产品简介

 

Cebrary® Intestinal Cancer Organoid Growth Medium（Human）肠癌类器官生长培养基是一种无血清可应用于细胞或组织来源的肠癌类器官的建立和长期培养过程，在细胞外基质存在的条件下，培养基所含特有组分及丰富的细胞因子能促使肠癌细胞迅速生长成并形成肠癌类器官，类器官形成过程平稳且迅速，同时保持较高的肠癌细胞特性和活力，为后续基于肠癌类器官的生理功能、疾病研究和精准医学提供支持。

 

组分信息

 

组分编号	组分名称	41427ES10	41427ES50	41427ES60	41427ES76
41427-A	Intestinal Cancer Organoid Growth Medium（Human）肠癌类器官生长培养基	9 mL	45 mL	90 mL	450 mL
41427-B	Nutritional components 1（10×）营养组分1（10×）	1 mL	5 mL	10 mL	50 mL

 

储存条件

 

-25℃ ~ -15℃储存，有效期1年；2-8℃储存，有效期1月。

 

使用说明

 

产品应用

无菌操作条件下配制肠癌类器官完全培养基。以下是准备100 mL完全培养基操作流程，如所需量不同，可相应调整用量。

1. 将营养组分1室温解冻或者2 - 8℃过夜缓融。避免反复冻融，现配现融；

2. 将基础培养基90 mL冰箱取出恢复至室温；

3. 将10 mL营养组分1加入到基础培养基内，均匀混合；如暂不使用，短时2 - 8℃储存。

4. 使用时可加入1%双抗使用。

 

人源肠癌原代培养

1. 取材：标本离体后，尽快取材。采用无菌器械，保证无菌环境，将肿瘤组织放入含有5 mL的原代组织保存液的15 mL离心管中，4℃转运。
2.  清洗：在生物安全柜中取出样品管，去除组织保存液，加入适量冷的添加有双抗的 PBS，反复清洗后，去除 PBS。
3. 重复清洗：重复第 2 步骤 3 次。
4. 组织处理：去除PBS缓冲液后，将组织块移至10 cm含10 mL冷原代组织保存液的无菌培养皿中，用无菌眼科显微剪将组织剪碎（直径约0.5 mm-1 mm）。
5. 重复清洗：使用常温PBS，重复清洗3次。
6. 收集组织碎片，加入组织消化液消化20 - 30 min，反复吹打后过70 μm筛网，收集肠癌细胞，如果细胞较少，可重复1次。
7. 红细胞裂解：加入10 mL红细胞裂解缓冲液，室温下在翘板摇床上摇10 min。
8. 重复清洗：裂解完毕，使用常温DMEM/F12，重复第2步骤3次。
9. 类器官种板：调整细胞密度为2 - 3×10⁶，与基质胶1：1均匀混合，将细胞混悬液以40 - 60 μL每孔种在24孔板中，37℃放置15 - 30 min，加入预热的类器官培养液，每个孔750 μL。
10. 类器官培养：将培养板放在37℃，CO²培养箱培养。每2天更换培养液。加入培养液时，吸头朝向侧壁，缓慢加入。
11. 类器官观察：每天观察类器官并拍照，了解初始类器官数量、增殖速度、形态、微生物污染情况等。

 

注意事项

 

1. 本产品仅作科研用途。

2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

3. 产品的分装、使用等操作需在无菌环境下进行。

 

 

 

Ver.CN20250213