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产品简介
本品是在大肠杆菌BL21（DE3）菌株基础上制备的化学转化感受态细胞，是以T7 RNA聚合酶为表达系统的高效蛋白表达宿主。可同时表达T7 RNA聚合酶和大肠杆菌RNA聚合酶，用于pET系列，pGEX，pMAL等质粒的蛋白表达。适合于非病毒蛋白重组表达。使用pUC19检测转化效率达107 cfu/μg DNA以上。
BL21（DE3）感受态细胞基因型：F -ompT hsdSB (rB-mB-) gal dcm (DE3)。
产品信息
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货号 |
11804ES80 |
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规格 |
10×100 μL |
储存条件
-85~-65℃保存，有效期6个月。请勿将本品置于-20℃或液氮中保存。
使用方法
- 将100 μL感受态细胞从冰箱中拿出迅速插入冰上，冰浴、解冻（大约5 min）。
- 立即向解冻后的感受态细胞悬液中加入目的DNA，轻轻弹匀，冰浴静置30 min。
*所加DNA体积不要超过感受态细胞悬液体积的十分之一。
- 42℃水浴中热激90 sec，然后快速将EP管转移到冰上，静置2-3 min。
*此过程不要晃动，否则会降低转化效率。
- 向离心管中加入900 μL左右不含抗生素的LB或SOC培养基，混匀后37℃，200 rpm复苏45 min。
- 5,000 rpm离心1 min收集菌体，留取100 μL左右上清涂布至含有相应抗生素的培养板上，37℃培养过夜。
注意事项
1. 本产品不可反复冻融，以免降低感受态细胞的转化效率。
2. 本产品在冰中解冻时间不宜过长，感受态细胞刚化冻时转化效率最高。
3. 混入质粒时应轻柔操作。
4. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
5. 本产品仅作科研用途！
Ver.CN20240118
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