2×Hieff^® Ultra-Rapid HotStart PCR Master Mix (with Dye)基于改造的Taq DNA Polymerase，添加强力延伸因子、扩增增强因子以及优化的缓冲体系，具有超高的扩增效率。3 kb以内基因组等复杂模板扩增速度可达1-3 sec/kb，5 kb以内质粒等简单模板扩增速度可达1 sec/kb，本产品可大幅节省PCR反应时间。同时，Mix中含有dNTP、Mg²⁺，使用时只需加入引物和模板即可进行扩增，也大大简化了实验的操作步骤。此外，Mix中含有电泳指示染料，可在反应结束后直接进行电泳，使用方便。体系中加入的保护剂使得本产品经过反复冻融后仍可保持稳定的活性。PCR产物的3’端带A，可轻松克隆至T载体。

 

储存条件

-25~-15℃保存，有效期2年。

 

使用说明

组分	体积 (μL)		循环步骤	温度 (°C)	时间	循环数
模板DNA*	适量		预变性	94	3 min	1
Primer正向 (10 μM)	2.5		变性	94	10 sec	28-35
Primer反向 (10 μM）	2.5		退火***	60	20 sec
2×Hieff® Ultra-Rapid HotStart PCR Master Mix (with Dye)**	25		延伸****	72	1-10 sec/kb
ddH2O	to 50		终延伸	72	5 min	1
表1 扩增体系（50 μL）			表2 扩增条件

*不同模板的推荐使用量：

模板种类	片段使用量范围（50 μL反应体系）
基因组DNA或大肠杆菌菌液	10–1,000 ng
质粒或病毒DNA	0.5-50 ng
cDNA	1-5 µL(不超过PCR反应总体积的1/10)

表3 不同模板的推荐使用量

**试剂使用：使用前要充分解冻混匀。

***退火温度：退火温度为通用Tm值，也可设置低于引物Tm值1-2℃。

****延伸速度：1 kb以内的基因组、大肠杆菌等复杂模板可设置1 sec/kb，1-3 kb基因组、大肠杆菌等复杂模板可设置3 sec/kb，3 kb以上基因组、大肠杆菌等复杂模板可设置10 sec/kb。5 kb以内的质粒等简单模板可设置1 sec/kb，5-10 kb质粒等简单模板可设置5 sec/kb，10 kb以上质粒等简单模板可设置10 sec/kb。

 

注意事项

1.为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

2.本产品仅作科研用途！

 

Ver.CN20230822