在使用细胞因子进行科学研究时，​内毒素是一个必须严格控制的干扰因素，其存在会严重影响实验结果的可靠性和可重复性。

一、内毒素是细胞因子选型的关键考量

内毒素，主要是革兰氏阴性菌细胞壁成分脂多糖（LPS）​，是极强的免疫激活剂。

1. ​对实验结果的灾难性干扰​：

• 非特异性激活​：极低浓度（如< 0.1 EU/mL）的LPS就能强烈激活免疫细胞（如巨噬细胞、树突状细胞），导致其分泌TNF-α、IL-1β、IL-6等多种细胞因子，​完全掩盖您所添加的重组细胞因子的特定效应。
• 改变细胞状态​：使细胞处于一种“预警”或“活化”的基线状态，影响其增殖、分化、迁移和信号转导，导致结果出现假阳性或假阴性。
• 体内实验风险​：在动物实验中，含内毒素的制剂会引起发热、休克甚至死亡，严重影响动物福利并导致实验失败。

2. ​对机制研究的误导​：

• 如果您研究的是某个特定细胞因子（如IL-4）对巨噬细胞极化的影响，而制品中混有LPS，那么观察到的“M2极化”可能是LPS间接作用的结果，而非IL-4的直接作用，导致结论错误。

 

二、如何科学选型？——建立您的“内毒素标准”

选型时，不能只看“有”或“无”，而要建立定量化、与实验模型相匹配的标准。

第一步：确定您的实验系统对内毒素的敏感度

1. ​高敏感系统​：

• 原代免疫细胞​：特别是巨噬细胞、树突状细胞、B细胞。
• 某些细胞系​：如RAW 264.7、THP-1（尤其在PMA分化后）。
• 体内注射​：任何用于动物体内实验的细胞因子。
• 干细胞/神经细胞实验​：一些系统对LPS也非常敏感。
• 要求​：通常需要​​< 0.1 EU/µg或< 0.01 EU/µg​的极高标准，且最终工作浓度下的内毒素含量应< 0.1 EU/mL​培养液。

2. ​中低敏感系统​：

• 某些永生化细胞系、非免疫相关细胞（如成纤维细胞、某些肿瘤细胞系）在进行非免疫相关功能实验时。
• 要求​：可接受​​< 1.0 EU/µg​的标准。但仍需尽可能低。

 

第二步：阅读产品说明书，关注关键指标

内毒素检测结果​：官网和说明书会提供定量数据。

注释：< 0.01 EU per μg是指每微克蛋白内毒素的含量小于0.01 EU，此数值越小越好；LAL method是指使用的是鲎试剂法检测。

另外需关注载体蛋白和稳定剂​：一些细胞因子通常以含载体蛋白（如BSA）的形式提供。要确认载体蛋白本身也是低内毒素级别的。

内毒素本身性质稳定，但若细胞因子储存不当（如反复冻融、温度波动），可能导致蛋白降解，间接影响内毒素检测结果的稳定性，需关注产品的储存条件说明。

 

第三步：根据实验目的和预算选择“等级”

1. 科研级​：大部分商用重组细胞因子属于此级，内毒素水平通常标注为< 1.0 EU/µg。适用于对非高敏感系统。

2. ​超高纯度/无动物源级​：采用无动物源成分生产，内毒素水平极低（< 0.1 EU/µg或更低）。适用于原代免疫细胞、体内实验和临床前研究。价格昂贵。

3. ​GMP级/临床级​：用于细胞治疗或临床研究，标准最高，价格极其昂贵，一般科研不需要。

​ 

选型总结​：

• 确认您的细胞/模型是否为高敏感系统。​​
• 在产品说明书中找到“Endotoxin”或“LPS”的定量数据。​​
• 根据您的实验类型，设定可接受的内毒素上限（如：用于原代巨噬细胞实验，要求< 0.1 EU/µg）。​​
• 优先选择标注了具体、低数值内毒素水平的产品。​​

  

三、如何验证和处理——选型后的质量控制

即使选了低内毒素产品，关键实验前仍需验证。

​设置关键对照​：

l ​抑制剂对照​：在使用细胞因子的同时，加入LPS信号通路抑制剂（如TLR4抑制剂TAK-242，或多粘菌素B）。如果抑制剂能消除或减弱您观察到的效应，说明可能有LPS污染。

l ​热失活对照​：某些细胞因子（如TNF-α、IL-1β）对热敏感，而LPS非常稳定。可以将细胞因子制剂在高温（如70°C）处理一段时间，灭活细胞因子但不影响LPS，然后与未处理的样品比较活性。如果热处理后仍有生物活性，提示存在LPS污染。

 

四、特殊情况的考虑

• 从大肠杆菌中表达的细胞因子​：大肠杆菌是革兰氏阴性菌，其表达产物更容易被内毒素污染。虽然纯化工艺可以去除，但选择时要格外关注其内毒素数据，并考虑用哺乳动物系统（如HEK293）表达的蛋白作为更高纯度的选择。
• 体内实验​：这是红线。​必须使用超高纯度、专门标注适用于体内研究的细胞因子。

  

在细胞因子科学选型中，​内毒素不是一个“是或否”的属性，而是一个“有多少”的定量指标。关注内毒素水平，并将其作为细胞因子选型、使用和结果解读中的核心考量之一，是保证免疫学及相关领域研究准确性和可靠性的基石。

  

翌圣生物开发了一系列专为细胞培养而设计的HiActi®细胞因子，经过严格的质量控制及细胞功能的验证，确保产品具有高活性、高纯度、高稳定性、低内毒素水平。产品种类丰富，适用于干细胞、神经细胞、类器官、免疫细胞以及多种细胞系的培养及功能研究。

在细胞培养和治疗中，针对不同类型的细胞选择合适的细胞因子至关重要。以下是针对常见细胞类型的细胞因子选择指南，涵盖干细胞、免疫细胞、类器官和其他功能细胞等。

 

产品应用	产品货号	产品名称	产品货号	产品名称	产品货号	产品名称
T/NK细胞培养	90267ES	Human IL-2	90147ES	Mouse IL-7	90215ES	Human IL-21
	90142ES	Mouse IL-2	90113ES	Human IL-15	90233ES	Mouse IL-21
	90188ES	Human IL-7	90218ES	Mouse IL-15	90262ES	Human IL-12
细胞因子诱导的杀伤细胞培养（CIK细胞）	90267ES	Human IL-2	91207ES	Human IFN-γ	90100ES	Human IL-1α
	90142ES	Mouse IL-2	91212ES	Mouse IFN-γ	90139ES	Mouse IL-1α
树突状细胞（DC细胞）培养	92259ES	Human FLT3L	90606ES	Human sCD40L	90140ES	Mouse IL-1 beta
	91117ES	Human G-CSF	95589ES	Mouse sCD40L	90105ES	Human IL-4
	91102ES	Human GM-CSF	90601ES	Human TNF-alpha	90144ES	Mouse IL-4
	91115ES	Mouse GM-CSF	90621ES	Mouse TNF-α	90107ES	Human IL-6
	91103ES	Human M-CSF	90100ES	Human IL-1 alpha	90146ES	Mouse IL-6
	92116ES	Mouse M-CSF	90277ES	Human IL-1 beta
干细胞培养常用蛋白	92602ES	Human Laminin 521	92054ES	Human BMP-7	92804ES	Human EPO
	92634ES	Human Laminin-511 E8	91303ES	Human FGF-4	92211ES	Human IGF-1
	92619ES	Human Fibronectin	91304ES	Human KGF/FGF-7	92254ES	Human OSM
	92549ES	Human Vitronectin	91306ES	Human FGF-10	90282ES	Human IL-11
	91701ES	Human/Mouse/Rat TGF-β1	92251ES	Human SCF	90601ES	Human TNF-alpha
	91709ES	Human/Mouse/Rat TGF-β2	92260ES	Mouse SCF	91708ES	Human/Mouse/Rat Activin A
	91705ES	Human TGF-β3	90604ES	Human BAFF	95132ES	Human FGF8b
	91330ES	Human bFGF/FGF-2	92279ES	Human FLT3L	92102ES	Human GDNF
	91315ES	Mouse bFGF/FGF-2	91517ES	Human VEGF165	92128ES	Human NT-3
	92708ES	Human EGF	92261ES	Human TPO	92123ES	Human CNTF
	92702ES	Human HB-EGF	91605ES	Human PDGF-BB	90609ES	Human 4-1BBL
	92703ES	Mouse EGF	92275ES	Human DKK1	92566ES	Human SHH
	91102ES	Human GM-CSF	95124ES	Human DLL4	92288ES	Human Holo-Transferrin
	91103ES	Human M-CSF	91117ES	Human G-CSF/CSF3	92289ES	Human Apo-Transferrin
	91708ES	Human/Mouse/Rat Activin A	92711ES	Human NRG1-beta1	92210ES	Human LR3 IGF-1
	90101ES	Human IL-1 beta	92111ES	Human LIF	92211ES	Human IGF-1
	90104ES	Human IL-3	92256ES	Mouse LIF	92802ES	Human PTH
	90107ES	Human IL-6	92055ES	Human HGF	93874ES	Human DLL-4
	90189ES	Human IL-8	90108ES	Human IL-9	94207ES	Human DLL-1
	92060ES	Human BMP-2	92129ES	Human/Mouse/Rat BDNF
	92053ES	Human BMP-4	92122ES	Human beta-NGF
巨噬细胞培养常用蛋白	91207ES	Human IFN-γ	90109ES	Human IL-10	91102ES	Human GM-CSF
	91212ES	Mouse IFN-γ	90149ES	Mouse IL-10	91115ES	Mouse GM-CSF
	90105ES	Human IL-4	90112ES	Human IL-13	91103ES	Human M-CSF
	90144ES	Mouse IL-4	90151ES	Mouse IL-13	91114ES	Mouse M-CSF
类器官培养常用蛋白	92294ES	Human Wnt-3a	91306ES	Human FGF-10	92711ES	Human NRG1-beta1
	92278ES	Human RSPO1	91319ES	Mouse FGF-10	92566ES	Human SHH
	92295ES	Mouse RSPO1	91304ES	Human FGF-7	91517ES	Human VEGF165
	92623ES	Human Noggin	91316ES	Mouse FGF-7	91303ES	Human FGF-4
	92291ES	Mouse Noggin	92055ES	Human HGF	92128ES	Human NT-3
	92708ES	Human EGF	92053ES	Human BMP-4	92283ES	Human RSPO3
	92703ES	Mouse EGF	92054ES	Human BMP-7	92129ES	Human/Mouse/Rat BDNF
	91330ES	Human bFGF	92254ES	Human OSM
	91315ES	Mouse bFGF	92516ES	Human Epiregulin
破骨细胞培养蛋白	95625ES	Mouse RANKL	91114ES	Mouse M-CSF	90633ES	Human RANKL
	91103ES	Human M-CSF

  

细胞因子选购指南

翌圣生物依托多年研发生产经验与技术积累，开发了一系列“三高一低”的HiActi®细胞因子，经过严格的质量控制及细胞功能的验证，确保产品具有高活性、高纯度、高稳定性、低内毒素水平，助您拿到理想的实验结果。

HiActi®细胞因子选购指南

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