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Annexin V-FITC/PI Apoptosis Detection Kit Annexin V-FITC/PI 细胞凋亡检测试剂盒
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Annexin V-FITC/PI细胞凋亡检测试剂盒是用FITC标记的Annexin V作为探针,来检测细胞早期凋亡的发生。

其检测原理为:在正常的活细胞中,磷脂酰丝氨酸(phosphotidylserine,PS)位于细胞膜的内侧,但在早期凋亡的细胞中,PS 从细胞膜的内侧翻转到细胞膜的表面,暴露在细胞外环境中。Annexin-Ⅴ(膜联蛋白-V)是一种分子量为35-36 kDa的Ca2+ 依赖性磷脂结合蛋白,能与PS高亲和力结合,可通过细胞外侧暴露的磷脂酰丝氨酸与凋亡早期细胞的胞膜结合。

另外,本试剂盒中还提供了碘化丙啶(Propidium Iodide,PI)用来区分存活的早期细胞和坏死或晚期凋亡细胞。PI是一种核酸染料,它不能透过正常细胞或早期凋亡细胞的完整的细胞膜,但可以透过凋亡晚期和坏死细胞的细胞膜而使细胞核染红。因此,将Annexin V与PI联合使用时,PI 则被排除在活细胞(Annexin V-/PI-)和早期凋亡细胞(Annexin V+/PI-)之外,而晚期凋亡细胞和坏死细胞同时被FITC 和PI 结合染色呈现双阳性(Annexin V+/PI+)。

本试剂盒可用于流式细胞仪、荧光显微镜进行检测。

产品特色

检测便捷、准确

存储条件

冰袋(wet ice)运输。-20℃避光保存,避免反复冻融,一年有效。

【注】:如果需要在短时间内多次重复使用,可以在4℃避光保存,半年有效。

FAQ

Q:Annexin V 和 JC-1、Tunel 细胞凋亡检测的区别?

A: Annexin V 是检测细胞早期凋亡的试剂,JC-1 是检测细胞中期凋亡的试剂、Tunel 是检测细胞晚期凋亡的试剂。

Q:Annexin V 和JC-1、Tunel 细胞凋亡检测的可以应用到植物或是细菌(原核生物) 吗?

A:可以,但是需要制备原生质体,因为植物细胞或是细菌(原核生物)含有细胞壁,具体的染液使用剂量只需浸没细胞即可,染色时间对于不同细胞有一定的不同。

Q:40302ES Annexin V-FITC/PI 细胞凋亡检测试剂盒里的PI的浓度是多少呢?

A:20ug/ml。

Q:实验结果如何判断?

A:活细胞(Annexin V-/PI-)

 早期凋亡细胞(Annexin V+/PI-)

 晚期凋亡细胞和坏死细胞呈现双阳性(Annexin V+/PI+)

 裸核(Annexin V-/PI+)

Q: ​Annexin V和TUNEL有什么区别?

A:末端脱氧核苷酸转移酶 dUTP 缺口末端标记 (TUNEL) 是一种染色方法,用于识别细胞内 DNA 片段化位点——晚期细胞凋亡的标志性特征。 它使用酶末端脱氧核苷酸转移酶 (TdT) 将修饰的 dNTP(例如 dUTP)连接到片段化 DNA 链的 3'-羟基末端。 dNTPs 通常用荧光团修饰以促进量化和/或可视化。

Annexin V 染色通过结合由于细胞膜不对称性丧失而暴露在细胞外的 PS 残基来识别细胞凋亡的早期阶段。 Annexin V 通常用 FITC 等荧光团标记,以促进凋亡细胞的检测。

Q: ​1×Binding Buffer 的成分是什么?可以用什么替代?

A:该缓冲液的具体成分信息属于保密内容。如有替代需求,可选用PBS或Hanks缓冲液,但需补充添加2.5 mM CaCl₂,并将pH值调整至7.5。

Q: ​是否可以仅使用Annexin V-FITC进行检测而不检测PI?

A:可以的。对于特殊的检测样本,如红细胞无细胞核,如使用药物Doxorubicin(阿霉素)对PI检测存在干扰,对于这两种情况可以仅使用Annexin V-FITC进行检测。

Q: ​是否可以对组织切片进行染色(冰冻切片或石蜡切片)?

A:不可以。

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