产品简介

 

Hieff Trans^®293 Transfection Reagent转染试剂是一种高性能阳离子聚合物转染试剂，适用于常见贴壁或悬浮的多种细胞的质粒DNA转染，其中在293细胞上有更好的转染效果，可用于悬浮或贴壁293细胞进行蛋白表达及病毒包装。Hieff Trans^®293 Transfection Reagent转染试剂经过精心设计，结构明确、分子量均一，可实现高效、高重复性的细胞转染使其兼具高效的阳离子聚合物转染试剂/DNA复合物形成能力和转染到细胞内DNA的快速释放能力，保证了优异的转染性能和极低的细胞毒性。

 

组分信息

 

组分名称	40818ES01	40818ES03	40818ES10	40818ES60
Hieff Trans®293 Transfection Reagent	100 μL	1 mL	10 mL	100 mL

 

储存条件

 

2-8ºC保存，有效期2年。

 

使用说明

 

一、贴壁细胞转染操作流程（以6孔板贴壁培养HEK 293T为例）

1. 接种细胞

根据细胞状态，选择合适的接种密度，以转染时细胞密度在70%~80%为宜。

2. 准备DNA-转染试剂复合物

1）质粒与试剂比例：建议质粒（μg）与试剂（μL）参考配比区间为1:0.5 - 1:3。

2）质粒稀释：使用50 μL无血清培养基稀释2 μg质粒，并轻轻混匀。

3）试剂稀释：使用50 μL无血清培养基稀释4 μL 转染试剂，并轻轻混匀。

4）配置复合物：将配置好的转染试剂稀释液加入到质粒稀释液中，轻轻涡旋混匀后，室温静置10-20 mins，备用。

3. 转染细胞

1）直接将配置好的DNA-转染试剂复合物加入到细胞培养板的每个孔中，摇动培养板，轻轻混匀。

2）在37℃，5% CO2培养箱中培养24-72h后进行检测分析。

 

不同细胞培养容器转染用量（仅供参考）：

培养容器	表面积（cm2）	DNA稀释		转染试剂稀释		培养基 总量
		DNA量（μg）	稀释液体积（μL）	转染试剂量（μL）	稀释液体积（μL）
96孔板	0.3	0.1	5	0.2	5	100 μL
48孔板	0.7	0.2	10	0.4	10	200 μL
24孔板	1.9	0.5	25	1	25	500 μL
12孔板	3.8	1	25	2	25	1 mL
6孔板	10	2	50	4	50	2 mL
25 cm2培养瓶	21	4	100	8	100	4 mL
75 cm2培养瓶	58	8	250	16	250	10 mL
10 cm培养皿	60	8	250	16	250	10 mL

二、悬浮细胞转染操作流程（1L体系为例）

1. 接种细胞

根据细胞状态，选择合适的接种密度，建议细胞接种密度为1-1.5×10⁶ cells/mL，使第二天转染时细胞密度为2-3×10⁶ cells/mL为宜。。

2. 准备DNA-转染试剂复合物

1）质粒与试剂比例：建议质粒（μg）与试剂（μL）参考配比区间为1:0.5 - 1:3。

2）质粒稀释：使用50 mL无血清培养基稀释2 mg质粒，并轻轻混匀。

3）试剂稀释：使用50 mL无血清培养基稀释4 mL 转染试剂，并轻轻混匀。

4）配置复合物：将配置好的转染试剂稀释液加入到质粒稀释液中，轻轻涡旋混匀后，室温静置10-20 mins，备用。

3. 转染细胞

1）直接将配置好的DNA-转染试剂复合物加入到1L细胞悬液中，摇动培养瓶，轻轻混匀。

2）在37℃，5% CO2培养箱中培养24-72h后进行检测分析。

 

注意事项

 

1. 本产品仅作科研用途。

2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

 

 

Ver.CN20241012