第一支为小胶质细胞，胚胎期即由卵黄囊定植，终身自我更新，是脑实质最丰富的固有免疫细胞；其通过突触修剪、细胞碎片清除及代谢感知，调控神经元可塑性与血脑屏障完整性。第二支为脑边界相关巨噬细胞（BAMs），包括脑膜、血管周围及脉络丛巨噬细胞，出生后由骨髓单核细胞持续补充，分布于血-脑界面，负责监测病原体、维持脑脊液免疫监视并调节血管通透性。在阿尔茨海默病、脑缺血或肿瘤等病理状态下，外周单核细胞进一步浸润，转化为疾病相关巨噬细胞（DAM 或 TAM），与小胶质细胞协同或拮抗，放大神经炎症、促进斑块清除或支持肿瘤微环境。因此，大脑-巨噬细胞轴既是神经保护的“守门人”，也是神经退行性病变及肿瘤免疫治疗的关键靶点。

前面我们已经介绍了巨噬细胞清除剂（Clodronate Liposomes）在清除肝脏、肺部、肠道巨噬细胞的应用情况，今天我们来分享下使用巨噬细胞清除剂（Clodronate Liposomes）清除脑部巨噬细胞的相关文章及方法。

文章来源：CXCL12-mediated monocyte transmigration into brain perivascular space leads to neuroinflammation and memory deficit in neuropathic pain (IF=13.3,Q1)

巨噬细胞清除方法：于假手术或 SNI 手术前一天及术后第三天，经尾静脉注射氯膦酸盐脂质体（剂量 15 mL/kg），以耗竭循环中的单核细胞²⁴。对照小鼠在相同时间点注射 PBS。通过外周血流式细胞术及海马免疫荧光染色，评估氯膦酸盐在正常小鼠中耗竭单核细胞/巨噬细胞的效率。

结果分享：首次注射 CLL 后 18 小时，通过外周血流式细胞术（FC）及脑组织免疫荧光（IF）验证其对单核细胞的清除效果。术后第 9 天，采用新物体识别实验（NORT）评估短期记忆（STM）指数，并进行免疫荧光检测。与既往研究一致，氯膦酸盐注射在 naïve 小鼠注射后第1天即可清除绝大多数经典单核细胞（CMo，CD11b⁺Ly6C^high）和非经典单核细胞（NCMo，CD11b⁺Ly6C⁻），但不影响包括NK细胞和中性粒细胞在内的淋巴细胞。

文章来源：B cell treatment promotes a neuroprotective microenvironment after traumatic brain injury through reciprocal immunomodulation with infiltrating peripheral myeloid cells (IF=10.1,Q1)

巨噬细胞清除方法：选用8至12周龄雄性C57Bl6/J小鼠。受体小鼠静脉注射10 μL/g体重的氯膦酸盐脂质体。对照动物接受相同剂量的PBS脂质体空白对照。通过流式细胞术分析在多个组织中验证单核细胞/巨噬细胞耗竭。

结果分享：

使用氯膦酸盐脂质体的静脉内给药来特异性消耗高度吞噬的 CD45^hiCD11b^hi单核细胞/巨噬细胞，并证实全身耗竭转化为在CCI后48小时浸润大脑的单核细胞/巨噬细胞数量丰度明显减少约90%（图7B，C）。

文章来源：Immunoregulatory and neutrophil-like monocyte subsets with distinct single-cell transcriptomic signatures emerge following brain injury (IF=10.1,Q1)

巨噬细胞清除方法：小鼠经尾静脉注射200 μL氯膦酸盐脂质体（Cl-LPM）或 PBS对照脂质体（Control LPM），以及Dil标记脂质体（Dil-LPM），注射时间点为CCI或假手术前4天和1天。为定量Dil-LPM的摄取情况，制备血涂片，通过荧光与明场显微镜评估Dil标记的白细胞百分比。

结果分享：

在假手术或CCI损伤小鼠中，分别注射PBS-脂质体（PBS-LPMs）或氯膦酸盐-脂质体（Cl-LPMs）后，检测CD45⁺/CD11b⁺/Ly6G⁻/CD115⁻细胞群。结果显示：在未损伤的native小鼠（0 dpi）中，Cl-LPM注射使Ly6G⁻细胞百分比较对照PBS-LPM小鼠减少约40%；在这些Ly6G⁻细胞中，CD115⁺单核细胞比例较对照组（33.8 ± 4.3%）下降约85%，仅为5.5 ± 0.5%，且其绝对数量也相应减少（图2，B和C）。