产品简介

 

Hieff^® DNA Library Prep Kit for ONT是针对三代Nanopore测序平台开发的DNA建库试剂盒，该试剂盒对酶和缓冲buffer进行了定向的改造和优化，极大的提升了长片段的接头连接效率，同时末端修复加A尾后无需纯化，可直接进行Barcode连接，实验流程更便捷。

 

产品应用

 

DNA建库；三代建库；TGS建库；Nanopore测序；ONT测序；

 

产品优势

 

• 操作简便：末端修复、加A尾一步完成，产物无需纯化，可直接进行Barcode接头连接
• 兼容广泛：可兼容动物、植物、微生物等多种样本；兼容gDNA和扩增子样本
• 数据表现优异：文库产出高、测序数据质量好

 

组分信息

 

组分编号		组分名称	13301ES08	13301ES24	13301ES96
			8 T	24 T	96 T
13301-A		Endprep Buffer	56 μL	168 μL	672 μL
13301-B		Endprep Enzyme	24 μL	72 μL	288 μL
13301-C		Rapid Ligase Master Mix	280 μL	840 μL	4×840 μL
13301-D		Rapid Ligation Reaction Buffer（5×）	160 μL	480 μL	2×960 μL
13301-E		Rapid T4 DNA Ligase	40 μL	120 μL	480 μL
13301-F		Elution Buffer	160 μL	480 μL	2×960 μL

 

储存条件

 

-25~-15℃保存，有效期1年。

 

注意事项

 

1. Native Barcode的连接后的纯化和Native Adapter的纯化操作步骤使用的漂洗试剂是不一样的，请务必注意两个纯化步骤使用的试剂。

2. 为保证文库构建成功，建议对Input DNA的片段长度和完整性进行验证(验证方法可选用毛细管电泳或其他等效方法)。DNA质量（完整度、碎片化）、纯度（如化学污染、RNA残留等）、使用量过多或过少均可能影响文库的产出。

3. 请务必按照自备材料做好实验前准备，避免无法正常按操作说明书进行实验，造成样本和试剂的浪费。

4. 实验进行多个样本文库的制备，请记录每个样本对应使用的Native Barcode的编号。

 

操作流程

 

图1.  Hieff^® DNA Library Prep Kit for ONT建库流程

 

 

实验案例

13301ES 多样本建库兼容性

模板	Input DNA	文库回收率	下机数据量	Reads mean length	Reads max length	Reads N50 length
Human gDNA（4-20 K）	1μg	96%	15 G	9136.1715	113518	12633
1.7 K	500 ng	65%	0.33G	1791	23493	1771
3 K	500 ng	75%	0.31G	2557	26165	3005
1-16 K	1 μg	34.5%	2.89G	4189	41457	5893
质粒1	300 ng	＞60%	0.96 G	2413	23637	2658
质粒2	300 ng	＞60%	0.83 G	2129	35855	2808

 

 

Ver. CN20250312