产品简介

Cell and Tissue Lysis Buffer for Nitric Oxide Assay 细胞与组织裂解液(一氧化氮检测用) 是一种专门用于一氧化氮或总一氧化氮检测的细胞与组织裂解液。使用该产品裂解的样品，可以用于一氧化氮检测试剂盒和总一氧化氮检测试剂盒（50107ES）的检测。
   经过该产品的裂解，样品中包含了细胞或组织样品中的大部分蛋白，可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒(20200ES/20201ES)测定蛋白浓度，并可以用于SDS-PAGE和Western印迹检测。需要注意的是本产品不含蛋白酶和磷酸酯酶的抑制剂，如添加蛋白酶和磷酸酯酶抑制剂可能会干扰后续的一氧化氮检测。
   本产品可反复冻融，如果用于培养于六孔板中一个孔的细胞的裂解，或者用于20 mg组织的裂解液，可以裂解约500-1000个样品。

 

产品信息

货号	60734ES60
规格	100 mL
外观	液体

 

使用方法

1. 对于培养的细胞样品

1. 轻摇混匀细胞与组织裂解液。
   2) 贴壁细胞：去除培养液，用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍。按照6孔板每孔加入100-200 μL裂解液。用枪吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1-2秒后，细胞就会被裂解。
   3) 对于悬浮细胞：离心收集细胞，用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞加入100-200 μL裂解液，再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多，需分装成50-100万细胞/管，然后再裂解。大团的细胞较难裂解充分，而少量的细胞由于裂解液容易和细胞充分接触，相对比较容易裂解充分。
   4) 充分裂解后：10000-14000g离心3-5 min，取上清，即可进行后续的一氧化氮检或蛋白浓度测定等操作。样品制备后如果当日不能完成一氧化氮检测，可以-25~-15℃保存，但仍宜尽快完成检测。
   5) 裂解液用量说明：通常6孔板每孔细胞加入100 μL裂解液已经足够，但如果细胞密度非常高可以适当加大裂解液的用量到150 μL或200 μL。
   2. 对于组织样品
   1）轻摇混匀细胞与组织裂解液。
   2）把组织剪切成细小的碎片。
   3）按照每20 mg组织加入100-200 μL裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液，如果需要高浓度的样品，可以适当减少裂解液的用量。)
   4）用玻璃匀浆器或其它适当的匀浆设备匀浆，直至充分裂解。(如果组织样品本身非常细小，加入裂解液后可以直接通过强烈vortex使样品裂解充分。直接裂解的优点是比较方便，不必使用匀浆设备，缺点是不如使用匀浆设备那样裂解得比较充分。)
   5）充分裂解后，10000-14000g离心3-5 min，取上清，即可进行后续的一氧化氮检或蛋白浓度测定等操作。样品制备后如果当日不能完成一氧化氮检测，可以-25~-15℃保存，但仍宜尽快完成检测。

 

储存条件

-25~-15℃保存，有效期1年。

 

注意事项  

1. 裂解样品的所有步骤需在冰上或2~8℃进行。
2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
3. 本产品仅用于科研用途，禁止用于人身上。

Ver.CN20240407