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Recombinant Ten-Eleven Translocase 2.0(TET2.0, with buffer)是翌圣生物科技(上海)股份有限公司开发的一款高效用于甲基化位点转化的单酶。可以将甲基化的胞嘧啶(5mC)特异性地转化成尿嘧啶(U)。最终通过PCR可以高效特异性地将甲基化的胞嘧啶(5mC)转变成胸腺嘧啶(T),通过C>T突变来实现单碱基分辨率和高准确性的DNA甲基化正向筛选和鉴定,适用于10-100 ng起始量的DNA样本。
1. 对DNA破坏性小,可以保留10kb的DNA片段。
2. 由于是将甲基化的C转变为T,因此对DNA序列的碱基平衡影响极小,下机数据质量提高,可同时检测基因突变。
3.转化后可用普通建库试剂盒建库。

图1:TET2.0的氧化效率:293T gDNA 样本中掺入1% 甲基化pUC19 DNA,样本打断后分别以10ng和100ng进行TET酶氧化,再经还原剂还原,还原的产物采用磁珠(Cat#12601)进行纯化,对纯化产物进行建库和测序,分析pUC19 DNA 5mC被转化的情况, 结果显示:10ng样本投入量的氧化效率>89%,100ng样本投入量的氧化效率>90%。

图2:样本完整度分析:取完整的gDNA,一组未处理,另一组经TET2.0酶氧化和还原剂还原,还原的产物采用磁珠(Cat#12601)进行纯化,对纯化产物进行琼脂糖凝胶电泳,结果显示:TET酶处理组与未处理组条带大小几乎不变,说明TET酶对样本几乎没有损伤。
-25~-15℃保存,有效期1年。
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