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产品简介
2×Hieff® Robust PCR Master Mix (With Dye)选用改造的Taq DNA Polymerase，添加强力延伸因子、扩增增强因子以及优化的缓冲体系，扩增速度和扩增产量较普通PCR Mix有了质的飞跃。扩增速度可达15 sec/kb，适用于快速PCR反应，1 kb以内的极限扩增速度可达5 sec/kb，大幅节省PCR反应时间。预混液中含有dNTP、Mg2+，使用时只需加入引物和模板即可进行扩增，大大简化实验的操作步骤。Mix中含有电泳指示染料，可在反应结束后直接进行电泳，使用方便。体系中加入的保护剂使得Master Mix经过反复冻融后仍可保持稳定的活性。PCR产物的3’端带A，可轻松克隆至T载体。
储存条件
-25~-15℃保存，有效期2年。
使用说明
PCR反应体系和扩增条件（推荐冰上配制）
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组分 |
体积 (μL) |
|
循环步骤 |
温度 (°C) |
时间 |
循环数 |
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模板DNA |
适量 |
预变性 |
94 |
3-5 min |
1 |
|
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Primer正向 (10 μM) |
2.5 |
变性 |
94 |
10 sec |
30-35 |
|
|
Primer反向 (10 μM） |
2.5 |
退火 |
55 |
20 sec |
||
|
2×Hieff® Robust PCR Master Mix |
25 |
延伸 |
72 |
15-30 sec/kb |
||
|
ddH2O |
to 50 |
终延伸 |
72 |
5 min |
1 |
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表1 扩增体系（50 μL） |
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表2 扩增条件 |
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【注】：使用前请务必将其彻底混匀。
1）模板使用量：人基因组DNA：30-100 ng；大肠杆菌基因组DNA：10-100 ng；λDNA：0.5-5 ng；质粒DNA：0.1-10 ng。
2）Mg2+浓度：本产品中含有3 mM的MgCl2，适合大部分PCR反应。
3）退火温度：请参考引物的理论Tm值，退火温度可设置低于引物理论值1-2℃。
4）延伸速度：长度1 kb以内的基因可选择5-15 sec/kb。
注意事项
1.PCR反应体系需在冰上配制，体系混匀后快速置于PCR仪进行反应。
2.本产品PCR产物不适用于聚丙烯酰胺凝胶电泳。
3.为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
4.本产品仅作科研用途！
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