支原体检测,快人一步

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2022-05-25

支原体（Mycoplasma）又称霉形体，是目前发现最小、最简单的原核生物，在实验室和生物制品工厂在细胞培养过程中易受到支原体污染，据文献报道：支原体污染在储存细胞系中发生率约为 15%-35%，在生物制药行业中约为0.44%-6.70%^[1]。支原体污染后能导致细胞产生多种变化（见图1），因此如何快速的检测支原体的存在不仅大大降低污染的风险，也能为开发和生产降本增效。

图1：受支原体污染后细胞出现的相关状态的改变

支原体检测应用场景

随着分子生物学技术的迅速发展，基于核酸检测的方法广泛应用于各类实验室检测中。等温扩增技术的反应过程在恒定的温度下进行，通过添加不同活性的酶和特异性引物来达到快速扩增核酸的目的。

支原体检测技术对比

方法	检测原理	所需时间	灵敏度	结果判定	操作简便性
培养法	培养基培养	28d	很高	支原体克隆斑	耗时，繁琐
ELISA法	抗原抗体结合	4h	较高	酶标读值	繁琐，检测类型少
指示细胞法	细胞染色	1.5h左右	一般	荧光观察	适中，具危险性
一步法检测	LAMP等温扩增	1h	高	体系颜色观察	简便
PCR法检测	PCR扩增	数小时	高	扩增条带	适中
Qpcr	定量pcr扩增	3h	很高	Ct值读取	繁琐

与其他的核酸扩增技术相比，LAMP反应只需要把模板、引物、链置换型DNA合成酶、基质等共同置于一定温度下（60~65℃），经一个步骤即可完成，且其扩增效率极高，可在15~60 min内实现10⁹~10¹⁰倍的扩增；而且由于有着高度的特异性，只需很据扩增产物的有无即可对靶基因序列的存在与否做出判断，等温扩增具有快速、高效、特异的优点且无需专用的设备等优势。

图2：LAMP 环介导等温扩增原理示意图

一步法恒温支原体检测

Yeasen一步法恒温支原体检测试剂盒基于LAMP等温扩增技术开发，无需特殊仪器，1h就可通过颜色判定检测结果，在拷贝数提升的情况下反应时间可缩短至30min。检测灵敏度是普通恒温检测的1000倍并添加了防污染组分，杜绝假阳性现象的发生。

产品优势

❖ 快速方便：一步完成操作，60 min获取结果；

❖ 操作简单：无需借助殊仪器，一台水浴锅 or PCR仪；

❖ 肉眼观察：颜色变化差异明显，肉眼即可判别结果；

❖ 检测范围广：精确检测22种支原体，包括常见8种支原体。

图3：一步法支原体检测流程

灵敏度测试结果

已验证对比支原体种类（序列对比结果）

订购信息

类别	产品	货号	规格
检测	MycAway™ -Color One-Step Mycoplasma Detection Kit Hot MycAway™ 一步法快速支原体检测试剂盒	40612ES25/60	25/100 T
	MycAway™ Mycoplasma Real-time qPCR Detection Kit Hot MycAway™ 支原体qPCR检测试剂盒（探针法）	40618ES25/60	25/100 T
	GMyc-PCR Mycoplasma Test Kit GMyc-PCR支原体检测试剂盒	40601ES10/20	10/20 assays
去除	MycAway™ Spray (Ready-to-use) 支原体喷雾剂（即用型）	40605ES02/03	1/2×500 mL
去除	MycAway™ Treatment (1000×)-Mycoplasma Elimination Reagent MycAway™ 支原体去除试剂（1000×）	40607ES03/08	1/5×1 mL
预防	MycAway™Prophylactic (2000×)-Mycoplasma Prevention Reagent MycAway™ 支原体预防试剂（2000×）	40608ES03/08	1/5×1 mL
	MycGuard™ -1 Solution (100×) 细胞培养箱水盘1号消毒卫士（支原体污染预防）	40609ES60	100 mL
	MycGuard™-2 Solution (500×) 水浴锅2号消毒卫士（支原体污染预防）	40610ES60	100 mL