面对突发性、传染性强、不明病因的疾病，需要可靠、快速手段锁定病原。毫无疑问，mNGS将病原一网打尽并在24h内出具报告，成为病原检测的一把利剑。mNGS不需要培养，直接对样本核酸进行高通量测序，能够快速、无偏差的检测临床样本中的全部病原。其检测流程可以分为5个步骤：核酸提取、文库构建、上机测序、生信分析与报告解读。
mNGS检测流程图
翌圣 mNGS湿实验完整解决方案
宏基因组建库性能
主推产品：Hieff NGS® OnePot II DNA Library Prep Kit for Illumina®（Cat#13490）
产品特点：
1）起始兼容广：适用500pg-1μg的gDNA、全长cDNA等样本
2）操作简单：片段化/末修/加A一步完成，建库时间低至3h
3）极低背景：工艺优化，严苛质检，背景菌残留低，特别适合病原建库
产品性能：
1）建库性能：不同批次13490试剂盒，酶切 4℃1min；30℃ 20min；72℃ 20min；4℃ Hold，结果表明，不同类型样本，不同投入量情况下，均能建库成功
表1、不同样本、不同起始量样本文库产出
图1、不同样本、不同起始量样本文库大小
2）背景残留：两个批次13490试剂盒（C、S），小牛胸腺DNA，500 pg、1μg Input 酶切时间20min，14cycles，illumina，PE150，20M reads/样，结果表明，两个批次背景菌残留菌较低，批次间稳定建较好
图2、两个批次试剂500 pg、1μg Input背景菌残留结果
产品详情
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分类 |
产品名称 |
产品编号 |
规格 |
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DNA建库 |
机械法建库 |
12199ES08/ES24/ES96 |
8 T/24 T/96 T |
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13310ES16/ES96 |
16 T/96 T |
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酶切法建库 |
Hieff NGS® OnePot Ⅱ DNA Library Prep Kit for Illumina® |
13490ES08/ES24/ES96 |
8 T/24 T/96 T |
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Hieff NGS® OnePot II DNA Library Prep Kit for MGI® |
13509ES16/ES96 |
16 T/96 T |
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酶切PCR-free建库 |
Hieff NGS® OnePot Pro PCR-Free DNA Library Prep Kit for Illumina® |
12209ES08//ES24/ES96 |
8 T/24 T/96 T |
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转座酶建库 |
12206ES08/ES24/ES96; 12207ES08/ES24/ES96 |
8 T/24 T/96 T; 8 T/24 T/96 T |
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宏转录组建库性能
主推产品：Hieff NGS® Fast RNA Library Prep Kit for Illumina®(Cat#12304)
产品特点：
1) 起始兼容广：10~500 ng RNA建库
2) 极速建库：将传统约3.5h建库时间缩短到3 h
3) 极低背景：工艺优化，严苛质检，背景菌残留低，特别适合病原建库
产品性能：
1）Control为12253+12252（常规RNA建库），不同起始量293 RNA 为样本建库测序，结果表明，不同起始量文库产出、基因表达数量检出均正常
表2、不同起始量RNA文库产出
图3、不同起始量RNA建库基因表达数量
2）不同起始量293 RNA ，illumina，PE150，20M reads，结果表明，大肠残留均较低
图4、不同起始量ENA建库，大肠残留检测
产品详情
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分类 |
产品名称 |
产品编号 |
规格 |
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RNA建库 |
rRNA去除/珠蛋白去除 |
Hieff NGS® One-Step rRNA Removal Kit(Human,100-1,000 ng) |
12258ES08//ES24/ES96 12259ES08//ES24/ES96 12260ES08/ES24/ES96 |
8 T/24 T/96 T; 8 T/24 T/96 T; 8 T/24 T/96 T |
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常规RNA建库 |
Hieff NGS® Ultima Dual-mode RNA Library Prep Kit for Illumina® |
12252ES08/ES24/ES96 |
8 T/24 T/96 T |
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13333ES08//ES24/ES96 |
8 T/24 T/96 T |
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极速RNA建库 |
12304ES08/ES24/ES96 |
8 T/24 T/96 T |
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RNA&DNA共建库性能
主推产品：Hieff NGS® ds-cDNA Synthesis Kit（Cat#13488)
Hieff NGS® OnePot cDNA&gDNA Library Prep Kit（Cat#13502）
产品特点：
1) 起始兼容广：500pg-1μg RNA、DNA均能建库成功
2) 模块自由组合：Cat#13502可进行DNA建库，搭配Cat#13488可进行DNA&RNA共建库，模块灵活搭配，经济便捷
3) 极速建库：3h内完成共建库
产品性能：
1）建库性能
不同起始量标准品RNA、小牛gDNA进行建库测序，500pg-1μg RNA、DNA均能建库成功
表3、不同gDNA投入文库产出
表4、不同RNA投入文库产出
2）背景残留
表5、不同gDNA投入背景残留
表6、不同RNA投入背景残留
产品详情
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分类 |
产品名称 |
产品编号 |
规格 |
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DNA&RNA共建库 |
RNA一、二链合成 |
13488ES08/ES24/ES96 |
8 T/24 T/96 T |
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Illumina&MGI DNA建库 |
13502ES08/ES24/ES96 |
8 T/24 T/96 T |
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tNGS多重扩增试剂
主推产品：Hieff® HG Multiplex PCR Master Mix Library Prep Kit (Cat#13283）
产品特点：
1) 性能优：高均一性、高特异性和高灵敏度
2) GC兼容广：兼容GC含量在25%-70%
3) 性能优：高均一性、高特异性和高灵敏度
4) 操作简洁：预混液包含除引物和DNA模板之外所有组分
产品性能：
YS自设panel 35对GC 70-80；95对GC 27-72.5； 130对GC 27-80，和竞品A、B测序比较，结果显示，GC含量在25%-70%左右基因区域均得到稳定扩增、均一性优于竞品
表7、不同GCpanel扩增测序结果
图5、不同GC覆盖结果
产品详情
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分类 |
产品名称 |
产品编号 |
规格 |
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tNGS（多重PCR）建库 |
扩增Mix |
13283ES03/ES08/ES50/ES60/ES76 |
1 mL/5×1 mL/50 mL/250 mL/500 mL |
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建库必备
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分类 |
产品名称 |
产品编号 |
规格 |
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Hieff NGS® Complete Adapter Kit for Illumina® |
48×4 T/48×16T; 48×4 T/48×16T |
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Hieff NGS® Complete Adapter Kit for MGI® |
8×2 T/8×4 T/8×100 T; 16×2 T/16×4 T/16×100 T; 96×2 T/96×4 T/96×100 T |
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Hieff NGS® 384 CDI Primer for Illumina® |
12413ES02 |
96×2 T; 96×2 T |
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Hieff NGS® Unique Dual Index Primer Kit for MGI® |
13451ES02/ES04; 13452ES02/ES04; 13453ES02/ES04; 13454ES02/ES04; |
48×2 T/48×4 T; 48×2 T/48×4 T; 48×2 T/48×4 T; 48×2 T/48×4 T |
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文库定量 |
Qubit定量 |
1×dsDNA HS Assay Kit for Qubit® |
12642ES60/ES76 |
100 T/500 T |
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dsDNA HS Assay Kit for Qubit® |
12640ES60/ES76 |
100 T/500 T |
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qPCR定量 |
Hieff NGS® Library Quantification Kit for Illumina®, |
12302ES05 |
500 T |
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Hieff NGS® Library Quantification Kit for Illumina®, |
12307ES09 |
6×96 μL |
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磁珠 |
DNA纯化 |
Hieff NGS® DNA Selection Beads |
12601ES03/ES08/ES56/ES75 |
1 mL/5 mL/60 mL/450 mL |
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RNA纯化 |
Hieff NGS® RNA Cleaner |
12602ES03/ES08/ES56/ES75 |
1 mL/5 mL/60 mL/450 mL |
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