PCR扩增产物常发生碱基突变,导致后续实验应用无法进行?
手边的高保真酶,花了一上午时间PCR扩增,竟然扩出来抹带!更绝望的是,甚至有的基因啥都没P出来!
常常经过无数次的条件优化,最终还是得不到满意的产物。
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Hieff Canace® Gold高保真DNA聚合酶基于Pyrococcus Furiosis DNA Polymerase,经基因工程改造而成。其3’→5’外切酶结构域经改造后,大幅度提升了酶的保真性。此外,酶溶液中添加了独特的反应增强因子、热启动因子和延伸因子,极大提高了扩增的成功率,特异性和延伸速度。对于高保真PCR应用而言,具有高保真性、高成功率、高特异性的Hieff Canace® Gold高保真DNA聚合酶是理想选择。
保真性高:Taq酶的52倍,Pfu酶的6倍。
特异性好:目的条带单一。
延伸速度快:可达15 sec/kb,极限速度1 sec/kb。
灵敏度高:可扩增低至1 pg模板。
适用性广:适合不同长度,不同GC含量模板的扩增。
高保真 PCR;基因克隆;定点突变;高通量 PCR。
» 保真性高:Taq酶的52倍
图1. Hieff Canace® Gold 高保真DNA聚合酶的保真性是Taq酶的52倍,pfu酶的6倍。(Lac I法测定)
» 高特异性:目的条带单一
图2. 5种品牌的高保真DNA聚合酶扩增2 kb,4 kb的小鼠gDNA。Hieff Canace® Gold高保真DNA聚合酶与同类产品对比,显示出更高的特异性和产量。
Y:Hieff Canace® Gold高保真DNA聚合酶;A-E:其他品牌的高保真DNA聚合酶;M:1kb DNA Marker。
» 延伸速度快:可达15 sec/kb,极限速度达1 sec/kb
图3. Hieff Canace® Gold高保真DNA聚合酶分别扩增小鼠gDNA 2 kb和水稻gDNA 3 kb片段。不同延伸速度(1-60 sec/kb)都可有效扩增。M:1kb DNA Marker。
» 灵敏度高:可扩增低至1 pg模板
图4. Hieff Canace® Gold高保真DNA聚合酶扩增质粒3 kb片段,不同模板量(1 pg-0.5 μg)都可有效扩增。NC:阴性对照。M:1kb DNA Marker。
» 适用于不同GC含量片段的扩增
图5. Hieff Canace® Gold高保真DNA聚合酶对不同GC含量(30-70%)片段都可高效率的进行扩增。M:1kb DNA Marker。
» 适用于不同长度片段的扩增
图6. Hieff Canace® Gold高保真DNA聚合酶对不同模板、不同长度(1-12 kb)片段都可高效率的进行扩增。
M:1kb DNA Marker。模板:1-3:拟南芥gDNA,4-6:水稻gDNA,7-9:小鼠gDNA,10:人cDNA,11-18:人gDNA,19-21:质粒DNA,22:λDNA。
» Toyobo KOD Plus neo无扩增的基因,Yeasen Canace gold可以!
图7. 用Toyobo KOD Plus neo和Yeasen Canace gold扩增拟南芥cDNA 2 kb片段,Toyobo KOD Plus neo扩增无条带,Yeasen Canace gold扩增单一目的条带。M:DL10,000 DNA Marker。
» Yeasen Canace gold产量更高!
图8. 用Yeasen Canace® Gold和Takara PrimeSTAR® Max高保真酶平行对比扩增质粒DNA。
翌圣Canace® Gold高保真酶的产量明显更高。Y:Yeasen Hieff Canace® Gold高保真酶;T:Takara PrimeSTAR® Max高保真酶。M:DL2,000 DNA Marker。
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名称 |
货号 |
规格 |
10148ES10 |
10 U |
|
10148ES60 |
100 U |
|
10148ES76 |
500 U |
|
10148ES80 |
1000 U |
|
10149ES01 |
100 μL |
|
10149ES03 |
1 mL |
|
10149ES08 |
5×1 mL |
名称 |
货号 |
规格 |
10135ES60 |
100 U |
|
10135ES76 |
500 U |
|
10136ES03 |
1 mL |
|
10136ES08 |
5×1 mL |
|
10911ES08 |
5 T |
|
10911ES20 |
20 T |
|
10912ES08 |
5 T |
|
10912ES10 |
10 T |
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10106ES03 |
1 mL |
|
10106ES08 |
5×1 mL |
|
10202ES76 |
500 μL |
|
10208ES60 |
100 g |
|
10909ES20 |
20 T |
|
10907ES20 |
20 T |
|
11802ES80 |
10×100 μL |
|
11802ES92 |
100×100 μL |
HB210730