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Hieff Trans®通用型转染试剂是基于最新的纳米技术研发的一款多用途、便捷高效的脂质体转染试剂，适用于DNA、RNA和寡核苷酸的转染，对难转染细胞也具有较高的转染效率。其独特的配方使其可直接加入培养基中，血清的存在不会影响转染效率，这样可以减少去除血清对细胞的损伤。转染后不需要除去核酸-转染试剂复合物或更换新鲜培养基，也可根据细胞营养状态在4-6小时后更换新鲜培养基。
产品组分
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组分编号 |
组分名称 |
规格/货号 |
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40808ES02 |
40808ES03 |
40808ES03 |
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40808-A |
Universal-A溶液 |
0.5 mL |
1 mL |
5×1 mL |
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40808-B |
Universal-B溶液 |
0.5 mL |
1 mL |
5×1 mL |
运输与保存方法
冰袋（wet ice）运输。产品2-8ºC保存，一年有效。不可冷冻！
注意事项
1) 转染操作时，以细胞融合度达70%-90%为佳，具体铺板密度根据细胞情况酌情而定。
2) 制备转染复合物时要求用无血清培养基稀释DNA和转染试剂。
3) 转染的时候培养基中不能添加抗生素。
4) 使用高纯度的DNA或RNA有助于获得较高的转染效率，质粒中的内毒素是转染的大敌。
5) 2-8ºC保存，要注意避免多次反复长时间开盖。
6) 初次使用应优化核酸浓度和试剂量以得到最高的转染效率。
7) 本产品仅作科研用途！
操作流程
1. DNA转染
注：转染试剂使用量受细胞类型及其他实验条件影响，建议初次使用时设置梯度进行优化最佳使用量。
1) 细胞铺板，至转染操作时，以细胞融合度达70%-90%为佳。
2) 按照下表使用Opti-MEM培养基稀释Universal-B溶液，轻轻混匀。
3) 使用Opti-MEM培养基稀释DNA，得到DNA预混液，然后添加Universal-A溶液，轻轻混匀，得到稀释的DNA。
4) 将稀释的DNA加入已稀释的Universal-B溶液中(1:1比例)。
5) 室温孵育5分钟。
6) 将DNA-脂质体复合物逐滴加到细胞中，轻轻混匀。
7) 37℃，5% CO2培养箱培养48-96 h，直至进行基因表达分析。
2. siRNA转染
转染siRNA操作与DNA的转染操作流程一样，但在稀释siRNA时则不需要加入Universal-A溶液(第3步)。
不同细胞培养容器转染用量（仅供参考）：
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培养皿 |
96-well |
24-well |
6-well |
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贴壁细胞 |
1-4×104 |
0.5-2×105 |
0.25-1×106 |
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使用Opti-MEM培养基稀释Universal-B溶液，轻轻混匀。 |
Opti-MEM培养基 |
5 μL |
25 μL |
125 μL |
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Universal-B溶液 |
0.2 μL |
1 μL |
5 μL |
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使用Opti-MEM培养基稀释DNA，得到DNA预混液，然后添加Universal-A溶液，轻轻混匀，得到稀释的DNA。 |
Opti-MEM培养基 |
5 μL |
25 μL |
125 μL |
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DNA (0.5–5 μg/μL) |
0.1 μg |
0.5 μg |
2.5 μg |
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Universal-A溶液(2 μL/μg DNA) |
0.2 μL |
1 μL |
5 μL |
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将稀释的DNA加入已稀释的Universal-B溶液中(1:1比例)。 |
稀释的DNA |
5 μL |
25 μL |
125 μL |
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稀释的Universal-B溶液 |
5 μL |
25 μL |
125 μL |
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室温孵育5分钟 |
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DNA-脂质体复合物形成 |
复合物成分（每孔） |
96-well |
24-well |
6-well |
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Opti-MEM培养基 |
10 μL |
50 μL |
250 μL |
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DNA(0.5–5 μg/μL) |
0.1 μg |
0.5 μg |
2.5 μg |
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|
Universal-B溶液 |
0.2 μL |
1 μL |
5 μL |
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Universal-A溶液 |
0.2 μL |
1 μL |
5 μL |
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将DNA-脂质体复合物逐滴加到细胞中，轻轻混匀。 |
DNA-脂质体复合物 |
10 μL |
50 μL |
250 μL |
【注】该表使用量仅供参考，DNA与Universal-B溶液具体使用量还需根据细胞类型及其他实验条件进行优化。建议使用时比值保持在1:0.5-1:5之间。
相关产品
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名称 |
货号 |
规格 |
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Hieff Trans® Liposomal Transfection Reagent 脂质体核酸转染试剂 |
40802ES02 |
0.5 mL |
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40802ES03 |
1.0 mL |
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40802ES08 |
5×1mL |
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Calcium Phosphate Cell Transfection Kit 磷酸钙法细胞转染试剂 |
40803ES70 |
200 T |
|
Polybrene (hexadimethrine bromide) 聚凝胺（10 mg/ml） |
40804ES76 |
500 μL |
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40804ES86 |
5×500 μL |
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Hieff Trans® Suspension Cell-Free Liposomal Transfection Reagent 悬浮细胞专用脂质体核酸转染试剂 |
40805ES02 |
0.5 mL |
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40805ES03 |
1.0 mL |
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40805ES08 |
5×1 mL |
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|
Hieff Trans® in vitro siRNA/miRNA Transfection Reagent siRNA/miRNA体外转染试剂 |
40806ES02 |
0.5 mL |
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40806ES03 |
1.0 mL |
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Polyethylenimine Linear(PEI) MW25000 线性PEI转染试剂MW25000 |
40815ES03 |
1 g |
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40815ES08 |
5×1 g |
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Polyethylenimine Linear(PEI) MW40000（rapid lysis）线性PEI转染试剂（速溶型）MW40000 |
40816ES02 |
100 mg |
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40816ES03 |
1 g |
HB220930
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