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iPSC神经分化全攻略:从神经干/祖细胞诱导到神经元、胶质细胞培养与鉴定

iPSC神经分化全攻略:从神经干/祖细胞诱导到神经元、胶质细胞培养与鉴定

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2026-10-30

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诱导多能干细胞(iPSCs)凭借其自我更新能力和多向分化潜能,为神经系统发育研究、神经退行性疾病建模、药物筛选及再生医学研究提供了重要的细胞模型。通过特定的培养条件和诱导策略,iPSCs可定向分化为神经干/祖细胞(NSCs/NPCs),并进一步产生神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞等不同类型的神经谱系细胞,为体外模拟神经系统的发育过程及功能研究奠定基础。

本文整理了从人iPSC诱导生成NSCs/NPCs,到神经干/祖细胞扩增、冻存及向神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞定向分化的实验流程,并结合不同分化阶段的细胞形态观察、培养条件及免疫荧光标志物鉴定,为神经分化相关研究提供参考。

制备诱导性多能干细胞iPSC[1]
一、试剂准备

iPSC培养基:

400  mL DMEM/F12(41406ES)+5  mL 100× MEM非必需氨基酸溶液(60707ES)+5  mL 200 mM L谷氨酰胺(60757ES)+100  mL 血清替代物SR+ 500  μL 0.1 M β巯基乙醇(52644ES)/DTT二硫苏糖醇(20311ES)+200  μL 10 μg/mL bFGF(91330ES)(由41412ES 0.1%BSAPBS配制)试剂配制后,请避光2~8 ℃保存,有效期2周。

注:

1. 建议用DTT二硫苏糖醇(20311ES)代替β巯基乙醇。DTT 二硫苏糖醇作用与β-巯基乙醇相似,但DTT的刺激性和毒性都低于β-巯基乙醇,且粉末的稳定性也高于β-巯基乙醇。

2. 2-巯基乙醇-d6(52644ES)是2-巯基乙醇的氘代形式。

二、实验步骤

1. 实验前,生物安全柜内部紫外照射消毒1 h,并用70%乙醇擦拭将在安全柜内使用的工具和用品。

2. 使用状态优良、无分化集落的人iPSC细胞培养于丝裂霉素C(53380ES)处理的小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)饲养层上,使用iPSC培养基,培养于100 mm培养皿(84003ES)。iPSC汇合度70‑80%时,每37天传代一次。

注:

a. 若显微镜下观察到iPSC集落出现分化区域,在生物安全柜内倒置显微镜下,使用玻璃巴氏吸管或200  μL枪头(83061ES)刮除分化部分。

b. iPSC细胞质量直接决定神经诱导成功率,故建议对多个iPSC细胞株测试神经分化能力。

3. 6孔板每孔加入1 mL Ceturegel® Matrix hESC-Qualified,LDEV-Free 基质胶(40190ES)包被,置于37 ℃、5%CO₂培养箱,至少孵育1 h。

4. iPSC汇合度达到70‑80%时,胶原酶IV(40510ES)消化收集iPSC:吸弃旧iPSC培养基,5  mL PBS(41403ES)清洗一次,每皿加入4 mL胶原酶IV溶液。

5. 37 ℃、5%CO₂培养箱孵育30 min。

注:可视情况延长10‑15 min,总消化时间不可超过60 min,避免细胞活性下降。

6. 观察细胞集落边缘开始翘起,去除胶原酶IV,加入10  mL iPSC培养基稀释并洗去残留胶原酶IV。

7. 使用10 mL移液管轻柔吹打,收集iPSC转移入15 mL离心管。

8. 静置离心管10 min,依靠重力沉降去除MEF饲养层细胞。iPSC集落沉降管底,MEF为单细胞悬浮在上清。小心吸弃含MEF的上清,不要扰动底部iPSC沉淀。

9. 加入6  mL iPSC培养基重悬细胞,取部分样本测定细胞浓度:

a. 吸取1  mL细胞悬液至新15  mL离心管;

b. 200 × g离心3 min,弃上清;

c. 加入1  mL Accutase(40506ES),37 ℃孵育5 min,将iPSC团块解离为单细胞;

d. 吹打混匀,台盼蓝染色(40207ES)计数。

10. 吸弃步骤3中6孔板的Ceturegel® Matrix hESC-Qualified,LDEV-Free 基质胶(40190ES),每孔加入2.5  mL iPSC培养基。

11. 轻轻震荡装有iPSC悬液的离心管,将细胞接种到6孔板,接种密度2.5×10⁵‑3×10⁵细胞/孔。

注:本方案需要iPSC以细胞团块形式接种,单细胞接种无法存活。

12. 孔内加入ROCK抑制剂Y2763(52604ES),终浓度10  μM。

13. 前后、左右轻柔晃动培养板使细胞分布均匀,禁止画圈涡旋晃动,否则细胞团分布不均。

14. 放入37 ℃、5%CO₂培养箱,过夜培养。

iPSC诱导为神经干/祖细胞(NSCs/NPCs)[2]
图片1.png

图1. 人iPSC经NSCs/NPCs向神经元分化的神经诱导示意图

一、试剂准备

神经干/祖细胞(NSCs/NPCs)筛选培养基:

DMEM/F-12(41406ES)+0.5% N2(60706ES)+1 mM L谷氨酰胺(60757ES)+1% MEM非必需氨基酸溶液(60707ES)+ 0.1 mM β巯基乙醇(52644ES)+0.5%细胞培养用青霉素-链霉素(60162ES)

神经干/祖细胞(NSCs/NPCs)扩增培养基:

DMEM/F-12+0.5% N2+1 mM L谷氨酰胺+1% MEM非必需氨基酸溶液+ 0.1 mM β巯基乙醇+0.5%细胞培养用青霉素-链霉素+bFGF(91330ES)

Neurobasal完全培养基:

神经元基础培养基(41410ES)+2% B-27(60703ES)+10 ng/mL BDNF(92129ES)+0.5%细胞培养用青霉素-链霉素

二、实验步骤

1)从iPSCs诱导获得NSCs/eNPCs

1. 6孔板每孔加入2 mL 1× PBS(41403ES),在室温下清洗2次

2. 6孔板每孔加入2 mL预热的神经干/祖细胞(NSCs/NPCs)筛选培养基培养,并每隔一天更换一次培养基。

3. 在培养第5天,将神经干/祖细胞(NSCs/NPCs)筛选培养基更换为神经干/祖细胞(NSCs/NPCs)扩增培养基,继续培养7天。

4. 在使用神经干/祖细胞(NSCs/NPCs)扩增培养基培养3–5天后,约50%–70%的细胞克隆中会出现细胞聚集体。注:如果培养7天后,形成的神经样结构仍然较少,则可继续培养5–7天。这些细胞聚集体表达神经干细胞相关标志物,包括NESTIN、SOX1和MUSASHI(相应抗体选择指南见后文)

图片2.png

图2. 在神经干/祖细胞(NSCs/NPCs)扩增培养基中培养并进行分化的iPSCs,可观察到逐渐发育形成神经玫瑰花环结构(neural rosettes)的细胞聚集体中表达神经干细胞标志物。

2)神经球样结构的形成

1. 吸去原有培养基,使用1 mL DMEM/F12培养基清洗细胞两次,然后加入2 mL预热的神经干/祖细胞(NSCs/NPCs)扩增培养基

2. 将培养板放置于显微镜下,使用4×物镜观察。使用弯曲的20G针头,将细胞聚集体切割成直径约40–50 μm的小块

3. 收集含有切割后细胞聚集体的神经干/祖细胞(NSCs/NPCs)扩增培养基,将其转移至超低吸附6孔板中,放入37 ℃、5%CO2培养箱中培养。

4. 第2天,细胞聚集体应逐渐变圆,形成悬浮的球形细胞聚集体,这些结构称为神经球样结构(NLSs),见图3a。

图3. 神经球样结构(NLSs)和神经玫瑰花环结构(Neural rosettes)的形成。

a. 由细胞聚集体形成的神经球样结构(NLSs),这些结构可进一步发育形成神经玫瑰花环;b. 将细胞聚集体解离为单细胞悬液后,利用培养板形成的神经球样结构(NLSs);c. 将纯化后的神经球样结构(NLSs)接种培养12小时后,观察到的神经玫瑰花环结构的显微照片。比例尺:50 μm。

5. 使用神经干/祖细胞(NSCs/NPCs)扩增培养基继续培养 NLSs,培养时间为2–3天。每天按照以下步骤更换一半培养基:

a. 收集培养板中悬浮的 NLSs,将其转移至15 mL锥形离心管(83505ES)中。

b. 静置10分钟,使NLSs沉降至离心管底部。

c. 将一半原培养基更换为新鲜培养基。

d. 将NLSs转移回超低吸附6孔板中。

e. 为使NLSs在培养孔中均匀分布,使用5 mL移液管上下吹打3–4次,将其重新悬浮。

注:由于NLSs容易迅速沉降至容器底部,因此每次只向两个培养孔中分装细胞悬液,并在每次分装前重新悬浮。

6. 继续培养,直至NLSs的直径达到约300 μm。

3)神经球样结构的纯化

1. 将悬浮于神经干/祖细胞(NSCs/NPCs)扩增培养基中的NLSs转移至15 mL锥形离心管中,静置10分钟,使其沉降。

2. 吸去上清液,使用12 mL神经干/祖细胞(NSCs/NPCs)扩增培养基重悬NLSs。

3. 将 NLSs 悬液分装至Ceturegel® Matrix hESC-Qualified,LDEV-Free 基质胶(40190ES)包被的6孔板中,每孔加入2 mL,过夜培养后,NLSs通常会贴附于培养板底部,并逐渐展平。此时可以观察到神经玫瑰花环结构(neural rosettes),见原文图3c。

4. 按照步骤2)1-3切割并收集神经玫瑰花环结构后培养。

5. 第2天,神经玫瑰花环结构应再次变圆,形成NLSs。继续培养2–3天,直至其直径达到约300 μm。按照步骤2)5.a-e中描述的方法,每隔一天更换一半培养基。

4) 建立NSCs/eNPCs单层培养体系

1. 收集 NLSs,并使用神经干/祖细胞(NSCs/NPCs)扩增培养基将其转移至Ceturegel®基质胶包被的6孔板中培养。

2. 数小时后,NLSs会贴附于培养板表面,神经干细胞(NSCs)开始从NLSs中向外迁移。

此时将形成一种异质性细胞培养体系,其中包含 NSCs 和早期神经祖细胞(eNPCs)。在这一阶段,培养物中仍可能观察到成纤维细胞样细胞,应在倒置显微镜下,使用移液器吸头刮除这些细胞。

5) NSCs/eNPCs的传代

1. 吸去神经干/祖细胞(NSCs/NPCs)扩增培养基,并使用DMEM/F12培养基清洗细胞。

对于6孔板培养体系,每孔加入Accutase,于37°C孵育3分钟。随后加入2 mL DMEM/F12培养基,用移液器吸头轻柔地反复吹打,使细胞脱离培养板。

2. 将细胞悬液转移至15 mL锥形离心管中,1,200 rpm离心5分钟后弃去上清液。

3. 使用12 mL神经干/祖细胞(NSCs/NPCs)扩增培养基重悬细胞。随后将细胞接种至适当的Ceturegel® 基质胶包被培养板中继续培养。

4. 第2天,将神经干/祖细胞(NSCs/NPCs)扩增培养基更换为CelCulSF™ TeSR多能干细胞培养基(44501ES)继续培养细胞,直至细胞达到汇合状态,见图4b。

图4. iPSC来源NSCs/eNPC的免疫细胞化学分析。比例尺:50 μm。

当细胞达到汇合状态时,6孔板每孔约含有:3×10⁶个细胞。从这一阶段开始,NSCs/eNPCs CelCulSF™ TeSR多能干细胞培养基(44501ES)进行维持培养和传代。

注:为了降低发生染色体异常的风险,不建议将NSCs/NPCs 连续扩增超过12代。

6) NSCs/eNPCs冻存与复苏

方法

1. 吸去培养基,使用DMEM/F12培养基清洗细胞。

2. 对于6孔板培养体系,每孔加入 1 mL Accutase,于37°C孵育3分钟。

3. 加入2 mL DMEM/F12培养基,使用移液器吸头轻柔地反复吹打,使细胞脱离培养板。

4. 使用台盼蓝染色法(40207ES)计数活细胞。

5. 将细胞以1200 rpm离心5分钟,使细胞沉淀。

6. 弃去上清液,通过轻弹离心管使细胞沉淀松散。

7. 使用无血清细胞冻存液(40153ES)重悬细胞,将细胞浓度调整至4×106 cells/mL。

8. 将细胞悬液按每管500 μL分装至冻存管(84105ES)中,放入细胞程序降温冻存盒(84608ES),并立即转移至−80°C冰箱。

9. 第二天,将冻存管转移至−135°C超低温冰箱或液氮储存容器中长期保存。

复苏

1. 从低温储存设备中取出一支冻存管,使用 70%乙醇喷洒冻存管外表面进行消毒。

2. 向15 mL锥形离心管中加入5 mL预冷的 DMEM/F12培养基。

3. 打开冻存管盖,使用1 mL或5 mL移液管从上方向冻存的细胞悬液施加压力,使冻结的细胞块松动或破裂,这种操作可以使冻存细胞迅速转移至培养基中,从而提高细胞回收率。

4. 向冻存管中加入500 μL预冷的DMEM/F12培养基,将管内全部内容物转移至上述15 mL锥形离心管中。

5. 以1200 rpm离心5分钟。

6. 弃去上清液,使用2 mL DMEM/F12培养基清洗细胞。

7. 使用8 mL CelCulSF™ TeSR多能干细胞培养基培养基重悬细胞。

8. 将细胞悬液接种至Ceturegel®基质胶包被的6孔板中,每孔加入2 mL细胞悬液。

9. 继续培养细胞,直至达到汇合状态。培养期间每隔一天更换一次培养基。

神经干细胞体外分化为神经元[2]

1. 按照前文所述的方法,使用Accutase消化神经干细胞/早期神经祖细胞(NSCs/eNPCs)使细胞解离。

2. 对细胞进行计数,并使用适量的CelCulSF™ TeSR多能干细胞培养基重悬细胞。

3. 按照以下密度将细胞接种至培养板中:

96孔板:每孔接种1×104个细胞(10000 cells/well)

384孔板:每孔接种2.5×103个细胞(2500 cells/well)

4. 接种后的第二天,将CelCulSF™ TeSR多能干细胞培养基更换为Neurobasal完全培养基,并继续培养4周。

5. 在培养过程中,每隔一天吸去一半原培养基,并补充等体积的新鲜培养基。

6. 在上述培养条件下,可以获得神经元高度富集的细胞培养物图5。

图5. iPSC来源神经元的免疫染色分析

a. TUJ1:神经元标志物(βIII-微管蛋白)b. MAP2:微管相关蛋白2 c. VGLUT1:囊泡谷氨酸转运蛋白1 d. NR1:N-甲基-D-天冬氨酸受体(NMDA受体)的NR1亚基

神经干细胞体外分化为星形胶质细胞[3]
一、准备试剂

星形胶质细胞分化培养基:

DMEM(41401ES)+ 2 mM Glutamax(60701ES)+1% N-2(60706ES)+1% 青霉素-链霉素(60162ES)、1%胎牛血清(40132ES)+20 ng/ml CNTF(92123ES)。

二、实验步骤

1. Ceturegel® Matrix hESC-Qualified,LDEV-Free 基质胶(40190ES)基质胶融化后,用预冷的枪头混匀。

2. 采用无血清培养基稀释Ceturegel®基质胶到需要的浓度。建议根据具体的实验做个梯度实验,从而确定最佳的包被浓度。

3. 将稀释的Ceturegel®基质胶加入需要包被的培养器皿中,包被量至少覆盖细胞的所有生长表面。室温下孵育1小时。

4. 去除未凝固结合的Ceturegel®基质胶,用无血清培养基轻轻地冲洗。此时平板即可使用。

5. 神经干细胞接种包被于Ceturegel®基质胶的培养板,铺板浓度为2.5×104个细胞/cm2。

6. 培养2天后,将培养基更换为星形胶质细胞分化培养基。细胞分化培养周期为3–12周,分化期间传代3–5次,每3–4天更换一次培养基。

7. 3周后,成熟神经元可以开展免疫荧光染色检测(见后文)。

神经干细胞体外分化为少突胶质细胞[4]
一、试剂准备

含维生素A的神经维持培养基(NMM):

482 mL DMEM/F12(41406ES)+482 mL Neuronal-Basal Medium(41410ES)+10 mL 含维生素A的B27(60503ES)+5 μg/mL Insulin(92366ES)+5 mL Glutamax(60701ES)+5 mL N2 supplement(60706ES)+5 mL NEAA(60707ES)+10 mL Penicillin-Streptomycin(60162ES)+10 μM β-mercaptoethanol

不含维生素A的神经维持培养基(NMM):

482 mL DMEM/F12+482 mL Neuronal-Basal Medium+10 mL 不含维生素A的B27(60704ES)+5 μg/mL Insulin+5 mL Glutamax+5 mL N2 supplement+5 mL NEAA+10 mL Penicillin-Strep tomycin+10 μM β-mercaptoethanol

二、实验步骤

1. 将hiPSC接种到6孔板(84011ES)。每孔3 mL预温含维生素A培养基NMM+20 ng/mL EGF(92708ES)+4 ng/mL bFGF(91330ES)+10 μM Y27632(52604ES)+20n g/mL T3(54574ES),用于形成胚状体(EB)。建议2孔iPSC对应1孔EB。

2. 次日(第1天)更换2/3培养基:轻轻旋转使细胞聚集到孔中央,小心吸除2 mL,再补加2mL同配方预温培养基。

3. 第2天更换2/3培养基,使用含维生素A培养基NMM+20 ng/mL EGF(92708ES)+4 ng/mL bFGF(91330ES)+10 μM Retinoic acid(53001ES)。

4. 之后隔日重复换液。

5. 第10天将EB接种到Ceturegel®基质胶包被板。若EB颜色很深或密度下降,可提前接种,但不早于第4天,通常第8天较理想。

6. 第10天,将全部培养基更换为预温含维生素A培养基NMM+20 ng/mL EGF(92708ES)+20 ng/mL T3(54574ES)。

7. 之后隔日更换2/3培养基;细胞达到90%密度时,使用Accutase(40506ES)传代到新的Ceturegel®基质胶包被板。

8. 第18天,更换为不含维生素A培养基NMM+20 ng/mL EGF(92708ES),继续按上一步方式换液与传代。

9. 第37天,更换为不含维生素A培养基NMM+5 ng/mL bFGF(91330ES)+5 ng/mL EGF(92708ES)+1 μg/mL Mouse Laminin(92364ES)+50 μg/mL L-Ascorbic acid(60374ES),继续换液/传代。

10. 第39天,更换为不含维生素A培养基NMM+5 ng/mL bFGF(91330ES)+5 ng/mL EGF(92708ES)+1 μg/mL Mouse Laminin(92364ES)+50 μg/mLL-Ascorbic acid(60374ES)+50 ng/mL Noggin(92623ES),继续换液/传代。

11. 第42天,更换为不含维生素A培养基NMM+1 μg/mL Mouse Laminin(92364ES)+50 μg/mL L-Ascorbic acid(60374ES)+50 ng/mL Noggin(92623ES),继续换液/传代。

12. 将OPC在第11步培养基中继续培养至第65天。

注:

1. EB接种:收集含EB的培养液至15或50mL管(83505ES/83507ES),静置2-3min使EB沉降,吸去大部分培养液并用目标培养基重悬。12孔板(84012ES)每孔1 mL,6孔板(84011ES)每孔2 mL。第4-9天接种时使用含维生素A培养基NMM+20 ng/mL EGF(92708ES)+4ng/mL bFGF(91330ES)+10 μM Retinoic Acid (53001ES)+20 ng/mL T3。若第10天接种,则使用含维生素ANMM+20 ng/mL EGF(92708ES)+20 ng/mL T3。

2. 传代后在培养基中加入Y27632有助于细胞恢复。

免疫荧光染色鉴定[1-4]
实验步骤

1. 小心吸弃上清培养基。

注:吸弃、添加缓冲液动作必须轻柔,防止细胞脱落。

2. 加入4%多聚甲醛磷酸盐缓冲液室温固定细胞15 min。

3. 吸去多聚甲醛溶液后,用PBS清洗细胞3次。

4. 室温下用PBS配制的0.1% Triton X-100透化细胞10 min。

5. 吸去透化液后,用PBS配制的5% BSA在室温封闭60 min。

6. 吸去封闭液后,将一抗用封闭液稀释,4 °C孵育过夜。

一抗选择指南

细胞名称

抗原

产品货号

产品名称

神经干/祖细胞

SOX1

768822ES

SOX1 Rabbit mAb

NESTIN

767098ES

Nestin Rabbit mAb

PAX6

38594ES

PAX6 Rabbit mAb

神经元

TUJ1

766767ES

beta III Tubulin Rabbit mAb

NR1

770886EN

Phospho-NMDAR1 (Ser890) Rabbit pAb

VGluT1

766256ES

VGluT1 Rabbit mAb

MAP2

38986ES

MAP2 (3B5) Mouse mAb

Dcx

38980ES

Doublecortin Mouse mAb

少突胶质细胞

GalC

38277ES

GALC Rabbit pAb

Olig2

769086ES

Olig2 Mouse mAb

MBP

764141ES

MBP Rabbit pAb

星形胶质细胞

GFAP

772986ES

GFAP Rabbit mAb

S100B

38585ES

S100B Rabbit pAb

EAAT1

767136ES

EAAT1 Rabbit mAb

EAAT2

767135ES

EAAT2 Rabbit mAb

注:OLIG2和MBP不能标记所有人少突胶质细胞谱系细胞

神经干细胞抗体选择指南详情见官网:神经干细胞(NSCs)应用抗体推荐

7. 吸弃一抗,PBS洗涤3次,去除未结合一抗。

8. 加入对应荧光二抗(PBS稀释),室温避光孵育60 min。

二抗选择指南详情见官网:如何选择合适的二抗

9. 弃二抗,PBS洗3次;最后一次洗涤可加入DAPI溶液(3 ng/mL)/Hoechst33258(1 μg/mL)复染细胞5-10分钟,再使用PBS冲洗。如需要,每张玻片可以滴加Fluoromount-GTM 抗荧光淬灭封片剂(36307ES)封片并用盖玻片密封。

10. 荧光显微镜观察成像。

更详细的免疫荧光实验方案详情见官网:免疫荧光实验全流程解决方案

相关产品推荐

产品分类

产品货号

产品名称

细胞培养基

41401ES

DMEM高糖培养基

41406ES

DMEM/F12 培养基

41410ES

神经元基础培养基

41420ES

DMEM/F-12 减血清培养基

重组蛋白

91330ES

HiActi® Recombinant Human bFGF/FGF-2 Protein 重组人碱性成纤维细胞生长因子

92123ES

HiActi® Recombinant Human CNTF Protein重组人睫状神经营养因子

92708ES

HiActi® Recombinant Human EGF Protein 重组人表皮生长因子

92364ES

Laminin from Mouse EHS sarcoma 小鼠层粘连蛋白

92366ES

Recombinant Human Insulin 重组人胰岛素溶液(10mg/mL, 液体)

92623ES

HiActi® Recombinant Human Noggin Protein 重组人Noggin蛋白(液体)

细胞培养相关试剂

40132ES

Fetal Bovine Serum Gold Pro 胎牛血清(特级)

40506ES

ACCUTASE细胞消化液

40510ES

Collagenase IV胶原酶IV型

40190ES

Ceturegel® Matrix hESC-Qualified,LDEV-Free 基质胶

60162ES

细胞培养用青霉素-链霉素(双抗)

60703ES

50× 无血清NSC-27添加剂,等同于B-27

60707ES

100× MEM非必需氨基酸溶液(NEAA)

60757ES

200 mM L谷氨酰胺

40207ES

0.4% 台盼蓝染色液

60313ES

DMSO二甲基亚砜(细胞培养级)

36308ES

DAPI Fluoromount-G™ 抗荧光淬灭封片剂(含DAPI,水溶性)

生化试剂

41403ES

1× PBS 细胞培养级

41412ES

PBS-BSA溶液(0.1%BSA,无菌,1×即用型)

60167ES

无酶无菌水(未经DEPC处理)

10116ES

超纯水

60374ES

L-抗坏血酸(维生素C)

小分子化合物

60902ES

D(+)-Glucose,anhydrous

52604ES

Y-27632 dihydrochloride

54574ES

Triiodothyronine

53001ES

Retinoic acid

20311ES

DTT二硫苏糖醇

53380ES

丝裂霉素C

耗材

83505ES

15 mL离心管灭菌袋装

83507ES

50mL离心管灭菌袋装

84011ES

6孔细胞培养板(TC处理)

84012ES

12孔细胞培养板(TC处理)

84003ES

100 mm培养皿

83061ES

200 μL加长滤芯吸头盒装灭菌

参考文献

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