反转录是将RNA转录成互补DNA (cDNA) 的过程，该反应由反转录酶介导完成。在有退火引物的情况下，反转录酶首先与 RNA 模板结合。反转酶的RNA依赖性 DNA 聚合酶活性通过掺入反应混合物中的dNTP来合成cDNA，反应生成得到 cDNA:RNA 杂合链，此过程被称为第一链 cDNA 合成。

莫洛尼鼠白血病病毒 (M-MLV) 反转录酶是分子生物学实验流程中常见的反转录酶之一。为了获得更高的反转录效率、更好的热稳定性和更高的 cDNA 合成率，通常会对原始的反转录酶进行基因工程改造。目前市面上的反转录试剂所需要的反转录时间普遍从15分钟到30分钟不等，时间相对较长，当反应样本量较大时，整体花费时间量也会急剧上升。翌圣生物现有的5分钟反转录系列产品，在5分钟内即可完成反转录，省时高效。

快速高效高产反转录预混液(含gDNA去除)(Cat #11155ES)

图. 分别以人293T细胞RNA、拟南芥RNA、鼠肝RNA和鱼肝RNA为模板进行检测。品牌A、品牌B、品牌C及品牌D均为两步消化反转录试剂，反转录时间在15分钟-20分钟不等。测试结果显示，11155ES5分钟反转录结果优异，产量均优于其他品牌，Ct值更小。

5分钟一步消化&反转录预混液(Cat #11151ES)

图. 以人293T细胞RNA为模板，分别检测三种基因。品牌A、品牌B、品牌C均为一步gDNA去除&反转录试剂。测试结果显示，在1 μg和10 ng Total RNA 投入下，11151ES反转录的产量均优于其他品牌，Ct值更小。

图. 以拟南芥RNA为模板，品牌A、品牌B、品牌C均为一步gDNA去除&反转录试剂。测试结果显示，在1 μg和10 ng Total RNA 投入下，11151ES反转录的产量均优于其他品牌，Ct值更小。

图. 以人293T细胞RNA为模板，扩增30%GC、50%GC、60%GC和70%GC的基因。分别投入100 pg、1 ng、10 ng、100 ng、1 μg的Total RNA进行反转录并进行荧光定量检测。结果显示，11151ES可满足100 pg-1 μg RNA的反转录。

5分钟快速反转录试剂盒(11149/11150ES)

图. 以293T细胞总RNA为模板，使用11149ES进行反转录，得到的cDNA 进行qPCR 定量分析。结果显示，RNA 投入量为10 pg-1 μg时，11149ES均可反转成功，保证定量结果。

图. 以293T细胞总RNA为模板，使用11149ES进行反转录，将得到的cDNA进行PCR检测。结果显示，11149ES能够满足合成1 kb-14 kb长度的cDNA, 后续PCR有一定的适用场景。若需要直接反转出10kb以上的片段，建议延长反转录时间至20-30分钟，以保证最终片段的获取。

图. 以293T细胞总RNA为模板，使用11149ES、进口A品牌进行反转录，其中11149ES不进行gDNA去除步骤，将得到的cDNA 进行qPCR 定量分析。结果显示，进口A品牌反转时间为13分钟， 11149ES反转时间为5分钟，不同产物定量显示，11149ES的Ct更小或者接近进口竞品，说明11149ES 5分钟反转效率优于或近似进口A品牌的反转录效率。

图. 以293T细胞总RNA为模板，使用11149ES、进口B品牌进行逆转录，其中11149ES不进行gDNA去除步骤，得到的cDNA 进行qPCR 定量分析。结果显示，进口B品牌反转时间为20分钟，11149ES反转时间为5分钟，不同量底物定量显示，11149ES的Ct更小或者接近进口B品牌，说明11149ES 5分钟反转效率优于或近似进口B品牌的反转录效率。