高保真PCR之痛

PCR扩增产物常发生碱基突变，导致后续实验应用无法进行？

手边的高保真酶，花了一上午时间PCR扩增，竟然扩出来抹带！更绝望的是，甚至有的基因啥都没P出来！

常常经过无数次的条件优化，最终还是得不到满意的产物。

...

Hieff Canace® Gold高保真DNA聚合酶基于Pyrococcus Furiosis DNA Polymerase，经基因工程改造而成。其3’→5’外切酶结构域经改造后，大幅度提升了酶的保真性。此外，酶溶液中添加了独特的反应增强因子、热启动因子和延伸因子，极大提高了扩增的成功率，特异性和延伸速度。对于高保真PCR应用而言，具有高保真性、高成功率、高特异性的Hieff Canace® Gold高保真DNA聚合酶是理想选择。

产品特点

保真性高：Taq酶的52倍，Pfu酶的6倍。

特异性好：目的条带单一。

延伸速度快：可达15 sec/kb，极限速度1 sec/kb。

灵敏度高：可扩增低至1 pg模板。

适用性广：适合不同长度，不同GC含量模板的扩增。

产品应用

高保真 PCR；基因克隆；定点突变；高通量 PCR。

产品数据

» 保真性高：Taq酶的52倍

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图1. Hieff Canace® Gold 高保真DNA聚合酶的保真性是Taq酶的52倍，pfu酶的6倍。（Lac I法测定）

» 高特异性：目的条带单一

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图2. 5种品牌的高保真DNA聚合酶扩增2 kb，4 kb的小鼠gDNA。Hieff Canace® Gold高保真DNA聚合酶与同类产品对比，显示出更高的特异性和产量。

Y：Hieff Canace® Gold高保真DNA聚合酶；A-E：其他品牌的高保真DNA聚合酶；M：1kb DNA Marker。

» 延伸速度快：可达15 sec/kb，极限速度达1 sec/kb

图3. Hieff Canace® Gold高保真DNA聚合酶分别扩增小鼠gDNA 2 kb和水稻gDNA 3 kb片段。不同延伸速度（1-60 sec/kb）都可有效扩增。M：1kb DNA Marker。

» 灵敏度高：可扩增低至1 pg模板

图4. Hieff Canace® Gold高保真DNA聚合酶扩增质粒3 kb片段，不同模板量（1 pg-0.5 μg）都可有效扩增。NC：阴性对照。M：1kb DNA Marker。

» 适用于不同GC含量片段的扩增

图5. Hieff Canace® Gold高保真DNA聚合酶对不同GC含量（30-70%）片段都可高效率的进行扩增。M：1kb DNA Marker。

» 适用于不同长度片段的扩增

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图6. Hieff Canace® Gold高保真DNA聚合酶对不同模板、不同长度（1-12 kb）片段都可高效率的进行扩增。

M：1kb DNA Marker。模板：1-3：拟南芥gDNA，4-6：水稻gDNA，7-9：小鼠gDNA，10：人cDNA，11-18：人gDNA，19-21：质粒DNA，22：λDNA。

客户反馈

» Toyobo KOD Plus neo无扩增的基因，Yeasen Canace gold可以！

图7. 用Toyobo KOD Plus neo和Yeasen Canace gold扩增拟南芥cDNA 2 kb片段，Toyobo KOD Plus neo扩增无条带，Yeasen Canace gold扩增单一目的条带。M：DL10,000 DNA Marker。

» Yeasen Canace gold产量更高！

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图8. 用Yeasen Canace® Gold和Takara PrimeSTAR®Max高保真酶平行对比扩增质粒DNA。

翌圣Canace® Gold高保真酶的产量明显更高。Y：Yeasen Hieff Canace® Gold高保真酶；T：Takara PrimeSTAR®Max高保真酶。M：DL2,000 DNA Marker。

部分发表文献

[1]. hu M, Dai X. Growth suppression by altered (p) ppGpp levels results from non-optimal resource allocation in Escherichia coli[J]. Nucleic acids research, 2019, 47(9): 4684-4693. （IF11.6）

[2]. Guo L, Yang W, Huang Q, et al. Selenocysteine-specific mass spectrometry reveals tissue-distinct selenoproteomes and candidate selenoproteins[J]. Cell chemical biology, 2018, 25(11): 1380-1388. e4.（IF6.762）

[3]. Li Y, Xu W, Zhang F, et al. The Gut Microbiota-Produced Indole-3-Propionic Acid Confers the Antihyperlipidemic Effect of Mulberry-Derived 1-Deoxynojirimycin[J]. Msystems, 2020, 5(5).（IF6.633）

[4]. He H, Wu S, Mei M, et al. A combinational strategy for effective heterologous production of functional human lysozyme in Pichia pastoris[J]. Frontiers in Bioengineering and Biotechnology, 2020, 8. (IF3.644)

[5]. He H, Zhai C, Mei M, et al. Functional expression of porcine interferon-α using a combinational strategy in Pichia pastoris GS115[J]. Enzyme and microbial technology, 2019, 122: 55-63. (IF3.448)

[6]. Liu Z, Lv X, Song E, et al. Fostered Nrf2 expression antagonizes iron overload and glutathione depletion to promote resistance of neuron-like cells to ferroptosis[J]. Toxicology and Applied Pharmacology, 2020, 407: 115241. （IF3.347）

[7]. Liu Y, Shen Q, Zhao X, et al. Cell-free mitochondrial DNA in human follicular fluid: a promising bio-marker of blastocyst developmental potential in women undergoing assisted reproductive technology[J]. Reproductive Biology and Endocrinology, 2019, 17(1): 54.(IF3.235)

[8]. He L, Li J, Peng P, et al. Genomic analysis of a Chinese MDV strain derived from vaccine strain CVI988 through recombination[J]. Infection, Genetics and Evolution, 2020, 78: 104045.(IF2.611)

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名称	货号	规格
Hieff Canace® Gold High-Fidelity DNA Polymerase 高保真DNA聚合酶	10148ES	10 U/100 U/500 U/1000 U
2 × Hieff Canace® Gold PCR Master Mix 高保真酶预混液	10149ES	100 μL/1 mL/5×1 mL

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