产品描述

 

台盼蓝(Trypan Blue)，一种偶氮、亲水性酸性蓝色染料，可透过死亡细胞和垂死细胞的细胞膜，将其染成蓝色，而活 细胞由于其细胞膜的完整性， 可将台盼蓝排斥在外， 因此， 通过颜色的变化即可将活细胞(活细胞呈透明无色) 和死细胞鉴 别开来， 基于此原理， 本品广泛用于细胞活性水平的常规评估。台盼蓝还可染色胶原和淀粉样蛋白。台盼蓝与蛋白结合形成 的复合物可发出红色荧光。另外，台盼蓝(合适浓度)还常用来淬灭细胞表面的自荧光或者其他荧光信号。

本试剂盒各组分均以无菌形式提供， 可直接用于细胞实验。按照单次使用量 0.1mL，40208ES60 和 40208ES76 分别可供 检测 100 次和 500 次。

 

产品组分

 

组分编号	组分名称	产品编号/规格
		40208ES60/100T	40208ES76/500T
40208-A	细胞重悬液  Cell Dilution Buffer	100 mL	250 mL×2
40208-B	2×台盼蓝染液  2×Typan Blue Stain	10 mL	50 mL

 

 

运输和保存方法

 

室温运输和保存即可，二年有效。

 

注意事项

 

1) 细胞计数前需对细胞进行充分的清洗， 因为细胞对血清蛋白具有非常高的亲和力， 残留血清蛋白会导致较暗的染色背景。 2)台盼蓝对人体有害，请注意小心防护。

3)为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

使用方法

 

1)对于悬浮细胞，离心收集细胞，对其充分清洗后，加入适量细胞重悬液重悬细胞制成单细胞悬液；对于贴壁细胞，先用 胰酶消化细胞，再按照悬浮细胞的方法制备单细胞悬液。

2)取 0.1 mL 单细胞悬液，按照 1:1 比例与 0.1 mL 0.4%台盼蓝染色液充分混匀，室温染色 3~10 min。

 3) 取少量上述染色细胞加入血细胞计数板， 于显微镜低倍镜下计数， 分别计算着色细胞(即损伤细胞和死细胞) 和总细胞。 【注 1】：用移液枪加染色细胞时，沿着盖玻片的边缘轻轻加液使其完全覆盖住整个小室。不可过量加液或者不足量。   【注 2】： 1 mm2 方格内细胞数通常控制在 20-50 cells，当细胞数超过 200 个，需重新调整稀释倍数。

4)按照以下公式来计算细胞数目和活细胞百分比，

a，计算每 mL 细胞数目： Cells/mL=1 mm2 大方格内的平均细胞数×稀释倍数×104；

【注】：此时的稀释倍数为：步骤 2 所取的单细胞悬液与台盼蓝染色液混合后的稀释倍数

b ，总细胞数目： Total cells=  (Cells/mL) ×最初制备单细胞悬液的总体积

c，细胞活力值： Viability  (%) =  (总细胞数-总着色细胞数) /总细胞数×100

【注】：通常情况，健康的对数期培养细胞，活细胞至少占到 95%。

HB220505