Hieff NGS^® dsDNA Methyl Library Prep Kit for Illumina^®是针对Illumina^®高通量测序平台开发的双链DNA甲基化建库试剂盒。本试剂盒通过连接相应的甲基化接头，经亚硫酸氢盐或酶法转化处理，再经过一步扩增即可构建针对Illumina^®平台测序的甲基化文库。试剂盒所有组分均通过质量控制和功能验证，以确保文库的稳定产出，支持多种类型DNA样本，包括gDNA、cfDNA和FFPE等。本试剂盒推荐的样本起始量为10 ng-1000 ng DNA，并兼容市面主流的转化方案。

 

组分信息

组分编号		组分名称	12214ES08	12214ES24	12214ES96
12214-A		Endprep Buffer	56 μL	168 μL	672 μL
12214-B		Endprep Enzyme	24 μL	72 μL	288 μL
12214-C		Ligation Enhancer	240 μL	720 μL	3×960 μL
12214-D		Rapid T4 DNA Ligase	80 μL	240 μL	960 μL
12214-E		Methyl Stubby Adapter	40 μL	120 μL	480 μL
12214-F		2 × Canace® Uracil + PCR Mix 2.0	200 μL	600 μL	2×1200 μL

 

储存条件

-25~-15℃保存，有效期1年。

使用方法

一、自备材料

1. 纯化磁珠：Cat#12601，Hieff NGS^® DNA Selection Beads或Cat#A63880，AMPure XP Beads或其他等效产品。
2. 转化模块：Cat#12222，Hieff^® DNA Bisulfite Conversion Kit；Cat#12223，Hieff^® Mag DNA Methylation Bisulfite Kit和酶转化模块Cat#12213，Hieff^® DNA Mild methyl- Conversion Kit或其他等效产品。
3. DNA质控：Agilent Technologies 2100 Bioanalyzer或其他等效产品。
4. 其他材料：无水乙醇、灭菌超纯水、TE Buffer (10 mM Tris-HCl，pH 8.0-8.5+1 mM EDTA)、低吸附EP管、PCR管、磁

力架、PCR仪等。

 

二、操作流程

 图1 Hieff NGS^® dsDNA Methyl Library Prep Kit for Illumina^®

 

  图2 文库片段分布示例

 

注：10 ng cfDNA使用Hieff NGS^® dsDNA Methyl Library Prep Kit for Illumina^®建库后的文库片段分布 (Agilent 2100,DNA 1000 Kit)，其中红色代表酶转化方案构建的DNA文库，PCR扩增循环数为10；蓝色代表重亚硫酸盐转化方案构建的DNA文库，PCR 扩增循环数为 12。