产品简介

 

生物制品生产中经常会涉及到细胞培养或组织培养，在这些培养中胎牛血清被广泛应用，为细胞生长提供必须的营养成分，而胎牛血清中就包含了一定量的BSA（Bovine serum albumin，牛血清白蛋白）。考虑到生产的药物的安全性，目前疫苗、抗体药物、组织工程产品以及细胞&GCT等生物制品的生产过程中，逐渐使用无血清培养基来替代含血清培养基，从而减少可能由血清带来的病毒污染等潜在危害。其中，无血清培养基多采用各种可以替代血清功能的生物大分子配制而成，例如牛血清白蛋白（BSA）、转铁蛋白和胰岛素。由此，无论使用含血清培养基还是无血清培养基，都会有BSA。虽然在生产中经过纯化等步骤去除了大部分的杂质蛋白，但仍然会有微量的外源蛋白（如BSA等）存在于最终的生物制品中。

BSA作为外源蛋白进入人体后可能引起严重过敏反应，从而影响生物制品的安全性。2020版《中国药典》（三部）对各种疫苗中BSA的残留量进行了明确规定，基本是不高于50 ng/mL或者不高于50 ng/剂。

ELISA法是一种使用简单、灵敏度高且客观的BSA的残留量检测方法。本试剂盒应用双抗夹心酶联免疫检测（ELISA）的实验原理进行BSA残留量的检测，将BSA标准品（36722-B）和待测样本加入预包被抗BSA抗体的酶标板（36722-A），然后加入稀释后的HRP标记的BSA检测抗体（36722-C），形成抗体+抗原+抗体-HRP复合物，洗板后加入TMB显色混合液（36722-E + 36722-F）显色。TMB在HRP酶的催化下由无色转化成蓝色并在终止液（36722-G）的作用下最终转化成黄色。黄色的深浅与样本中被检测到的BSA的含量呈正相关。本试剂盒可以用于生物制品纯化工艺过程的优化、中间工艺过程的杂质控制以及终产品的放行检测。

 

产品信息

 

货号	36722ES96
规格	96 T
检测范围	1.5625~50 ng/mL
检测方法	双抗夹心法
检测时长	＜3小时
灵敏度	定量限1.5625 ng/mL，检测限≤1.0 ng/mL
回收率	75 - 125%
板内差	<10%
板间差	<10%

 

实验数据

 

1. 标曲数据

典型的参考标准曲线如下（以下标准曲线图仅供参考，应以同次实验标准品所绘标准曲线计算样本含量）：

       图1：BSA ELISA标准曲线图

 

 

标曲（ng/mL）	OD		平均OD
50	2.627	2.711	2.669
25	1.918	2.032	1.975
12.5	1.157	1.148	1.153
6.25	0.675	0.717	0.696
3.125	0.376	0.341	0.359
1.5625	0.208	0.199	0.203
0	0.106	0.117	0.111

表1 典型标准曲线数据