Thermolabile Proteinase K是一种经过基因工程改造、切割活性较广、重组工程化的丝氨酸蛋白酶，可水解多种肽键。与其他通过加热只能部分失活的蛋白酶K不同，热敏蛋白酶K可在55℃下温育10分钟进行热失活，从而可以在同一个反应容器中进行后续酶促步骤，实现更简单、更高效的实验流程，无需额外的纯化步骤来去除酶。Thermolabile Proteinase K保持了与野生型版本相似的活性和特异性，主要在大多数氨基酸残基的羧基侧切割肽键，对脂肪族或芳香族氨基酸有一定的偏好性。Thermolabile Proteinase K的常用工作浓度为2-4 U/mL，根据所用缓冲液是否含有SDS、尿素、pH、温度等因素确定具体的工作浓度。

• 消化能力强，在55℃下温育10分钟可热失活；
• 可在同一个反应容器中进行后续酶促步骤，实现更简单、更高效的实验流程，无需额外的纯化步骤来去除酶。

• 消化能力强、热敏感

分别使用翌圣及进口品牌Supplier A的Thermolabile Proteinase K（TLPK）处理限制性内切酶PvuII后，使用处理后的PvuII对λDNA进行处理，结果显示翌圣Thermolabile Proteinase K可有效抑制PvuII活性，且55℃条件下温育10分钟可使Thermolabile Proteinase K完全热失活，对后续反应体系中的添加的蛋白无影响。

图1 消化能力与热敏感性能验证

• 无核酸外切酶、切口酶、RNase残留

将0.12 U Thermolabile Proteinase K分别与核酸底物孵育，并通过琼脂糖凝胶电泳分析谱带变化。实验结果表明，翌圣的3个批次Thermolabile Proteinase K均未检测到核酸外切酶、切口酶或RNase残留，为实验结果的准确性和可靠性提供了有力保障。

图2 核酸外切酶、切口酶、RNase残留结果验证

-25~-15℃保存，有效期2年。