推荐应用
萤火虫萤光素酶(Firefly luciferase)是一种分子量约为61 kDa的蛋白,在ATP、镁离子和氧气存在的条件下,能够催化萤光素(luciferin)氧化成oxyluciferin,在氧化的过程中会发出波长为560 nm左右的生物荧光。海肾萤光素酶(Renilla luciferase)是一种分子量约为36 kDa的蛋白,在氧气存在的条件下,可以催化腔肠素(coelenterazine)氧化成coelenteramide,在氧化的过程中会发出波长为480nm左右的生物荧光。两种生物荧光都可通过化学发光仪进行测定。检测原理如图所示:

图1:萤火虫和海肾萤光素酶检测原理图
Dual One Step Luciferase Reporter Gene Assay Kit是一种辉光型双萤光素酶报告基因检测试剂盒,具有高灵敏度和发光信号稳定的特点。本试剂盒中含有高纯度的萤火虫萤光素和腔肠素,在同一个样品中先以萤火虫萤光素为底物检测萤火虫萤光素酶,后淬灭萤火虫萤光素酶的萤光信号,并同时以腔肠素为底物检测海肾萤光素酶,实现双萤光素酶报告基因检测。海肾萤光素酶作为内参,消除了因孔间细胞数量、转染效率不同等造成的影响,使得检测结果的准确性更高。
相对于闪光型Dual Luciferase Reporter Gene Assay Kit(Cat NO.11402ES),本品具有以下优点:1)发光信号更稳定性,为实验设计提供了更大的灵活性。2)更符合高通量检测,无需依赖自动进样器,并且无需弃培养液、离心等步骤,大大的简化了实验流程。3)无明显刺激性气味。本试剂盒可用于多种常用细胞培养液:RPMI 1640、DMEM 、MEM-α、F12、DMEM/F12等,其半衰期均为2h左右(22℃),满足绝大多数高通量实验需求。
信号稳定:半衰期长(达2h),非常适用于高通量检测,不用担心萤光信号淬灭的问题。
操作简便:只需要加样-读值,即可完成实验。
兼容性好:可用于多种常用细胞培养液,如RPMI 1640、DMEM 、MEM-α、F12、DMEM/F12等。
荧光强度和稳定性媲美进口品牌

Yeasen(货号:11405)荧光强度和稳定性与P进口品牌相当。
淬灭效果与进口品牌相当

Yeasen(货号:11405)检测试剂和萤光素酶相互作用,可获得较佳的发光强度,加入海肾萤光素酶底物后,萤火虫萤光素发光淬灭情况,淬灭效果与P进口品牌相当。
在不同培养基上能正常发光,且发光效果差异小于P进口公司

Yeasen(货号:11405)在常用培养基:DMEM、F12、MEMα、RPMI-1640中都可以正常发光,并且不同培养基中的发光效果差异小于P进口公司。
-25~-15℃保存,有效期1年。
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