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产品简介
2×Hieff® PCR Master Mix是即用型的常规PCR预混合溶液，含有Taq DNA Polymerase、dNTP混合物、MgCl2以及优化的缓冲体系。反应时只需加入引物和模板即可进行扩增，大大简化实验的操作步骤。本产品中含有优良的稳定剂，在4℃条件下以放置3个月。PCR产物具有3’-dA突出端，可轻松克隆至T载体。
储存条件
-25~-15℃保存，有效期2年。
使用说明
|
组分 |
体积 (μL) |
|
循环步骤 |
温度 (°C) |
时间 |
循环数 |
|
模板DNA |
适量 |
预变性 |
94 |
5 min |
1 |
|
|
Primer 1 (10 μM) |
2 |
变性 |
94 |
30 sec |
35 |
|
|
Primer 2 (10 μM） |
2 |
退火 |
50-60 |
30 sec |
||
|
2×Hieff® PCR Master Mix |
25 |
延伸 |
72 |
30 sec/kb |
||
|
ddH2O |
to 50 |
终延伸 |
72 |
10 min |
1 |
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表1 扩增体系（50 μL） |
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表2 扩增条件 |
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【注】：使用前请务必将其彻底混匀。
1）模板使用量：基因组DNA：50-200 ng；质粒DNA：0.1-10 ng。
2）Mg2+浓度：本产品中含有3 mM的MgCl2，适合大部分PCR反应。
3）退火温度：请参考引物的理论Tm值，退火温度可设置低于引物理论值2-5℃。
4）延伸时间：分子鉴定建议30 sec/kb。基因克隆建议60 sec/kb，以保证产物量达到最高。
注意事项
1.本产品PCR产物不适用于聚丙烯酰胺凝胶电泳。
2.为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
3.本产品仅作科研用途！
应用实例
图1：2×Hieff® PCR Master Mix扩增1.2 kb片段。产品分别在-20℃放置1年，4℃放置3个月，25℃放置1个月后均可有效扩增目的片段。模板：拟南芥基因组；退火温度：60℃；延伸时间：40 sec。
Ver.CN20230901
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