Rhod-2,AM,Cell Permeable 细胞可渗透钙离子荧光探针

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产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

产品简介

 

Rhod-2是一种可见光激发的高亲和力Ca2+指示剂,与其他可见光激发荧光探针如Fluo-3/4相比,Rhod-2具有长波长,更适用于检测具有较高自荧光现象的细胞和组织内钙离子水平以及检测由光感受器和笼锁钙离子螯合剂光激活导致的钙离子释放。

与紫外光激发的荧光探针相比,如Fura-2和Rhod-2,可见光激发Ca2+探针具有以下特点:1)可被大多数设备的激发器有效激发,包括共聚焦激发扫描显微镜以及流式细胞仪等。2)具有更强的染料吸收性能,使得更低浓度的探针即可成功检测 Ca2+变化,从而降低了对活细胞的光毒性。3)Ca2+依赖性荧光强度增强,对Ca2+变化水平检测敏感度更高。4)降低样品自荧光以及光散射的干扰。5)兼容光激活探针以及UV-激发试剂,因此更方便于多参数检测。6)无光谱偏移。7)长波长钙离子探针,能够与GFP和绿色荧光探针兼容。8)特别定位在线粒体,以罗丹明结构为基础的Rhod-2, AM带正电荷,以电位驱动的方式吸收聚集在线粒体,荧光显微镜下观察进入细胞呈现点状染色模式。

 

组分信息

 

组分名称

40776ES50

40776ES72

40776ES80

Rhod-2, AM, Cell Permeant 细胞可渗透钙离子荧光探针

50 μg

50 μg

20×50 μg

 

产品性质

 

CAS 号(CAS NO.)

129787-64-0

分子式(Molecular Fomular)

C52H59N4O19Br

分子量(Molecular Weight)

1123.9575

Ex/Em(nm, Ca2+-bound)

549/578

结构式(Structure)

 

储存条件

 

室温运输。-20℃避光干燥保存可保存1年

 

使用说明

 

  1. Rhod-2/AM储存液的配制

利用高质量无水DMSO溶解Rhod-2/AM配制成2 - 5 mM的储存液,该储存液可分装于-20℃避光干燥密封保存,最长可保存6个月,但是避免反复冻融,建议分装保存。每次使用前需回温至室温。

  1. Rhod-2/AM工作液的配制

利用合适缓冲液HHBS)Rhod-2/AM稀释成2 - 20 μM的工作液并添加0.04% Pluronic F-127和有机阴离子转运抑制剂probenecid(0.5 - 1 mM)。

注: 对于大多数细胞系,建议最终浓度为4 - 5 μM的Rhod-2/AM。细胞加载所需的指示剂的确切浓度必须根据经验确定。

 Rhod-2/AM工作液需现配现用,避免反复冻存。

Pluronic F-127 可以防止Rhod-2/AM在缓冲液中聚合并能帮助其进入细胞。

  1. 取出预培养的细胞,除去培养基,使用缓冲液洗涤细胞3次。

注:如果使用含血清的培养基,血清中的酯酶会降低Rhod-2/AM进入细胞的效果。另外含有酚红的培养基会使本底值略微偏高,所以加工作液之前需尽量去除培养基残留。

  1. Rhod-2/AM工作液加入细胞,加入量以覆盖细胞为准。在37℃培养30 - 60 min。
  2. 用缓冲液HHBS)洗涤细胞 3 次,以充分去除残留的Rhod-2/AM工作液。然后加入缓冲液覆盖细胞。
  3. 数字成像显微镜检测细胞。

注:某些细胞具有自体荧光会影响结果分析,需使用未加载探针细胞做对照,在结果分析时在同一波长下扣除自荧光。

 

注意事项

 

1. 本产品仅作科研用途

2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

3. 荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。

4. 乙酰氧基甲基酯(Acetoxymethylester,AM)容易吸潮,从冰箱取出后,请确认在干燥的环境放至室温后再开封。由于试剂极其微量,开封前请将其短暂离心,以保证粉末落入管底

5. 第一次使用时,建议母液现配现用。且溶解后的试剂尽可能在短时间内使用,以保证实验效果。

6. 母液遇水极易分解,若单次不能用完,建议分装保存,例如5μL/管,用封口膜封口,并严格做到≤-20℃密封干燥保存

7. 建议您在正式实验前先摸索一下细胞量、钙离子荧光探针的终浓度、培养时间等,找到最佳实验条件。

 

 

Ver.CN20241124

 

400-6111-883