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脱氧核糖核酸酶I(DNase I),即Deoxyribonuclease I,一种发现于多种细胞和组织的核酸内切酶,靶向切割邻近嘧啶的磷酸二酯键,产生5’端为磷酸基团、3’端为羟基的多聚核苷酸,平均消化产物最小为多聚四核苷酸。DNase可催化多种形式DNA,如单链DNA、双链DNA,甚至染色质(其切割速率受组蛋白影响)。最佳的工作范围是pH7-8,DNase的活性依赖于Ca2+,并可被二价金属离子如Co2+,Mn2+,Zn2+等激活。5 mM Ca2+可保护酶使其不被水解。在Mg2+存在下,该酶可随机识别和切断DNA任一条链上的任意位点;而在Mn2+存在的条件下,可同时识别DNA的两条链并在几乎相同的位点进行切割。DNase I最早从胰腺中分离而来,至今哺乳动物胰腺也是该酶的最主要的来源之一。
本品来自牛胰腺,由四种色谱区分的组分A,B,C,D构成,摩尔比为4:1:1,而D组分非常少。分子生物学实验中常用于清除蛋白中的DNA,或者用于向DNA中引入缺口使标记碱基插入DNA。本品以含氯化钙的冻干粉形式供应,酶活力≥2000 Kunitz Units/mg 蛋白。
| CAS号(CAS NO.) | 9003-98-9 |
| 分子量(Molecular Weight) | ~31 kDa |
| 孔尼茨单位(Kunitz Units) | ≥2000 Kunitz Units/mg protein |
| 类型(Type) | Type IV |
| 最佳pH(Optimal pH) | 7~8 |
| 外观(Appearance) | 白色至浅褐色冻干粉 |
| 纯度(Purity) | Protein:≥80% by Biuret |
| 溶解性(Solubility) | 0.15 M NaCl:5 mg/mL,无色透明溶液 |
| 激活剂(Activators) | 多种二价金属离子如Mg2+、Mn2+, Ca2+, Co2+, and Zn2+ |
| 抑制剂(Inhibitors) | β-巯基乙醇;螯合剂;SDS;肌动蛋白 |
| 活力单位定义(Unit Definition) | 25℃,pH5.0条件下DNase催化底物DNA,使每毫升每分钟ΔA260增加0.001的变化定义为一个酶活力单位(Kunitz unit)。 |
组分-25~-15℃保存,有效期2年;
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