2×Hieff UNICON^® HotStart PCR Master Mix (No Dye)是即用型的PCR预混合溶液，含有Hieff UNICON^® HotStart Taq DNA Polymerase，dNTP以及优化的缓冲体系，只需加入引物和模板即可进行扩增，大大简化了实验的操作步骤，可以高通量操作并提高实验结果的重现性。Hieff UNICON^® HotStart DNA Polymerase 的激活时间只需要2-3 min，兼容现有的 PCR 程序。本产品防止了在样品准备阶段产生非特异扩增，可以有效地进行基因克隆和分型实验。PCR产物具有3’-dA突出端，可轻松克隆至T载体。预混液中不含染料。

产品应用

低拷贝基因扩增、基因型鉴定、菌落PCR

运输与保存方法

冰袋运输。-20℃保存，有效期2年。

注意事项

1）为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
2）本产品仅作科研用途！

PCR反应体系（50 μL）

组分	体积	终浓度
ddH2O	to 50 μL	-
模板DNA	适量	-
Primer正向 (10 μM)	2 μL	0.4 μM
Primer反向 (10 μM)	2 μL	0.4 μM
2×Hieff UNICON® HotStart PCR Master Mix（No Dye）	25 μL	1×

【注】：针对不同模板的最佳反应浓度有所不同，下表为50 μL反应体系推荐模板使用量，仅供参考。

模板种类	模板使用量
基因组DNA	50 ng-200 ng
质粒DNA	100 pg-20 ng
cDNA	1-5 μL (不超过反应体系的1/10)

PCR扩增程序
 

循环步骤	温度	时间	循环数
预变性	95℃	5 min	1
变性	95℃	30 sec	35
退火	50-60℃	30 sec
延伸	72℃	30 sec/kb
终延伸	72℃	10 min	1

【注】：1）退火温度和时间：温度推荐使用50-60℃。退火温度过低会导致非特异性扩增。引物设计参考荧光定量引物标准。推荐退火时间设置为30 sec，可以在10-30 sec内调节。退火时间太长可能导致扩增产物在胶上呈弥散状。也可根据需要，设立温度梯度去摸索引物退火的最适温度和时间。
2）延伸温度和时间：温度推荐使用72℃。时间推荐使用30 sec/kb。
3）扩增产物：请将PCR扩增产物放置于-20℃保存，防止DNA发生降解。
 

相关产品

产品名称	货号	规格
2×Hieff UNICON® HotStart PCR Master Mix (with dye)	10732ES03	1 mL
2×Hieff UNICON® HotStart PCR Master Mix (with dye)	10732ES08	5×1 mL

HB210831