Exosome（外泌体）是由活细胞分泌的直径约为 30-150nm 的小囊泡 ，具有典型的脂质双分子层结构；存在于细胞培养上清液、血清、血浆、唾液、尿液、羊水以及其它生物体液中； Exosome 携带有多种蛋白质、脂类、 DNA 和 RNA 等重要信息 ，不仅在细胞与细胞间的物质和信息传递中起重要作用 ，更有望成为多种疾病的早期诊断标志物。

本试剂盒采用独特的分离技术 ，可以快速从血清/血浆中获得大量完整的外泌体颗粒 ，提取的外泌体可用于 NTA 粒径分析 ，Western Blot ，核酸提取及其后续分析（Q-PCR，测序等） ，不建议用于外泌体标记和蛋白质质谱分析等。

组分信息

快速从血清/血浆中获得大量完整的外泌体颗粒 ，提取的外泌体可用于 NTA 粒径分析 ，Western Blot ，核酸提取及其后续分析（Q-PCR，测序等）。

一、样本预处理

1.对于冻存样品 ，室温或 25℃水浴解冻 ，将完全融化的样品置于冰上；

2.对于新鲜样品 ，收集样品后置于冰上 ，3,000×g ，4 ℃离心15 min ，去除细胞或细胞碎片 ，离心后将上清吸入新管中。

二、沉淀外泌体

1.吸取 250 μL（至少100 μL）处理后的血清或血浆放入 1.5 mL 离心管（试剂盒不提供） ，加入等体积（250 μL） 的样品稀释液 ，混匀 ，然后加入125 μL外泌体提取试剂 ，颠倒充分混匀后 4℃静置至少30 min。

2.静置后的样品 10,000×g ，4℃离心30 min ，管底可见白色沉淀 ，吸去上清 ，10,000×g ，4℃离心5 min ，完全去除残留液体 ,  注意不要破坏外泌体沉淀。

三、外泌体重悬

加入100 μL样品稀释液 ，或下游应用所需的相应缓冲液 ，用移液器反复吹打或漩涡混合均匀 ，彻底溶解沉淀 ，此重悬液中含有提取的完整外泌体。

四、外泌体纯化

将重悬的外泌体转移至纯化柱 ，放入1.5 mL收集管（试剂盒提供） 中 ，2,000×g ，4℃离心 5 min ，弃掉纯化柱 ，收集管中为提取的外泌体。提取的外泌体可直接应用于下游实验（如 ，粒径分析、核酸提取等） ，或者储存在2-8℃保存一周 ，或者-80 ℃保存大约三个月。

本试剂盒室温下运输，室温或2-8℃下保存12个月（按照试剂盒不同成分分别保存），使用前请充分混匀。

Q:  41216ES和41206ES有什么区别？

A:  41216ES是升级款。升级款多加了除杂蛋白的试剂solution P2，除杂蛋白的效果会好很多。结果上来说，同样的样品41216ES提取的蛋白浓度会低一些，但是纯度会高一些。两款试剂盒都是共沉淀法，做蛋白质组学推荐41216ES新款试剂盒。新款试剂盒对杂蛋白的效果更好，对下游实验的影响也小。

Q: 外泌体纯化柱有纯化的作用吗？

A: 纯化柱是220 nm过滤柱，有去除大颗粒杂质的功能。