2×Hieff^® Robust PCR Master Mix (No Dye)选用改造的Taq DNA Polymerase，添加强力延伸因子、扩增增强因子以及优化的缓冲体系，扩增速度和扩增产量较普通PCR Mix有了质的飞跃。扩增速度可达15 sec/kb，适用于快速PCR反应，1 kb以内的极限扩增速度可达5 sec/kb，大幅节省PCR反应时间。预混液中含有dNTP、Mg2+，使用时只需加入引物和模板即可进行扩增，大大简化实验的操作步骤。体系中加入的保护剂使得 Master Mix 经过反复冻融后仍可保持稳定的活性。PCR产物的3’端带A，可轻松克隆至T载体。本产品中不含染料，PCR产物需加入Loading buffer 后进行电泳。

 

PCR反应体系（推荐冰上配制）

组分	体积	终浓度
模板DNA	适量	-
Primer正向 (10 μM)	2.5 μL	0.5 μM
Primer反向 (10 μM)	2.5 μL	0.5 μM
2×Hieff® Robust PCR Master Mix（No Dye）	25 μL	1×
ddH2O	to 50 μL	-

【注】：使用前请务必将其彻底混匀。

a）模板使用量：人基因组DNA：30-100 ng；大肠杆菌基因组DNA：10-100 ng；λDNA：0.5-5 ng；质粒DNA：0.1-10 ng。

b）Mg2+浓度：本产品中含有3 mM的MgCl2，适合大部分PCR反应。

 

PCR扩增条件

循环步骤	温度 (°C)	时间	循环数
预变性	94	3-5 min	1
变性	94	10 sec	30-35
退火	55	20 sec
延伸	72	15-30 sec/kb
终延伸	72	5 min	1

【注】:  a）退火温度：请参考引物的理论Tm值，退火温度可设置低于引物理论值1-2°C。

   b）延伸速度：长度1 kb以内的基因可选择5-15 sec/kb。

 

运输和保存方法

冰袋运输。-20°C保存，有效期2年。

 

注意事项

1）PCR反应体系需在冰上配制，体系混匀后快速置于PCR仪进行反应。

2）本产品PCR产物不适用于聚丙烯酰胺凝胶电泳。

3）为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

4）本产品仅作科研用途！

 

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产品名称	货号	规格
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