胃癌(gastric cancer,GC)是恶性肿中常见肿瘤之一,在消化道的恶性肿瘤中约占 50%。胃癌的发病机制与胃黏膜损伤、亚硝基化合物攻击及幽门螺杆菌感染等因素密切相关,是一个联合了多因素、多阶段的发生、发展过程。所以建立胃癌模型,对于研究和防治胃癌是至关重要的。
N-甲基-N'-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)是一种N-亚硝基化合物,属于可直接与 DNA作用的遗传毒物,通过直接靶定 DNA 而诱发细胞产生遗传毒性应激,并导致染色体异常、姐妹染色单体改变、点突变以及细胞死亡,是化学致癌物诱变机理研究中常用的一种模式化合物。
图1 MNNG分子结构
MNNG诱导胃癌建模步骤(仅供参考)
动物:
选取动物时,一般要求其饲养方便,癌诱发率高,目前全世界范围内主要选用大鼠、小鼠、裸鼠等小动物建立模型,选取大动物的一般较少,根据实验结果的各种需要,也有人选取犬、雪貂、旱獭等建立胃癌动物模型。因为大鼠、小鼠等成本低廉,容易饲养,取材方便,而且诱癌周期相对较短,所以在实验研究中常常大批量运用,其中 Wistar 大鼠因为诱癌率较高,常常为首选动物之一。
MNNG配置:
取6 g的MNNG粉末,加入DMSO溶液约30 mL,使其充分溶解配制成20%(w/v)的溶液,再用超纯水定容至浓度为10 mg/mL的母液,置于4℃冰箱避光保存,临用前再取适量母液用超纯水稀释至浓度为100µg/mL。
造模方法:
1、喂养第1周起给予浓度为100 μg/mL MNNG的溶液作为常规饮用水。
2、饲养8周后,用上述饮用水配制粉状饲料替代原来使用的块状饲料喂饲大鼠。
3、24周后仍改用块状饲料喂养,但MNNG水剂改为隔天给予。
4、28周停止给予MNNG饮用水,改用自来水喂养。
检查指标:
1、组织病理检测
2、检测IL-6、IL-1β、TNF-α、VEGF和TGF-β胃癌相关炎症因子
模型优点:
自由饮用操作难度低,性价比高
实验案例
图2 大鼠胃组织的组织病理学检查(放大×200)(引用自:https://doi.org/10.3390/)
实验采用雄性Wistar大鼠,7-8周,口服灌胃MNNG(200 mg/kg BW),周期60天,检测(A) H&E染色切片、(B)caspase 9、(C)Bax和(D)Bcl-2蛋白的IHC染色切片。
相关产品
分类 |
产品名称 |
货号 |
规格 |
胃癌动物建模试剂 |
60397ES03/08 |
1/5 g |
|
其他 |
60524ES60 |
2×100 mL |