产品简介  

Anti-rabbit Tn5主要是将纳米抗体与Tn5转座酶进行融合，可用于Multi-CUT&Tag实验。本产品适合使用兔源一抗进行CUT&Tag实验。该产品为裸酶，需要自己组装接头序列。

 

产品信息

货号	12594ES04 / 12594ES12 / 12594ES48
规格	4 T / 12 T /48 T

 

组分信息

组分名称	12594ES04	12594ES12	12594ES48
Anti-rabbit Tn5	4 μL	12 μL	48 μL

 

储存条件

-25~-15℃保存，有效期1年。

 

使用说明

以高通量测序建库为例，在使用前，请务必仔细阅读使用说明。

1. 接头制备（序列需自备）

1）Illumina平台参考引物名称及序列：

Primer A-1：5'-AATGATACGGCGACCACCGAGATCTACACATATCCTTCGTCGGCAGCGTCAGATGTGTATAAGAGACAG-3' 

Primer A-2：5′-TCGTCGGCAGCGTCAGATGTGTATAAGAGACAG-3′

Primer B：5′-GTCTCGTGGGCTCGGAGATGTGTATAAGAGACAG-3′
Primer C：5'-phos-CTGTCTCTTATACACATCT-3'

2）将Primer A、Primer B、Primer C溶解至200 μM。

3） 分别配制如下反应体系：

组分	反应1
Primer B（200 μM）	10 μL
Primer C（200 μM）	10 μL
total	20 μL

 

组分	反应2
Primer A-1 or A-2（200 μM）	10 μL
Primer C（200 μM）	10 μL
total	20 μL

4）分别将反应1和反应2涡旋振荡充分混匀，并短暂离心使溶液回到管底。置于PCR仪内，进行如下反应程序：热盖105℃ On，94℃加热2 min。时间到后，停止反应程序，不要打开热盖，让PCR管在PCR仪器中自然冷却2 h，然后再于4℃中放置5 min。

5）反应结束后，将反应1和反应2等体积混合，混匀。命名为Adapter Mix，-25~-15℃保存。

2．转座子生成

1） 配置以下反应体系：

组分	体积（μL）
Anti-rabbit Tn5	5
Adapter mix (50 μM)	0.8
Assemble Buffer	4.2

2）反应条件：使用移液器轻轻吹打充分混匀。置于25℃反应1 h（热盖关闭）。反应产物可直接应用于建库实验，或-25~-15℃保存。

 

注意事项

1. 转座酶对温度敏感，建议尽快完成接头包埋，生成的转座子可于-25~-15℃保存，有效期1年。

2. 本产品仅作科研用途。

3. 为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

Ver.CN20240614