dsDNA BR Assay Kit 是一种简便、灵敏、准确、宽范围的双链 DNA(dsDNA BR)荧光定量检测试剂盒,在2~1000 ng 区间具有良好的线性关系。本试剂盒包含荧光检测试剂、缓冲液及相关的 dsDNA BR 标准品,使用前先将荧光检测试剂用缓冲液稀释成工作液,然后加入待测 dsDNA 样品,制作标准曲线后,使用荧光酶标仪或 Qubit®荧光仪进行读数。该产品对常规的污染物如蛋白质、盐类等具有较好的耐受性。
组分信息
产品编号 |
组分名称 |
浓度 |
100 T |
500 T |
12643-A |
dsDNA BR Reagent |
200×concentrate in DMSO |
250 μL |
1.25 mL |
12643-B |
dsDNA BR Buffer |
Not applicable |
50 mL |
250 mL |
12643-C |
dsDNA BR Standard 1 |
0 ng/μL in TE buffer |
1 mL |
5×1 mL |
12643-D |
dsDNA BR Standard 2 |
100 ng/μL in TE buffer |
1 mL |
5×1 mL |
储存条件
2-8℃避光保存 6 个月,冰袋运输,请注意避免反复冻融。
注意事项
1)荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭;
2)检测试剂 dsDNA BR Buffer 略起泡,使用时上下颠倒混匀,避免剧烈震荡;
3)dsDNA BR 标准品,每次使用轻柔震荡或颠倒混匀,瞬时离心数秒收集管盖及管壁上的液体;
4)为保证定量结果的精确,请使用校准后的移液器操作,样品浓度较低时请增大待测样品投入体积;
5)检测工作液请现用现配,当天使用完毕,使用前请用标准品校准。
6)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作;
7)本产品仅用作科研用途!
实验步骤
使用 Qubit荧光仪进行 dsDNA BR 定量检测分析
1.实验准备
1)在使用前,将试剂盒中的各组分恢复至室温(室温放置约半小时)。检查 dsDNA BR Reagent(组分 A)是否有沉淀,若有沉淀物,可将该试剂至于 37℃水浴锅中温育,并轻柔混匀直至沉淀物完全溶解。
准备足够量 0.5 mL PCR 薄壁管并标注。请勿在 PCR 管侧壁标注,以免影响荧光信号采集。
2.配制检测工作液
在避光塑料容器中,使用 dsDNA BR Buffer 按比例将适量 dsDNA BR Reagent 稀释至 1×(例:取 1 μL dsDNA BR Reagent, 加入 199 μL dsDNA BR Buffer),上下颠倒混匀。工作液现用现配,每次配制检测工作液时要使用洁净的容器。
3.配制待检样品
1)配制待检标准品 1 和标准品 2。取 190 μL 检测工作液至标准品 PCR 管中,分别加入 10 μL dsDNA BR Standard 1 和 dsDNA BR Standard 2 至相应标记的标准品 PCR 管中,轻柔涡旋振荡 2-3 sec,尽量避免气泡产生,瞬时离心数秒。
2)配制待检样品。取 180-199 μL 检测工作液至样本 PCR 管中,分别加入 1-20 μL 待检样本,使 PCR 管中每个样本终体积为 200 μL,轻轻涡旋振荡 2-3 sec,尽量避免气泡产生。
4.检测
1)将所有待检 PCR 管置于室温避光孵育 2 min。
2)按照 Qubit荧光仪的操作说明,选择 dsDNA BR 检测程序,使用待检标准品校正荧光曲线后进行待检样品的浓度测定。
Ver.CN20230524