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上新 | 极高热稳定SSB:防复性、抗降解、破二级结构,PCR/测序实验稳了

在 PCR、DNA 测序等核心分子生物学实验中,单链 DNA是决定实验成败的 “关键中间体”(PCR 扩增需以单链DNA为模板实现引物结合,DNA 测序更需单链 DNA 模板保障测序酶持续延伸)。然而,单链DNA稳定性极差,实验中极易遭遇三大难题:

复性干扰:单链 DNA易复性,导致 PCR 引物无法精准结合模板;

降解损耗:单链 DNA易被核酸酶降解,造成模板量减少,直接降低实验产出;

二级结构阻碍:单链 DNA/RNA 易形成发卡等二级结构,不仅干扰 PCR 扩增特异性,还会阻碍测序酶延伸进程、缩短焦磷酸测序读长,甚至影响 SNP 分析准确性。

这些问题成为科研高效推进的核心阻碍,而单链结合蛋白(SSB)正是针对性解决单链 DNA 稳定性问题的关键工具,SSB能特异性结合 DNA 单链区域,从根源上阻断单链DNA的复性、降解及发卡结构形成。这一特性可显著提升 PCR/RT-PCR 的扩增产量与特异性,延长 DNA 测序的读长并提高其准确性,为实验效率提升与结果可靠性提供关键保障。

图1.SSB结合和脱离ssDNA的示意图[1]

翌圣ET SSB (Cat#14654ES)

为解决以上难题,翌圣生物基于UCF.ME®超洁净工艺技术推出Extreme Thermostable Single-Strand DNA Binding Protein, ET SSB (Cat#14564),该产品由UCF.ME®超洁净分子酶生产基地生产,从物料筛选到环境控制,从工艺优化到质量检测,每一环节均经过严格把控,确保极低的背景菌gDNA残留和核酸酶残留,为实验结果的准确性、可靠性和重复性提供了强有力的保障。

产品优势

  • 纯度高:≥95%,避免杂蛋白干扰实验体系;

  • 极低宿主 gDNA 残留:<1 copy/2.5 μg,降低背景污染风险;

  • 耐热性强:经过95℃ 60min热处理后,仍能保持稳定活性,适配高温实验场景;

  • 无核酸外切酶、切口酶、RNA酶残留。

性能展示

耐热性强:经过95℃ 60min热处理后,仍能保持稳定活性,适配高温实验场景

图2. 翌圣ET SSB耐热性验证结果

注:分别取不同投入量(2 μg、1 μg)的 ET SSB,经 95℃ 60 分钟热处理与未经热处理后,与 ssDNA 进行结合反应,通过琼脂糖凝胶电泳观察结合效果。电泳结果显示,经 95℃ 60 分钟热处理的 ET SSB,与未处理组相比活性基本无差异,仍能高效结合 ssDNA,证明其具备优异的高温稳定性。

无核酸酶、切口酶及RNase残留

图3. 翌圣ET SSB核酸外切酶、切口酶、RNase残留检测结果

注: 将翌圣ET SSB分别与核酸底物孵育,并通过琼脂糖凝胶电泳分析谱带变化。实验结果表明,翌圣的3个批次ET SSB均未检测出核酸外切酶(1 μg)、切口酶(1 μg)或RNase(1 μg)残留。

订购信息

产品应用

产品名称

产品货号

适用于各类PCR、DNA测序

Extreme Thermostable Single-Strand DNA Binding Protein, ET SSB (0.5 mg/mL)

14564ES

适用于RPA等常温扩增

T4 Gene 32 Protein, gp 32 (5 μg/μL)

11081ES

参考文献:
[1]George NP, Keck JL. Molecular biology: Slip sliding on DNA. Nature. 2009 Oct 22;461(7267):1067-8. doi: 10.1038/4611067a.
[2]Olszewski M, Grot A, Wojciechowski M, et al. Characterization of exceptionally thermostable single-stranded DNA-binding proteins from Thermotoga maritima and Thermotoga neapolitana[J]. BMC microbiology, 2010, 10(1): 260.

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