类器官（organoids）是指利用干细胞、祖细胞、肿瘤细胞等在体外培养出的3D细胞培养物并具有一定的空间结构组织类似物。作为疾病模型，相比于传统2D疾病模型，类器官在阐明疾病的发展、稳态性和发病机理等与体内环境更加接近，在多领域将发挥重要，诸如细胞治疗、药物研发、基因工程、免疫研究、组织再生等领域。
类器官、2D培养、动物研究模型对比【1】
|
项目 |
2D细胞培养 |
3D类器官 |
动物PDX模型 |
|
生理表现 |
有限 |
半生理性 |
具备生理性表现 |
|
血管化和免疫系统 |
无 |
无 |
有 |
|
高通量筛选 |
可以 |
可以 |
否 |
|
可操作性 |
非常方便 |
较方便 |
困难 |
|
生物样本建库 |
可以 |
可以 |
但仅限于细胞水平 |
|
基因可编辑性 |
可以 |
可以 |
需要产生胚胎干细胞 |
|
器官模拟 |
困难 |
用于细胞间通讯、形态发生等研究 |
易被复杂组织环境混淆 |
|
人类发育与疾病模拟 |
较差 |
可以 |
可以 |
类器官制备过程：以肠隐窝类器官制备流程为例
Cebrary®系列类器官培养基是一种无血清的、可应用于建立和支持细胞外基质(extracellular matrixc,ECM)小鼠小肠干细胞来源的类器官的培养，所含特有组分及细胞因子使干细胞或组织在基质胶中迅速生长成类器官，整个过程稳定且迅速，产品不含血清。
组分明确：组分明确，不含血清，含酚红。
安全性高：无有毒有害成分，适合类器官生长。
批次稳定性好：严格生产质检过程保证批次间性能稳定
低内毒素：无菌过滤，内毒素含量<2 EU/ml
污染物检测： 经检测无支原体和细菌、真菌残留
因子活性高：诱导因子活性高，对肠类器官诱导分化效果好。
|
产品类别 |
名称 |
货号 |
规格 |
|
组织细胞消化 |
|||
|
Collagenase V胶原酶V型 |
100mg |
||
|
培养添加物 |
L-丙氨酰-L-谷氨酰胺，200mM |
100/500 mL |
|
|
B-27无血清添加剂,去除维生素A,50X |
10 mL |
||
|
N-2 supplement,serum free N-2无血清添加剂 |
5 mL |
||
|
L-Glutamine L-谷氨酰胺 |
100g |
||
|
培养基系列 |
DMEM/F-12减血清培养基 |
500 mL |
|
|
Cebrary® Intestinal Organoid Growth Medium (Mouse) 小鼠肠类器官生长培养基 |
l00/500mL |
||
|
Cebrary® Intestinal Cancer Organoid Growth Medium (Human) 肠癌类器官生长培养基 |
l00/500mL |
||
|
Cebrary® Gastric Cancer Organoid Growth Medium (Human) 胃癌类器官生长培养基 |
l00/500mL |
||
|
Cebrary® Liver Cancer Organoid Growth Medium (Human) 肝癌类器官生长培养基 |
l00/500mL |
||
|
Cebrary® Breast Cancer Organoid Growth Medium (Human) 乳腺癌类器官生长培养基 |
l00/500mL |
||
|
Cebrary® Lung Cancer Organoid Growth Medium (Human) 肺癌类器官生长培养基 |
l00/500mL |
||
|
Cebrary® Esophageal Cancer Organoid Growth Medium (Human) 食管癌类器官生长培养基 |
l00/500mL |
||
|
Cebrary® Ovarian cancer Organoid Growth Medium (Human) 卵巢癌类器官生长培养基 |
l00/500mL |
||
|
支原体系列 |
支原体预防试剂（2000×） |
1mL |
|
|
支原体去除试剂（1000×） |
1mL |
||
|
GMyc-PCR Mycoplasma Test Kit GMyc-PCR 支原体检测试剂盒 |
10/20 assays |
||
|
MycAway™ Plus-Color One-Step Mycoplasma Detection Kit 一步法快速支原体检测试剂盒 |
25/60T |
基质胶是从富含胞外基质蛋白EHS小鼠肿瘤中提取取的可溶性基底膜制备物，其主要成分由层粘连蛋白，Ⅳ型胶原，硫酸乙酰肝素蛋白聚糖（HSPG）和巢蛋白等组成，还包如TGF-β、EGF、IGF、FGF等多种生长因子。在室温条件下，基质胶聚合形成具有生物学活性的三维基质，能模拟体内细胞基底膜的结构、组成、物理特性和功能，有利于体外细胞的培养和分化。
翌圣生物开发生产的Ceturegel® Matrix LDEV-Free基质胶不含LDEV（乳酸脱氢酶增高病毒），超低内毒素含量，并全部经过支原体检测保证无支原体污染，包括基本浓度、高浓度、低生长因子等不同类型。
安全性高：不含LDEV
浓度多样：浓度范围在8~20 mg/ml之间
批次稳定性好：严格生产质检过程保证批次间性能稳定
低内毒素：内毒素含量＜8EU/ml
污染物检测： 经检测无支原体和细菌、真菌残留
单批产量高：单批产量在50L级别以上
兼容性好：可与任何类型的细胞培养基兼容
|
类型 |
货号 |
产品名称 |
应用方向 |
|
即用型 3-6 mg/ml |
40182 |
Ceturegel® Matrix Ready-to-use，LDEV-Free基质胶 |
适应于细胞培养、贴壁、侵袭和迁移实验以及细胞分化等研究 |
|
基本浓度 8-12 mg/ml |
Ceturegel® Matrix LDEV-Free基质胶 |
适应于2D和3D培养、侵袭和迁移实验，也可以用于体内成瘤实验 |
|
|
Ceturegel® Matrix Phenol Red-Free，LDEV-Free 基质胶 |
主要应用于需要颜色检测如荧光检测实验等 |
||
|
高浓度 ≥18mg/ml |
Ceturegel® Matrix High Concentration，LDEV-Free 基质胶 |
主要应用于如血管生成、凝胶栓塞和体内成瘤实验（对于血管生成建议基质胶终浓度要≥10mg/ml） |
|
|
Ceturegel® Matrix High Concentration，GFR，LDEV-Free 基质胶 |
|||
|
Ceturegel® Matrix High Concentration，Phenol Red-Free，LDEV-Free 基质胶 |
|||
|
低生长因子 |
Ceturegel® Matrix GFR，LDEV-Free 基质胶 |
主要是排除生长因子对实验的干扰。应用于与生长因子、信号通路等相关研究。无酚红的也用来做类器官培养 |
|
|
Ceturegel® Matrix GFR，Phenol Red-Free，LDEV-Free 基质胶 |
|||
|
干细胞用 |
Ceturegel® Matrix hESC-Qualified，LDEV-Free 基质胶 |
主要用于如hESC，iPSC等干细胞培养 |
|
|
类器官用 |
Ceturegel® Matrix for Organoid culture，Phenol Red-Free，LDEV-Free 基质胶 |
类器官培养专用基质胶 |
|
|
鼠尾胶原 |
Collagen, Type I , from rat tail 鼠尾胶原蛋白I（大鼠源） |
侵袭和迁移。培养或分化研究 |
|
|
Cebrary® Collagen, Type I , from mouse tail 鼠尾胶原蛋白I型（小鼠源） |
侵袭和迁移。培养或分化研究 |
介导类器官形成的信号通路与体内器官发育与稳态维持的信号通路相同，在培养过程中需要添加各种细胞因子，以激活或抑制参与类器官形成的信号通路。制备不同的类器官需要使用不同的细胞因子组合。翌圣提供业内最全面的类器官相关因子，涵盖类器官的培养、扩增和分化所需蛋白。因子的高活性、低内毒素和批次间稳定也是类器官实验成功的关键。
1. 生物活性高：每批蛋白都经过相应的生物功能检测。
2. 高纯度：纯度>95%（SDS-PAGE、HPLC）
3. 无标签：具有与天然蛋白一致的序列信息。
4. 低内毒素水平：大部分因子<0.01 EU/μg。
5. 无载体：无BSA，仅含目的蛋白。
6. 产品形态：冻干粉形式，易长期储存。
高生物活性：蛋白的生物活性是衡量蛋白质量好坏的重要指标。
BMP-2诱导ATDC5细胞产生碱性磷酸酶
Rspo1在HEK293T细胞中诱导 beta-catenin激活
表：不同类器官培养对应的细胞因子
|
类器官类型 |
细胞因子 |
|
胃 |
EGF、Noggin、R-spondin 1、Wnt-3a、FGF-4、FGF-10 |
|
肠道 |
EGF、Noggin、R-spondin 1、Wnt-3a、FGF-2 |
|
肝脏 |
EGF、Noggin、R-spondin 1、HGF、FGF-10、FGF-19、BMP-7 |
|
肺 |
Noggin、R-spondin 1、Activin A、FGF-2、FGF-4、FGF-7、FGF-10 |
|
前列腺 |
EGF、Noggin、R-spondin 1、Activin A、FGF-2、FGF-10、NT-3 |
|
胰腺 |
EGF、Noggin、R-spondin 1、Wnt-3a、FGF-10 |
|
脑 |
EGF、Noggin、DKK1、BDNF、GDNF、FGF-2 |
|
乳腺 |
EGF、Noggin、R-spondin 1、Wnt-3a、FGF-2、FGF-10、R-spondin 2、Heregulin β-1 |
|
肾脏 |
BMP-2、BMP-4、BMP-7、FGF-2、FGF-9 |
|
心脏 |
Wnt-3a、Activin A、BMP-4 |
|
视网膜 |
Wnt-3a、SHH |
|
蛋白名称 |
种属 |
货号 |
标签 |
表达系统 |
规格 |
|
Wnt3a |
Human |
Fc |
HEK293 |
100/500 ug |
|
|
R-Spondin 1 |
Human |
None |
CHO |
100/500 ug |
|
|
Mouse |
His |
CHO |
100/500 ug |
||
|
Noggin |
Human |
None |
E.coli |
100/500 ug |
|
|
Mouse |
None |
E.coli |
100/500 ug |
||
|
EGF |
Human |
None |
Yeast |
100/500 ug |
|
|
Mouse |
None |
E.coli |
100/500 ug |
||
|
FGF-2 |
Human |
None |
E.coli |
100/500 ug |
|
|
Mouse |
None |
E.coli |
100/500 ug |
||
|
FGF-4 |
Human |
None |
E.coli |
100/500 ug |
|
|
FGF-7 |
Human |
None |
E.coli |
100/500 ug |
|
|
Mouse |
None |
E.coli |
100/500 ug |
||
|
FGF-9 |
Human |
None |
E.coli |
100/500 ug |
|
|
Mouse |
None |
E.coli |
100/500 ug |
||
|
FGF-10 |
Human |
None |
E.coli |
100/500 ug |
|
|
Mouse |
None |
E.coli |
100/500 ug |
||
|
FGF-19 |
Human |
None |
E.coli |
100/500 ug |
|
|
Activin A |
Human/Mouse/Rat |
None |
E.coli |
100/500 ug |
|
|
BMP-2 |
Human/Mouse/Rat |
None |
E.coli |
100/500 ug |
|
|
BMP-4 |
Human |
None |
E.coli |
100/500 ug |
|
|
Mouse |
His |
E.coli |
100/500 ug |
||
|
BMP-7 |
Human |
None |
E.coli |
100/500 ug |
|
|
DKK-1 |
Human |
His |
HEK293 |
100/500 ug |
|
|
VEGF165 |
Human |
None |
Yeast |
100/500 ug |
|
|
HGF |
Human |
None |
CHO |
100/500 ug |
|
|
GDNF |
Human |
None |
E.coli |
100/500 ug |
|
|
Mouse |
None |
E.coli |
100/500 ug |
||
|
IGF-1 |
Human |
None |
E.coli |
100/500 ug |
|
|
Shh |
Human |
None |
E.coli |
100/500 ug |
|
|
Mouse |
None |
E.coli |
100/500 ug |
||
|
BDNF |
Human |
His |
E.coli |
100/500 ug |
|
|
NRG1 |
Human |
None |
E.coli |
100/500 ug |
|
|
SHH |
Human |
None |
E.coli |
100/500 ug |
|
|
Mouse |
None |
E.coli |
100/500 ug |
小分子化合物是指分子量小于1000 Da（尤其小于500 Da），具有生物学活性的化合物。小分子化合物与细胞因子和蛋白不同，小分子可以透过细胞膜进入细胞，发挥相应的生物学功能。小分子抑制剂/激活剂的作用靶点众多，通过调控信号通路可以影响细胞的增殖、分化和自我更新，已广泛应用于干细胞、类器官、免疫学、神经生物学、表观遗传学、细胞凋亡、离子通道、肿瘤学和信号转导等生命科学中诸多重要的研究领域。
产品纯度高，绝大部分纯度98%以上，部分产品99%以上的纯度
表：不同类器官培养对应的小分子抑制剂/激活剂
|
类器官类型 |
小分子抑制剂和激活剂 |
|
小肠 |
A83-01、Gastrin、Nicotinamide、SB202190、Y27632 |
|
胃 |
A83-01、Gastrin、Nicotinamide、SB202190、Y27632 |
|
肝脏 |
A83-01、DAPT、Forskolin、Gastrin I、Nicotinamide、Y27632、Prostaglandin E2 |
|
肾脏 |
CHIR99021、Retinoic Acid |
|
肺 |
CHIR99021、SB431542 |
|
胰腺 |
A83-01、Gastrin I、Nicotinamide |
|
前列腺 |
A83-01、Nicotinamide、SB202190、Y27632、Prostaglandin E2、Testosterone |
|
乳腺 |
Y27632 |
|
视网膜 |
CHIR99021、Y27632 |
|
内耳 |
A83-01、SB431542 |
|
脑 |
Y27632、MK-2206、GDC-0068、Dorsomorphin |
|
产品名称 |
货号 |
规格 |
产品名称 |
货号 |
规格 |
|
CHIR-99021 |
10 mg |
Wortmannin |
52405ES10 |
10 mg |
|
|
SB-431542 |
10 mg |
Trichostatin A |
51406ES10 |
10 mg |
|
|
LDN193189 (DM-3189) |
10 mg |
5-Azacytidine |
53160ES10 |
10 mg |
|
|
LDN-193189 HCl |
10 mg |
A 83-01 |
53002ES10 |
10 mg |
|
|
DAPT (GSI-IX,LY-374973) |
10 mg |
Nicotinamid |
51402ES10 |
10 mg |
|
|
Y-27632 |
10 mg |
AICAR(Acadesine) |
52401ES10 |
10 mg |
|
|
Y-27632 dihydrochloride |
10 mg |
Cyclopamine |
52913ES10 |
10 mg |
|
|
LY-411575 (LY411575) |
10 mg |
LY294002 |
52403ES10 |
10 mg |
|
|
Valproic acid |
10 mg |
Prostaglandin(PG) E2 |
60810ES10 |
10 mg |
|
|
Repsox |
10 mg |
Sodium Butyrate |
51501ES10 |
10 mg |
|
|
Purmorphamine |
10 mg |
IDE1 |
53234ES10 |
10 mg |
|
|
Retinoic acid |
10 mg |
IDE2 |
53235ES10 |
10 mg |
|
|
Forskolin |
10 mg |
Dorsomorphin dihydrochloride |
53010ES10 |
10 mg |
|
|
IWR-1 |
10 mg |
SB-202190 |
53005ES10 |
10 mg |
|
|
SB 203580 |
10 mg |
活性检测用于测量类器官响应胞外刺激、化学试剂或疗法处理的物理和生理健康情况，或者用于确定细胞培养的最佳生长条件。ATP是细胞内最重要的能量分子，可以用来衡量细胞新陈代谢水平，并与活细胞数目具有良好的线性关系，因此，可通过ATP含量反应活细胞的数目。本试剂盒借ATP依赖的荧光素酶催化的荧光素发光反应，通过化学发光信号测定细胞内 ATP含量，从而检测细胞活力或定量检测活细胞数目，灵敏度高、线性范围宽。本试剂盒兼容少量样品检测以及大量样品的高通量筛选检测。
|
产品名称 |
货号 |
规格 |
产品名称 |
货号 |
规格 |
|
CHIR-99021 |
10 mg |
Wortmannin |
52405ES10 |
10 mg |
|
|
SB-431542 |
10 mg |
Trichostatin A |
51406ES10 |
10 mg |
|
|
LDN193189 (DM-3189) |
10 mg |
5-Azacytidine |
53160ES10 |
10 mg |
|
|
LDN-193189 HCl |
10 mg |
A 83-01 |
53002ES10 |
10 mg |
|
|
DAPT (GSI-IX,LY-374973) |
10 mg |
Nicotinamid |
51402ES10 |
10 mg |
|
|
Y-27632 |
10 mg |
AICAR(Acadesine) |
52401ES10 |
10 mg |
|
|
Y-27632 dihydrochloride |
10 mg |
Cyclopamine |
52913ES10 |
10 mg |
|
|
LY-411575 (LY411575) |
10 mg |
LY294002 |
52403ES10 |
10 mg |
|
|
Valproic acid |
10 mg |
Prostaglandin(PG) E2 |
60810ES10 |
10 mg |
|
|
Repsox |
10 mg |
Sodium Butyrate |
51501ES10 |
10 mg |
|
|
Purmorphamine |
10 mg |
IDE1 |
53234ES10 |
10 mg |
|
|
Retinoic acid |
10 mg |
IDE2 |
53235ES10 |
10 mg |
|
|
Forskolin |
10 mg |
Dorsomorphin dihydrochloride |
53010ES10 |
10 mg |
|
|
IWR-1 |
10 mg |
SB-202190 |
53005ES10 |
10 mg |
|
|
SB 203580 |
10 mg |
图：ATP Luminescent检测原理图
1、操作简单，检测速度快
将试剂与待测样品按照同体积混合反应10min即可上机检测，无需洗涤换液等步骤。
2、检测灵敏度高，线性范围宽
能在10~10万个细胞范围内测定并呈现良好的线性关系。下图是Yeasen产品与国外竞品公司同类产品对比测试。
|
类型 |
产品名称 |
货号 |
规格 |
|
活力检测 |
ATP Luminescent Cell Viability Assay Kit ATP Luminescent 细胞活力检测试剂盒 |
10/100ml
|
|
|
凋亡检测 |
Annexin V-Alexa Fluor 488/PI 细胞凋亡检测试剂盒 |
20/50T |
|
|
Annexin V-FITC/PI 细胞凋亡检测试剂盒 |
20/50T |
||
|
TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(FITC) |
20/50T |
||
|
增殖检测 |
MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒 |
500/1000T |
|
|
免疫分析 |
改进型柠檬酸钠抗原修复液(50X) |
100ml |
|
|
Antibody Dilution Buffer 抗体稀释液 |
10/500 ml |
||
|
Bovine Serum Albumin(BSA),Standard Grade 牛血清白蛋白 |
1/10 ml |
||
|
Normal Goat Serum 正常山羊血清 |
1/10 ml |
||
|
DAPI染液(5mg/ml)DAPI Stain Solution(5mg/ml) |
1 mg |
||
|
Hoechst 33342 染液（1 mg/mL） |
1/10 ml |
||
|
Alexa Fluor 488标记驴抗兔IgG(H+L) |
100µl |
||
|
Alexa Fluor 594标记驴抗兔IgG(H+L) |
100µl |
||
|
Alexa Fluor 594标记山羊抗兔IgG(H+L) |
100µl |
||
|
Alexa Fluor® 488标记山羊抗小鼠IgG(H+L) |
100µl |
||
|
Alexa Fluor 594标记山羊抗小鼠IgG(H+L) |
100µl |
||
|
DyLight 405™标记链霉亲和素 |
100µl |
||
|
Alexa Fluor® 488标记链霉亲和素 |
100µl |
||
|
Alexa Fluor® 647标记链霉亲和素 |
100µl |
||
|
Alexa Fluor® 594标记链霉亲和素 |
100µl |
||
|
Fluoromount-G™抗荧光淬灭封片剂(水溶性) |
5/25 mL |
||
|
DAPI Fluoromount-G™ 抗荧光淬灭封片剂(含DAPI,水溶性) |
4/20 mL |
||
|
测序分析 |
Hieff NGS® Single Cell/Low Input cDNA Synthesis & Amplification Module 单细胞/低投入量cDNA合成及扩增模块 |
||
|
Hieff NGS® Single Cell/Low Input RNA Library Prep Kit 单细胞/低投入量RNA建库试剂盒 |
|||
|
Hieff NGS® Fast Tagment DNA Library Prep Kit for Illumina® (for 1 ng) |
12206ES24/96 |
||
|
Hieff NGS® DNA Selection Beads DNA分选磁珠 |
1/5 ml |
||
|
类器官传代与保存 |
Cebrary®Cell recovery solution for Organoid类器官回收液 |
30/100 mL |
|
|
Cebrary®Cell freezing medium for Organoid 类器官冻存液 |
30/100 mL |
【1】Li, Mo; Izpisua Belmonte, Juan C. (2019). Organoids — Preclinical Models of Human Disease. New England Journal of Medicine, 380(6), 569–579.
