Hieff NGS® Multi-CUT&Tag Library Prep Kit for Illumina® Multi-CUT&Tag建库试剂盒(Nanobody-Tn5款)

更多活动更多优惠,尽在翌圣商城》

批量采购, 请点击询价

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

Hieff NGS® Multi-CUT&Tag Library Prep Kit for Illumina® V2

 

多靶标CUT&Tag试剂盒(Nanobody-Tn5款)


一份样本,一次实验,多个靶标。节省时间和样本。信噪比高。

 

产品应用


蛋白质-DNA互作研究

 

产品优势

 

精简操作:无需二抗,只加一抗,减少实验影响因子。

一个细胞多个靶标:一次实验完成两个组蛋白修饰研究(组蛋白修饰任意组合)。

CUT&Tag多靶标之间互相校正、互相检验,结果更真实。

Spike in添加,进一步增加校正能力。

 

产品描述

 

Hieff NGS® Multi-CUT&Tag Library Prep Kit for Illumina® V2是针对Illumina®高通量测序平台研发的用于Multi-CUT&Tag实验的文库构建试剂盒,适用于100-100,000个细胞起始量的样本建库。Multi-CUT&Tag是研究蛋白与DNA互作的技术,相较于传统的CUT&Tag,该技术使用nanobody-Tn5(Anti-mouse Tn5和Anti-rabbit Tn5,可实现一份细胞,两种靶标的研究,同时,该技术实验中无需再添加二抗。经过细胞捕获、一抗孵育、转座酶孵育、转座酶激活、掺入DNA标准品、细胞裂解、磁珠回收gDNA、文库扩增和磁珠分选等步骤,靶蛋白结合的DNA片段最终转化为适用于Illumina®平台测序的文库。

本试剂盒包含两个独立模块:BOX-I和BOX-II。BOX-I包含结合细胞的ConA Beads、提取DNA 的DNA Extract Beads以及文库纯化的DNA Selection Beads,BOX-II包含细胞透化剂、抗体结合buffer、转座酶结合buffer、蛋白酶K以及后续文库扩增所需的所有试剂。此外,本试剂盒已在不同种类细胞(如293T、K562、CHO、ESC细胞等)中进行了验证,均具有良好的建库效率和建库产量。本试剂盒提供的所有试剂都经过严格的质量控制和功能验证,最大程度上保证了文库的稳定性和重复性。

 

 

实验数据

 

图:同一细胞中不同的组蛋白修饰图谱

同一细胞中,可实现不同染色质图谱研究,并且能很好的区分组蛋白异质性修饰和激活修饰,同时还能清楚的显示异质性修饰和激活修饰的共关联。

 

组分信息

 

组分编号

组分名称

12592ES04

12592ES12

12592ES48

BOX-I

12592-A

ConA Beads

40 μL

120 μL

480 μL

12592-B

DNA Extract Beads

280 μL

840 μL

3.36 mL

12592-C

DNA Selection Beads

400 μL

1.2 mL

4.8 mL

BOX-II

12592-D

10 × Binding Buffer

120 μL

360 μL

1.44 mL

12592-E

10 × Wash Buffer

360 μL

1.08 mL

4.32 mL

12592-F

5% Digitonin

12 μL

36 μL

144 μL

12592-G

 ⇔

50 × PB Buffer

6 μL

18 μL

72 μL

12592-H

10 × Dig-300 Buffer

400 μL

1.2 mL

4.8 mL

12592-I

Anti-mouse Tn5

8 μL

24 μL

96 μL

12592-J

Anti-rabbit Tn5

8 μL

24 μL

96 μL

12592-K

33 × Activating Buffer

6 μL

18 μL

72 μL

12592-L

15 × Terminate Solution

20 μL

60 μL

240 μL

12592-M

 ⇔

30 × Proteinase K

10 μL

30 μL

120 μL

12592-N

 ⇔

DNA Spike-in Mix (5 ng/μL)

4 μL

12 μL

48 μL

12592-O

  ⇔

2×HiFi Amplification Mix

100 μL

300 μL

1.2 mL

12592-P

  ⇔

i5 Universal Primer

8 μL

/

/

12592-Q

  ⇔

i7 Index Primer (T701)

8 μL

/

/

【注】:*12592ES12/48试剂盒不含Index Primer,需搭配Cat#12417进行完整建库;

*12592ES04中,index信息为i5 index GCCTTATG(对应mouse来源抗体数据)、AGGATATG(对应rabbit来源抗体数据)、i7 index TAAGGCGA不同测序平台,i5端对应的序列可能需要反向,具体见参考第六部分:文库结构

***本试剂盒在实验前需自备蛋白酶抑制剂Cocktail(Yeasen Cat#20123ES)或其他等效产品

储存条件

 

BOX-I:2~8℃保存,BOX-II:-25~-15℃保存,有效期1年。

 

 

400-6111-883