产品说明书
FAQ
COA
已发表文献
产品描述
本试剂采用独特的裂解缓冲液体系，可以快速使细胞裂解，释放出萤光素酶。在ATP、镁离子和氧气存在的条件下，释放出的萤火虫萤光素酶（Firefly luciferase）能够催化萤光素（luciferin）氧化成oxyluciferin，在luciferin氧化的过程中会发出波长为560 nm左右的生物荧光，该萤光可通过化学发光仪进行测定。检测原理如图所示：
图1：萤火虫萤光素酶检测原理图
产品组分
|
组分编号 |
组分名称 |
产品编号/规格 |
|
|
11406ES60（100 T） |
11406ES76（500 T） |
||
|
11406-A |
细胞裂解液 |
2×30 mL |
10×30 mL |
运输与保存方式
干冰运输。-20℃保存，有效期1年。
注意事项
1）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
2）本产品仅作科研用途！
实验步骤
1.细胞
1）将细胞裂解液充分混匀，按如下方式加入细胞裂解液，充分裂解细胞。
a: 对于贴壁细胞，吸尽细胞培养液，按照下表比例加入细胞裂解液，轻轻旋转培养皿或者培养板使裂解液完全覆盖细胞；
b: 对于悬浮细胞，离心弃去上清，按照下表比例加入裂解液。
|
细胞培养板 |
96孔板 |
48孔板 |
24孔板 |
12孔板 |
6孔板 |
|
裂解液加入量 |
100 μL |
150 μL |
200 μL |
300 μL |
μL |
2）冰上孵育5 min，充分裂解细胞。
3）用于荧光检测或保存。
【注】：裂解产物可室温保存6 h，4℃保存16 h，-80℃可长期存放（裂解产物不能多次反复冻融）。
2.叶片组织（以烟草叶片为例，仅供参考）
1）取3-4片直径为6-8 mm的处理好的烟草叶盘，放入2 mL的 EP 管（提前放入3-4个小钢珠）中，液氮中冷冻，使用破碎仪进行研磨破碎（45 Hz，30 s）。破碎完全后在EP管中加入100 μL裂解液。
8）冰上孵育5 min左右，充分裂解叶片。
9）10000-16000 rpm离心1 min，取上清进行荧光检测或保存。
【注】：裂解产物可室温保存6 h，4℃保存16 h，-80℃可长期存放（裂解产物不能多次反复冻融）。
3.原生质体（仅供参考）
1）将重悬后的原生质体离心收集至2 mL离心管中，加入100 μL左右的裂解液。
2）冰上孵育5 min左右，充分裂解原生质体。
3）用于荧光检测或保存。
【注】：裂解产物可室温保存6 h，4℃保存16 h，-80℃可长期存放（裂解产物不能多次反复冻融）。
相关产品
|
产品名称 |
货号 |
规格 |
|
Firefly Glo Luciferase Reporter Gene Assay Kit辉光型萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒 |
11404ES60/80 |
100/1000 T |
|
Dual Glo Luciferase Reporter Gene Assay Kit 辉光型双萤光素酶报告基因检测试剂盒 |
11405ES60/80 |
100/1000 T |
|
11401ES60/76/80 |
100/500/1000 T |
|
|
pGM-CMV Luciferase Reporter Plasmid Positive Control pGM-CMV-Luc荧光素酶报告基因质粒阳性对照 |
11556ES03 |
1 μg |
|
Luciferase Reporter Plasmid negative control （荧光素酶报告基因质粒阴性对照） |
11555ES03 |
1 μg |
|
11557ES03 |
1 μg |
|
|
pGMLR-CMV Luciferase Reporter Plasmid（pGMLR-CMV海肾荧光素酶报告基因质粒） |
11558ES03 |
1 μg |
|
40802ES03 |
1 mL |
HB220325
