缓冲液是维持生物体系pH稳定的核心试剂，在分子生物学、细胞生物学及生物化学实验中承担着维持蛋白质结构完整性、保障酶活性和稳定核酸分子的关键作用。其中，Tris-HCl（三羟甲基氨基甲烷盐酸盐）缓冲液因其优异的缓冲能力、低毒性、高水溶性及与多种生物分子的良好相容性，已成为实验室最通用、最核心的缓冲体系之一。

一、基本信息

中文全称：三(羟甲基)氨基甲烷盐酸盐

英文全称：Tris (hydroxymethyl) aminomethane hydrochloride

英文缩写：Tris-HCl

分子式：C4H12NO3·HCl

CAS号：1185-53-1

作用原理：Tris-HCl缓冲液由Tris与HCl形成Tris/Tris-H+共轭酸碱对，依靠氨基的可逆质子化与去质子化实现pH稳定。体系加酸时，游离Tris结合过量H⁺；加碱时，质子化的Tris-H⁺释放H⁺，可有效维持中性至弱碱性生化实验体系的pH稳定。

二、特点

1.缓冲能力强：在pH 7.0-9.0范围内具有较强的缓冲能力。

2.理化性质优：极易溶于水，配制简单，化学惰性，不与钙、镁及重金属离子发生沉淀。

3.生物兼容性好：对多数酶、蛋白、核酸等作用温和，适合大多数生物化学实验过程。

4.温度敏感：温度每降低1℃，pH大约升高0.03。

Tris-HCl缓冲液与PBS缓冲液对比

	Tris-HCl缓冲液	PBS缓冲液
缓冲体系	Tris+HCl	Na₂HPO₄+KH₂PO₄+NaCl+KCl
pH范围	7.0–9.0（常用7.5–8.8）	固定7.2–7.4（生理pH）
pKa（25℃）	≈8.1	≈7.2
温度敏感性	敏感（ΔpKa/℃≈-0.03）	相对稳定
金属兼容性	惰性强可按需补充金属离子维持体系活性	易沉淀易形成磷酸盐沉淀或降低游离金属活度
常见干扰	伯氨基可能与NHS酯、活化基团反应	磷酸根抑制部分磷酸酶、干扰磷酸化研究
优先选择的应用场景	蛋白电泳、蛋白纯化、核酸实验、酶活测定及需精确控制pH 7.5–8.5的生化反应	细胞培养、组织/切片冲洗、免疫组化/荧光、原位杂交、需模拟生理渗透压的体外实验和对磷酸根无干扰的常规缓冲场景

三、应用场景

生物化学实验

1.核酸/蛋白电泳：作为TAE、TBE电泳缓冲液核心组分，广泛用于DNA、RNA、蛋白电泳。

2.蛋白免疫检测：用于Western blot转膜、洗涤及抗体孵育全流程，同时适配ELISA等其他免疫检测实验的反应与洗涤环节。

3.样品制备：细胞裂解、核酸/蛋白提取、蛋白纯化与层析等样品前处理环节，维持生物大分子的结构与活性稳定。

4.酶促反应：为限制性内切酶酶切、PCR扩增、体外转录、蛋白修饰等各类生化反应，提供稳定的中性-弱碱性pH环境，保障酶活性与反应效率。

生物医药

1.生产应用：可作为缓冲体系用于生物制剂的生产、储存与运输，稳定体系pH，同时作为重要医药中间体，其参与多种药物的制备与复配。

2.临床应用：可用于纠正代谢性酸中毒与呼吸性酸中毒等血液酸碱失衡相关病症。

四、配制方法

（以配制1 L的1 M Tris-HCl为例）

1.计算Tris用量

所需Tris的用量=1 mol/L×1 L×121.14 g/mol=121.14 g，即需称取121.1 g Tris

2.溶解Tris

将称好的Tris加入烧杯中，并加入800 mL去离子水搅拌至完全溶解

3.调节pH值

向溶解完全的Tris溶液中，逐滴加入浓HCl调至目标pH（注：边加边搅拌，具体量以pH计为准）

4.定容

将溶液转移至1 L容量瓶，并定容至1 L刻度线，混匀后，再次使用pH计确认pH值。

5.保存

室温/4℃保存，避免吸收CO2，长期保存建议分装。

自配Tris-HCl缓冲液所需相关产品详情见下表

产品货号	产品名称	产品特点
60102ES	Tris Base 三（羟甲基）氨基甲烷	粉末型，配制灵活
60113ES	Tris-HCl 三（羟甲基）氨基甲烷盐酸盐（超纯）	粉末型，pH 4.2-4.9，配制便捷
60168ES	Sterile Deionized Water (PCR Grade) 无菌去离子水（PCR级）	即用型，0.1 μm过滤除菌，不含RNase和DNase

另外，我司提供即用型Tris-HCl缓冲液系列产品，相关产品详情见下表

产品货号	产品名称	产品特点	常见应用场景
60156ES	1 M Tris-HCl Buffer (pH 6.8) 1 M Tris-HCl 缓冲液（pH 6.8）	液体型，开瓶即用	配制SDS-PAGE浓缩胶或native PAGE的上层胶，及其它实验试剂配制
60177ES	1 M Tris-HCl Buffer (pH 6.8, Sterile) 1 M Tris-HCl 缓冲液（pH 6.8，无菌）	液体型，开瓶即用，无菌	配制SDS-PAGE浓缩胶或native PAGE的上层胶，及其它实验试剂配制
60178ES	1 M Tris-HCl Buffer (pH 7.6, Sterile) 1 M Tris-HCl 缓冲液（pH 7.6，无菌）		偏生理pH，可用于对磷酸根敏感的实验和作为中性抗原修复液
60179ES	1 M Tris-HCl Buffer (pH 8.0, Sterile) 1 M Tris-HCl 缓冲液（pH 8.0，无菌）		分子生物学中最常用，可配制TE缓冲液，适合核酸样品长期储存、核酸提取后重悬和各种核酸酶反应缓冲液，以及His-tag 蛋白镍柱纯化等
60180ES	1 M Tris-HCl Buffer (pH 8.8, Sterile) 1 M Tris-HCl 缓冲液（pH 8.8，无菌）		配制SDS-PCR、qPCR、NGS文库构建等下游分析前的样品准备PAGE分离胶或native PAGE的下层胶，及其它实验试剂配制
60181ES	1.5 M Tris-HCl Buffer (pH 8.8, Sterile) 1.5 M Tris-HCl 缓冲液（pH 8.8，无菌）
60172ES	1 M Tris-HCl Buffer (pH 8.5,Sterile,DNase free) 1 M Tris-HCl缓冲液（pH 8.5,无菌,无DNA酶）	液体型，开瓶即用，无菌，无DNA酶	要求无DNA酶污染的生化、分子生物学等实验，也可用于要求无菌的细胞培养等相关溶液的配制

五、常见问题

Q1：Tris和Tris Base是同一种物质吗？

A1：是的，Tris水溶液显碱性，故而也被叫做Tris Base。

Q2：Tris浓度越高，缓冲能力越强吗？

A2：缓冲能力核心取决于pH与pKa的匹配度，pH=pKa时缓冲能力最强；过高浓度的Tris会带来高渗透压、细胞毒性、酶活抑制。

更多缓冲液产品详情见官网：实验室常用水溶液及细胞培养试剂选购指南