巨噬细胞是免疫系统中的重要组成部分,负责识别、吞噬和清除外来病原体及细胞碎片。它们在调节免疫反应、组织修复和稳态维持中发挥关键作用。研究巨噬细胞的功能,对于理解各种疾病的发病机制、开发新的治疗策略及改善临床疗效具有重要意义。巨噬细胞不仅参与感染的防御,还在自体免疫、肿瘤发生和心血管疾病等病理过程中扮演着复杂且多样的角色。通过揭示巨噬细胞在不同生理和病理状态下的功能变化,研究能够为新型免疫疗法的设计提供依据,促进个性化医疗的发展。因此,推动巨噬细胞功能研究是现代医学研究中的一项重要任务,具有广泛的应用前景。
巨噬细胞常规研究可分为体内和体外两种。体内通过对比实验药物作用下免疫缺陷小鼠模型(去除小鼠巨噬细胞)及正常小鼠中肿瘤的生长情况,确定实验药物对肿瘤相关巨噬细胞的浸润及亚型分布的影响。体外可分为两种:1.巨噬细胞体外分化、分选,通过趋化实验检测癌细胞对巨噬细胞募集作用。2.对细胞外泌体进行提取并与巨噬细胞共同培养后,检测巨噬细胞相关蛋白的表达情况,探究外泌体对巨噬细胞分化及迁移的影响。
翌圣生物针对巨噬细胞研究提供完整试剂解决方案,从巨噬细胞提取、巨噬细胞构建、巨噬细胞清除模型小鼠构建、巨噬细胞各种作用机制研究、免疫学功能验证等各环节实验解决方案,助力药物研究和巨噬细胞功能研究,助您发表高质量的学术论文。
巨噬细胞清除小鼠模型构建
巨噬细胞的清除,是全面了解巨噬细胞在病理条件下功能的一种十分有力的研究方法,氯膦酸盐脂质体(Clodronate Liposomes)是目前最为成熟,方便,经济的一种巨噬细胞清除工具,可以有效的清除动物体内不同组织部位和血液中的巨噬细胞。
氯膦酸二钠(Clodronate)是一种双膦酸盐药物,在临床上主要用于癌症引起的溶骨性骨转移、骨质疏松症和高钙血症。其作用机理是氯膦酸二钠在细胞内代谢成不可水解的ATP类似物,抑制线粒体中的ADP/ATP转运机制,从而阻断线粒体呼吸链诱导细胞凋亡。但是该药物亲脂性低,不能跨细胞转运,在口服或是静脉给予游离药物后,2小时后即可达半衰期,48小时内80%药物随尿液排出。
脂质体是单层或多层脂质双分子层的球形囊泡,其主要成分是磷脂和胆固醇。脂质体本身具有双分子层结构,组成成分无毒性,因此可以作为运输分子物质的载体,它通过与细胞膜结合的方式将分子物质运输到细胞内。
氯膦酸盐包裹进磷脂体的水相中形成氯膦酸盐脂质体,氯膦酸盐不能自由的通过脂质体磷脂体双分子层。注射到生物体内后,氯膦酸盐脂质体会被巨噬细胞吞噬,在巨噬细胞内的溶酶体磷酸酶的作用下,溶解在脂质体内的氯膦酸盐会被逐步释放出来并在细胞内积累,当达到一定浓度时,巨噬细胞将会受到不可逆损伤,诱发细胞凋亡。死亡细胞内的氯膦酸盐会被释放到细胞外,随尿液排出体外。
货号 |
名称 |
规格 |
专题详解 |
Clodronate Liposomes (From Vrije Universiteit Amsterdam) 体内巨噬细胞清除剂 |
5 mL/10 mL |
巨噬细胞清除剂--氯膦酸盐脂质体(Clodronate Liposomes)
巨噬细胞清除小课堂: |
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Control Liposomes( PBS ) 体内巨噬细胞清除剂空白脂质体对照 |
5 mL/10 mL |
同时为了鉴定巨噬细胞清除小鼠造模成功,需要对小鼠组织样本进行流式或WB检测,目前我司提供鼠抗CD45、F4/80、CD11b、CD163、CD206等单克隆抗体及完整WB试剂解决方案,具体可进入官网选购:翌圣生物-抗体选购。专题指导:CD分子流式抗体选购指南
货号 |
名称 |
规格 |
货号 |
名称 |
规格 |
32201ES |
Purified anti-human/mouse CD11b |
100 μg/1 mg |
32232ES |
FITC anti-human CD45 |
25 T/100 T |
32202ES |
FITC anti-human/mouse CD11b |
25 T/100 T |
32233ES |
PE-Cy5 anti-human CD45 |
25 T/100 T |
32203ES |
APC anti-human/mouse CD11b |
25 T/100 T |
32234ES |
Alexa Fluor 647 anti-human CD45 |
25 T/100 T |
32204ES |
PE-Cy7 anti-human/mouse CD11b |
25 T/100 T |
32235ES |
PE-Cy7 anti-human CD45 |
25 T/100 T |
32205ES |
APC-Cy7 anti-human/mouse CD11b |
25 T/100 T |
32236ES |
APC-Cy7 anti-human CD45 |
25 T/100 T |
32206ES |
PE anti-human/mouse CD11b |
25 T/100 T |
32237ES |
PE anti-human CD45 |
25 T/100 T |
32207ES |
PerCP-Cy5.5 anti-human/mouse CD11b |
25 T/100 T |
32238ES |
PerCP anti-human CD45 |
25 T/100 T |
33208ES |
Pacific Blue anti-human/mouse CD11b |
25 T/100 T |
32239ES |
PerCP-Cy5.5 anti-human CD45 |
25 T/100 T |
32209ES |
PE-Cy5 anti-human/mouse CD11b |
25 T/100 T |
32240ES |
Pacific Blue anti-human CD45 |
25 T/100 T |
32210ES |
APC anti-human CD163 |
25 T/100 T |
32241ES |
Alexa Fluor 700 anti-human CD45 |
25 T/100 T |
32211ES |
PE anti-human CD163 |
25 T/100 T |
32242ES |
APC anti-human CD45 |
25 T/100 T |
32212ES |
PE anti-mouse CD163 |
25 T/100 T |
32243ES |
Purified anti-mouse CD45 |
100 μg/1 mg |
32220ES |
FITC anti-human CD206 |
25 T/100 T |
32244ES |
FITC anti-mouse CD45 |
25 T/100 T |
32221ES |
APC anti-human CD206 |
25 T/100 T |
32245ES |
APC anti-mouse CD45 |
25 T/100 T |
32222ES |
PE-Cy7 anti-human CD206 |
25 T/100 T |
32246ES |
PE-Cy5 anti-mouse CD45 |
25 T/100 T |
32223ES |
PE anti-human CD206 |
25 T/100 T |
32247ES |
Alexa Fluor 700 anti-mouse CD45 |
25 T/100 T |
32224ES |
PerCP-Cy5.5 anti-human CD206 |
25 T/100 T |
32248ES |
PE-Cy7 anti-mouse CD45 |
25 T/100 T |
32225ES |
FITC anti-mouse CD206 |
25 T/100 T |
32249ES |
PE anti-mouse CD45 |
25 T/100 T |
32226ES |
PerCP-Cy5.5 anti-mouse CD206 |
25 T/100 T |
32250ES |
PE-Cy5.5 anti-mouse CD45 |
25 T/100 T |
32227ES |
PE anti-mouse CD206 |
25 T/100 T |
32251ES |
Pacific Blue anti-mouse CD45 |
25 T/100 T |
32228ES |
APC anti-mouse CD206 |
25 T/100 T |
32252ES |
APC anti-mouse F4/80 |
25 T/100 T |
32230ES |
Purified anti-human CD45 |
100 μg/1 mg |
32253ES |
FITC anti-mouse F4/80 |
25 T/100 T |
32231ES |
Purified anti-human CD45 |
100 μg/1 mg |
32254ES |
PE anti-mouse F4/80 |
25 T/100 T |
巨噬细胞诱导
噬细胞的体外极化是指在实验室条件下,通过特定的刺激因子诱导巨噬细胞向不同功能状态的转变。这一过程通常分为两大类: M1型及M2型[1]。M1型巨噬细胞在干扰素-γ等刺激下产生,产生促炎症细胞因子,抵抗病原入侵但也造成机体损伤。而M2型巨噬细胞则在IL-4和IL-13等细胞因子的作用下极化,主要分泌抗炎症细胞因子,并在组织修复与重建和肿瘤的形成过程中发挥作用[2]。体外极化不仅为研究巨噬细胞的功能和机制提供了模型,同时也为探讨其在疾病中的作用和治疗策略奠定了基础。
细胞来源 |
培养基 |
初始加入 |
M1极化 |
M2极化 |
THP-1细胞 |
RPMI 1640 |
100 ng/mL PMA |
20 ng/mL IFN-γ 100 ng/mL LPS |
20 ng/mL IL-4 20 ng/mL IL-13 |
单核细胞 |
RPMI 1640 |
M1:50 ng/mL GM-CSF M2: 50 ng/mL M-CSF |
10 ng/mL LPS 50 ng/mL IFN-γ |
M2a: 20 ng/mL IL-4 M2b: IgG+LPS M2c: 20 ng/mL TGF-β1或10 ng/mL IL-10 |
骨髓 |
IMDM |
10-50 ng/mL M-CSF |
100 ng/mL LPS (可加50 ng/mL IFN-γ) |
10 ng/mL IL-4 (可加10 ng/mL IL-13) |
RAW264.7细胞 |
DMEM |
/ |
100 ng/mL LPS |
20 ng/mL IL-4(可加20 ng/mL IL-10) |
相关细胞因子产品选购
名称 |
种属/来源 |
货号 |
规格 |
专题详解 |
GM-CSF |
Human |
5μg/50μg/100μg/500μg |
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Mouse |
5μg/50μg/100μg/500μg |
|||
M-CSF |
Human |
10μg/100μg/500μg |
||
Mouse |
10μg/50μg/100μg/500μg |
|||
10μg/100μg/1mg |
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IFN-γ |
Human |
20μg/50μg/100μg/500μg |
||
Mouse |
5μg/50μg/100μg/500μg |
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IL-4 |
Human |
10μg/50μg/1mg |
||
Mouse |
10μg/50μg/100μg/500μg |
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IL-10 |
Human |
2μg/10μg/50μg/100μg |
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Mouse |
2μg/10μg/50μg/100μg |
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IL-13 |
Human |
2μg/10μg/50μg/100μg |
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Mouse |
10μg/50μg/100μg/500μg |
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TGF-β1 |
Human/Mouse |
2μg/10μg/100μg |
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LPS诱导剂 |
E.coli O55:B5 |
5mg/10mg |
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E.coli O111:B4 |
5mg/10mg |
巨噬细胞培养
细胞培养是一项重要的生物技术,涉及在控制的实验室环境中,以特定的营养培养基和适宜的温度、湿度及气体成分,培育和繁殖细胞。这一技术可以用于多种细胞类型,广泛应用于基础研究、药物开发、疫苗生产及疾病模型建立。在细胞培养过程中,研究人员需要监测细胞的生长状态、代谢活动及其基因和蛋白质的表达变化,以便进行相关的实验和分析。通过细胞培养,科学家能够深入了解细胞的生物学特性,为生物医学研究提供重要的实验基础。
实验步骤 |
货号 |
名称 |
规格 |
专题详解 |
组织消化 |
Collagenase I 胶原酶I型 |
100 mg |
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Collagenase II 胶原酶II型 |
100 mg |
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Collagenase III 胶原酶III型 |
100 mg |
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Collagenase IV胶原酶IV型 |
100 mg |
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Collagenase V胶原酶V型 |
100 mg |
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Cebrary®Tissue Digestion Solution 组织消化液 |
10 mL/30 mL/100 mL |
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细胞培养 |
Fetal Bovine Serum Gold 胎牛血清(特级) |
50 mL/500 mL |
||
Fetal Bovine Serum Gold Plus 胎牛血清(特级) |
500 mL |
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Fetal Bovine Serum Gold Pro 胎牛血清(特级) |
10mL/50 mL/100mL/500 mL |
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DMEM高糖培养基(含L-谷氨酰胺,丙酮酸钠110mg/L;不含HEPES,双抗) |
500 mL |
RAW264.7(小鼠单核巨噬细胞白血病细胞)贴壁细胞培养全攻略
细胞培养产品选购指南
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RPMI1640培养基(含L-谷氨酰胺;不含丙酮酸钠,HEPES,双抗) |
500 mL |
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黑胶虫清除剂(500×) |
400 μL |
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Mycoplasma Elimination Reagent 支原体去除试剂 |
100 μL/1 mL/5 mL |
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L-谷氨酰胺 |
100 g |
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细胞培养用青霉素-链霉素(双抗) |
100 mL |
外泌体研究
外泌体直径通常在30到150纳米之间,它们由多种细胞类型产生,并在细胞间传递生物信息,如蛋白质、脂质和RNA等。外泌体在细胞通讯、免疫反应和肿瘤转移等生物过程中发挥重要作用,因此它们被视为潜在的疾病标志物和治疗载体。近年来,随着技术的进步,外泌体的分离、鉴定和功能分析手段不断发展,使得研究者能够更深入地了解它们在各类疾病(如癌症、神经退行性疾病和心血管疾病)中的作用,为精准医学和新型治疗策略的开发提供了重要依据。已有研究表明巨噬细胞迁移受到细胞外环境的变化的影响,因此关于外泌体对巨噬细胞的影响是目前研究的一个重要方向。
实验步骤 |
货号 |
名称 |
规格 |
专题详解 |
Western blot |
RIPA裂解液(强) |
100 mL |
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蛋白酶抑制剂Cocktail, EDTA-free,100×DMSO储液 |
1 mL/10×1 mL/100×1 mL |
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BCA蛋白浓度测定试剂盒(增强型) |
500 T/2500 T/5000 T |
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三色预染蛋白质分子量标准(8-180 kDa) |
250 μL/2×250 μl/10×250 μl |
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PAGE凝胶快速制备试剂盒 |
125 mini gels |
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10×快速转膜液 |
500 mL |
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0.45 μm PVDF 膜(1 卷, 30 cm x 3 m) |
1 卷 |
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快速封闭液 |
100 mL/500 mL |
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ECL化学发光超敏显色试剂盒 |
100 mL/500 mL |
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PET 2 两块胶蛋白迷你垂直电泳槽 |
套 |
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细胞因子ELISA试剂盒 |
Human IFN-γ ELISA Kit |
48 T/96 T |
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Human IL-1β ELISA Kit |
48 T/96 T |
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Human IL-6 ELISA Kit |
48 T/96 T |
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Human TNF-α ELISA Kit |
48 T/96 T |
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Mouse IL-18 ELISA Kit |
48 T/96 T |
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Mouse IFN-γ ELISA Kit |
48 T/96 T |
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Mouse IL-1β ELISA Kit |
48 T/96 T |
|||
Mouse IL-6 ELISA Kit |
48 T/96 T |
|||
Mouse TNF-α ELISA Kit |
48 T/96 T |
|||
分选磁珠 |
人CD3分选磁珠 |
2 mL |
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人CD4分选磁珠 |
2 mL |
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人CD8分选磁珠 |
2 mL |
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37607ES |
小鼠CD4分选磁珠 |
2 mL |
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37611ES |
小鼠CD8分选磁珠 |
2 mL |
动物模型
不同学者会研究巨噬细胞在小鼠不同模型中相关机制,例如探究肥大细胞(MC)在炎症性肠病过程中的作用和调节机制[3];在小鼠Lewis肺癌模型(LLC1s)和小鼠乳腺癌转移模型(MMTV-PyMT)中研究巨噬细胞作用机制等[4]。翌圣生物针对溃疡性结肠炎、急性肝损伤、胰腺炎、糖尿病、帕金森、类风湿关节炎等模型提供相对应试剂方案。
模型名称 |
货号 |
产品名称 |
规格 |
专题详解 |
溃疡性结肠炎 |
Dextran Sulfate Sodium Salt(DSS) 结肠炎建模用葡聚糖硫酸钠盐 |
25 g/100 g/500 g/1 kg |
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急性肝损伤 |
Thioacetamide 硫代乙酰胺 |
25 g/100 g/500 g |
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溶血性贫血 |
APH乙酰苯肼(1-Acetyl-2-Phenylhydrazine) 1-乙酰基-2-苯肼 |
25 g/100 g/500 g |
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胰腺炎 |
Taurocholic acid Sodium Salt牛磺胆酸钠 |
1 g/5 g/25 g |
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Caerulein 雨蛙素 |
1 mg/5×1 mg/10×1 mg |
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L-Arginine L-精氨酸 |
100 g/500 g |
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糖尿病 |
STZ链脲佐菌素 Streptozocin 糖尿病模型建模试剂 |
100 mg/500 mg/1 g |
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Alloxan Monohydrate 阿脲(四氧嘧啶)一水合物 |
10 g/25 g |
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类风湿关节炎 |
Complete Freund's Adjuvant 弗氏完全佐剂(CFA) |
10 mL/5×10 mL |
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Incomplete Freund's Adjuvant 弗氏不完全佐剂(IFA) |
10 mL/5×10 mL |
动物组织切片观察
动物组织切片观察主要分为组织准备、固定组织、组织包埋、切片、染色、显微镜观察几大步骤,可以帮助研究人员观察和研究动物的细胞和组织结构,并进一步了解其功能和相关的生物学过程。它在生物学研究中起着重要的作用为科学家们提供了对动物组织结构和功能进行深入研究的手段和工具。
实验步骤 |
货号 |
名称 |
规格 |
专题详解 |
组织固定和切片 |
10%中性福尔马林溶液 |
100 mL/500 mL |
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4%多聚甲醛固定液 |
100 mL/500 mL |
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OCT冰冻切片包埋剂 |
118 mL |
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组织染色观察 |
苏木素染色液 |
50 mL/100 mL/500 mL |
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苏木素伊红(H&E)染色试剂盒 |
2×100 mL |
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阿利新蓝-过碘酸雪夫(AB-PAS)染色液 |
6×50 mL/6×100 mL |
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Masson染色试剂盒 |
80 mL/160 mL/400 mL |
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天狼星红染色液 |
2×50 mL |
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磷钨酸负染色液(2%, pH7.0) |
100 mL |
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Fast Wright's-Giemsa Stain 快速瑞氏-姬姆萨染液 |
1Kit (150 mL)/ 1Kit (300mL) |
[1] Gordon S. Alternative activation of macrophages. Nat Rev Immunol. 2003;3(1):23-35. doi:10.1038/nri978
[2] Wang LX, Zhang SX, Wu HJ, Rong XL, Guo J. M2b macrophage polarization and its roles in diseases. J Leukoc Biol. 2019 Aug;106(2):345-358. doi: 10.1002/JLB.3RU1018-378RR
[3] He Z, Song J, Hua J, et al. Mast cells are essential intermediaries in regulating IL-33/ST2 signaling for an immune network favorable to mucosal healing in experimentally inflamed colons. Cell Death Dis. 2018;9(12):1173. Published 2018 Dec 5. doi:10.1038/s41419-018-1223-4
[4] Chen S, Saeed AFUH, Liu Q, et al. Macrophages in immunoregulation and therapeutics. Signal Transduct Target Ther. 2023;8(1):207. Published 2023 May 22. doi:10.1038/s41392-023-01452-1