双封闭Taq酶单克隆抗体|Double-Block anti-Taq DNA Polymerase（31303ES）

Hieff^® Double-Block anti-Taq DNA Polymerase Antibody是用于热启动PCR技术的双封闭Taq酶单克隆抗体，其与Taq酶结合后，抑制5'→3'聚合酶活性和5'→3'外切酶活性，能够在低温条件下有效抑制引物的非特异性退火及引物二聚体引起的非特异性扩增，并有效防止探针降解。Hieff^® Double-Block anti-Taq DNA Polymerase Antibody在PCR反应最初的DNA变性步骤中变性，DNA聚合酶活性恢复，达到热启动PCR效果。使用本品无需特殊的对抗体失活处理，可以在常规PCR反应条件下使用。

1、超强扩增特异性——双封闭抗体可同时封闭聚合酶和外切酶活性，有效避免非特异性扩增，提高特异性

2、卓越检测灵敏度——热启动形式可保证低丰度基因有效检出，灵敏度更高

3、优秀产品稳定性——37℃放置5天、4℃放置10天性能稳定

4、基线平稳线性好——解决了基线上漂问题，线性好

5、酶活释放速度快——95℃下加热20 s即可释放95%以上酶活

6、酶类适用范围广——野生型和突变型Taq酶均适用，每mg抗体可封闭4-10 KU Taq酶

1、Taq DNA聚合酶外切酶活性验证

将合成的引物探针分别配于未封闭以及双封闭抗体封闭的Taq DNA聚合酶的反应液中，40℃反应，检测两者荧光信号，发现双封闭抗体可有效封闭Taq DNA聚合酶的外切酶活性。

图1.双封闭抗体外切酶活性封闭效率检测

2、检测灵敏度验证

分别用翌圣双封闭抗体以及T公司抗体对Taq 酶封闭后通过ARMS-PCR技术检测阳性样本，发现翌圣双封闭抗体封闭的Taq酶在ARMS-PCR扩增中分型准确，灵敏度更高。

图2.ARMS-PCR扩增曲线图

3、基线问题验证

某些引物配合特定buffer和仪器时，会出现基线上漂的情况，但双封闭抗体能解决基线上漂问题，更有利于基线平稳。

图3.N基因(C)、ACT基因(D)扩增曲线图

 4、酶活释放检测

分别用进口T公司抗体和翌圣双封闭抗体（Cat#31303）封闭Taq酶，并在95℃下热激20 s，检测酶活。可以看到95℃热激20 s后，31303可释放95%以上的酶活，与T公司抗体相当。

表1.95℃下热激20 s酶

5、多类型Taq酶检测

翌圣双封闭抗体（Cat#31303）分别封闭三种类型Taq酶（野生型+2种突变型），封闭比例为1μg : 5U，测量荧光值以及封闭效率。发现对于不同类型的Taq酶，翌圣双封闭抗体（Cat#31303）封闭效果均较好。

表2.不同类型Taq酶的封闭效率

-25~-15℃保存，有效期2年