 |
500 μL |
|
12孔板 |
3.8 |
1 |
2 |
50 |
1mL |
|
6孔板 |
10 |
2 |
4 |
100 |
2 mL |
|
25cm2培养瓶 |
21 |
4 |
8 |
200 |
4 mL |
|
75cm2培养瓶 |
58 |
10 |
20 |
500 |
10 mL |
【注】：该表使用量仅供参考，具体使用量还需根据细胞类型及其他实验条件进行优化。
2.悬浮细胞转染操作流程（1L体系为例）
1）接种细胞
根据细胞状态，选择合适的接种密度，建议细胞接种密度为1-1.5×106 cells/mL，使第二天转染时细胞密度为2-3×106 cells/mL为宜。
2）准备DNA-转染试剂复合物
- 质粒与试剂比例：建议质粒（μg）与试剂（μL）参考配比区间为1:0.5 - 1:3。
- 质粒稀释：使用50 mL无血清培养基稀释2 mg质粒，并轻轻混匀。
- 试剂稀释：使用50 mL无血清培养基稀释4 mL 转染试剂，并轻轻混匀。
- 配置复合物：将配置好的转染试剂稀释液加入到质粒稀释液中，轻轻涡旋混匀后，室温静置10-20 mins，备用。
3）转染细胞
- 直接将配置好的DNA-转染试剂复合物加入到1L细胞悬液中，摇动培养瓶，轻轻混匀。
- 在37℃，5% CO2培养箱中培养24-72h后进行检测分析。
注意事项
1. 本品为盐酸盐形式的聚乙烯亚胺，具有易结块倾向。
2. 对大多数细胞来而言，每1 μg DNA 使用3.0 μL PEI 40000转染试剂都能获得较高转染效率。
3. 本产品仅作科研用途。
4. 为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
Ver.CN20241023
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