Topoisomerase I是一种来源于牛痘病毒,通过基因重组而获得的Ⅰ型拓扑异构酶。它既能解旋DNA的超螺旋结构,也可以识别并切割双链DNA末端[5’C(T)CCTT],并且与DNA共价连接形成稳定复合物,该复合物能与DNA的5’-OH重新连接形成完整DNA链。Topoisomerase I酶可适用于TOPO克隆载体的制备、NGS建库中的接头连接等。
组分信息
组分编号 |
组分名称 |
14971ES60 |
14971ES76 |
14971-A |
Topoisomerase I (20 U/µL) |
5 µL |
25 µL |
14971-B |
TOPO Buffer (10×) |
1 mL |
1 mL |
14971-C |
2 M NaCl |
1 mL |
1 mL |
储存条件
-25~-15℃保存,有效期3年。
使用方法
1. DNA快速酶切流程
1) 按如下建议的加样顺序配制体系反应液(冰上操作)
组分 |
体积(μL) |
超螺旋质粒 |
20 μg |
TOPO Buffer (10×) |
2 µL |
Topoisomerase I (20 U/µL) |
1 µL |
超纯水 |
to 20 µL |
2) 轻柔混匀(切勿涡旋)。
3) 37℃孵育15 min。
注意事项
Ver.CN20231108