本试剂盒为葡萄糖氧化酶法(GOD-POD)测定葡糖糖含量,可以用于不同样本的葡萄糖含量测定。液体样本(参照血清操作和计算方法),固体样本(参照组织、细胞的操作及计算方法),主要用于酶标仪测定葡萄糖含量。
产品信息
线性 | 2.2~15 mmol/L 范围内,R2>0.995。 |
组分信息
组分编号 | 组分名称 | 60408ES60 |
60408-A | 工作液 | 25 mL |
60408-B | 标准品 | 0.1 mL(浓度见标签) |
本产品是一种基于酶法的检测工具,用于定量测定葡萄糖含量。
研究应用:
- 样本处理:样本需按要求处理,避免干扰物质影响检测结果。
- 试剂保存:试剂需在指定条件下保存,避免反复冻融。
- 操作规范:严格按照说明书操作,确保结果准确可靠。
使用说明
- 样本处理
- 血清(或肝素抗凝血浆):直接测定,如超过线性范围用生理盐水推荐(Cat# 60372)稀释后测定。
- 培养液样本:吸取培养液,1000转/分,离心10 min,取上清测定。一般建议细胞密度在100万个/mL以上。
- 组织样本:准确称取组织重量,按重量(g):体积(mL)=1:9的比例,加入9倍体积的生理盐水(或PBS),冰水浴条件下机械匀浆,2500转/分,离心10 min,取上清液待测。
- 细胞样本:建议收集的细胞密度在100万个/mL以上。破碎好的液体可显微镜观察细胞是否破碎完全。
- 细胞收集:将制备好的细胞悬液取出,1000转/分,离心10 min,弃上清液,留细胞沉淀。用等渗缓冲液(推荐Cat# 60152 D-PBS,不含钙、镁离子,1X)清洗1~2次,同样1000转/分,离心10 min,弃上清液,留细胞沉淀;
- 细胞破碎:加入0.2~0.3 mL的匀浆介质(推荐Cat# 60152 D-PBS,不含钙、镁离子,1X)进行匀浆,冰水浴条件下超声破碎(功率 300W,3~5 s/次,间隔30 s,重复3~5次)或手动匀浆,制备好的匀浆液不离心直接测定。也可采用裂解液裂解(推荐推荐Cat# 20107 Triton X-100, Molecular Biology Grade 曲拉通X-100(分子生物学级),1~2%,裂解30~40 min),裂解好的液体不离心直接测定。
2. 操作表
表1 96孔板加样方法(酶标仪比色测定)
加样种类 | 空白孔 | 标准孔 | 样本孔 |
蒸馏水(μL) | 2.5 | / | / |
标准品(μL) | / | 2.5 | / |
样本(μL) | / | / | 2.5 |
工作液(μL) | 250 | 250 | 250 |
轻轻振荡孔板,37℃孵育10 min,波长505 nm, 酶标仪测定各孔吸光度值。
3. 计算公式
- 血清等液体样本计算公式
酶标仪比色:
C标准:标准品浓度,5.55 mmol/L(具体浓度以标签为准)
2. 组织、细胞计算公式(组织、细胞不建议使用生化分析仪测)
蛋白浓度(Cpr,单位 g/L)可使用考马斯亮蓝法、BCA法测定
2~8℃避光保存,有效期1年。
Q:可以检测培养基吗?
A:可以的,但是酚红会有影响,建议做对照扣除,培养基并进行适当的稀释。
Q:该试剂盒的组分A的工作液是否含有酶和显色剂呢?
A:是的。该试剂盒是GOD-POD方法,原理是葡萄糖氧化酶GOD利用氧和水将葡萄糖氧化为葡萄糖酸并释放过氧化氢,而过氧化物酶POD在色原性氧受体存在时将过氧化氢分解为水和氧,该工作液中除含有POD和GOD外,还有色原性氧受体:4-氨基安替比林4-AAP,POD催化4-氨基安替比林和酚去氢缩合为红色醌类化合物,红色醌类化合物的生成量与葡萄糖含量成正比。
Q:可以检测食品中的葡萄糖吗?
A:不推荐用于食品中葡萄糖的检测。
[1] Huang T, You Q, Liu J, Shen X, Huang D, Tao X, He Z, Wu C, Xi X, Yu S, Liu F, Wu Z, Mao W, Zhu S. WTAP Mediated m6A Modification Stabilizes PDIA3P1 and Promotes Tumor Progression Driven by Histone Lactylation in Esophageal Squamous Cell Carcinoma. Adv Sci (Weinh). 2025 Jun 5:e06529. doi: 10.1002/advs.202506529. Epub ahead of print. PMID: 40470706. (IF: 15.8)