DH5α Chemically Competent Cell DH5α 化学感受态细胞

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产品描述

本品是采用DH5α菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞,可用于DNA的化学转化,广泛适用于高效的DNA克隆和质粒扩增,能保证高拷贝质粒的稳定遗传,适用于蓝白斑筛选。DH5α细胞重组酶recA1和核酸内切酶endA1基因缺失突变使其能保证克隆DNA的稳定性。使用pUC19质粒检测,转化效率约达108 cfu/μg DNA

DH5α细胞基因型:F- φ80 lac ZΔM15 Δ(lacZYA-arg F) U169 endA1 recA1 hsdR17(rk-,mk+) supE44λ- thi -1 gyrA96 relA1phoA

 

产品组分

编号

组分

产品编号/规格

11802ES80

11802ES92

11802-A

DH5α 感受态细胞

100 μL×10

100 μL×100

11802-B

pUC19 (control vector, 10 pg/μL)

10 μL

10 μL

 

运输与保存方法

干冰运输;-80℃保存,有效期6个月。请勿将本品置于-20℃或者液氮中保存。

 

注意事项

1) 本产品应保存在-80℃,不可反复冻融,以免降低感受态细胞的转化效率。

2) 本产品在冰中解冻时间不宜过长,感受态细胞刚化冻时转化效率最高。

3) 混入质粒时应轻柔操作。

4) 为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作

5) 本产品仅作科研用途!

 

使用方法

1. 100 μL感受态细胞,冰浴、解冻(大约5 min

2. 立即向解冻后的感受态细胞悬液中加入目的DNA,轻轻弹匀,冰浴静置25 min

注:所加DNA体积不要超过感受态细胞悬液体积的十分之一。

3. 42℃水浴中热激45 sec,然后快速将EP管转移到冰上,静置2 min

注:此过程不要晃动,否则会降低转化效率。

4. 向离心管中加入700 μL左右不含抗生素的LB2YT培养基,混匀后37℃200 rpm复苏60 min

5. 5000 rpm离心1 min收集菌体,留取100 μL左右上清涂布至含有相应抗生素的培养板上,37℃培养过夜。如进行蓝白斑筛选操作,请将平板放 37培养至少15 h

 

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货号

规格

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HB210720

400-6111-883