心血管研究抗体应用--血管内皮细胞功能紊乱与血管病变机制研究
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2026-08-28
血管内皮是血管壁与血液之间的动态屏障,兼具屏障功能、血管张力调控、凝血纤溶平衡、炎症免疫、血管新生与代谢感知作用。内皮功能紊乱是高血压、动脉粥样硬化、糖尿病血管病变、缺血性卒中、肺动脉高压、血管性认知障碍等多种血管病变的始动核心事件。
正常内皮释放 NO、PGI₂维持血管舒张、抑制血小板黏附与白细胞浸润;损伤刺激(氧化 LDL、高糖、AngⅡ、血流紊乱、炎症因子)下,内皮发生表型转换:NO 生成减少、ET-1/AngⅡ 等缩血管因子上调、黏附分子高表达、ROS 爆发、糖萼破坏、内皮间质转化(EndMT)、凋亡 / 焦亡增加,驱动脂质沉积、泡沫细胞形成、斑块进展、血管纤维化、微循环障碍。
内皮研究关键实验逻辑:内皮特异性定位→屏障 / NO 通路→氧化应激→黏附分子与炎症→EndMT 与基质重塑→凋亡 / 焦亡→血管新生;不能单一检测某一指标,需构建多层次证据链。
翌圣生物HiSpecif®基于单B细胞的高通量抗体发现平台,采用光导芯片微腔中操作和培养单B细胞,在芯片上直接完成单B细胞抗体表达、抗原结合及功能测试,将抗体药物早期发现时间从4-6个月缩短至最快1.5个月,大幅度地加快了开发进程,且可适用于鼠、兔、鸡等多种属的抗体制备。
一、血管内皮功能紊乱核心机制与血管病变关联
1. NO 通路失衡:内皮舒张功能丧失
eNOS 是内皮功能金标准。稳态下 eNOS 磷酸化激活,催化 L - 精氨酸生成 NO;氧化应激导致 eNOS 解偶联,不再产 NO 反而生成超氧阴离子;BH4 耗竭、Nrf2 抗氧化通路受抑进一步放大损伤,出现内皮依赖性舒张障碍,是高血压、早期动脉粥样硬化标志性改变。
| Western blot analysis of eNOS in Jurkat lysates treated with Insulin usingeNOS antibody. The lane on theright is blocked with the synthesizedpeptide. | Immunohistochemistry analysis of paraffin-embedded Human brain using eNOS antibody. High-pressure andtemperature. Tris-EDTA pH 8.0 was used for antigen retrieval. Sample with blocking peptide on the right. |
2. 内皮活化与白细胞黏附(炎症启动)
损伤内皮上调 ICAM-1、VCAM-1、E-selectin,招募单核细胞、中性粒细胞黏附穿越内皮;单核细胞迁入内皮下分化为泡沫细胞,形成粥样硬化脂质核心;脑微血管内皮黏附分子升高会破坏血脑屏障,促进卒中后炎症浸润。
| Western blot analysis of VCAM1 in rat spleen, rat kidney lysates using VCAM1 antibody. | Western blot analysis of VCAM1 in 3T3 lysates using VCAM1 antibody. |
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3. 氧化应激、糖萼损伤与屏障渗漏
ROS 攻击内皮细胞膜与糖萼,紧密连接蛋白(ZO-1、Occludin、Claudin)降解;内皮通透性升高、血浆脂质与炎性因子外渗;Nrf2/ARE 通路是内皮抗氧化关键防御轴,通路失活加速内皮衰老与功能衰竭。
| Western blot analysis of Occludin in various cell lines lysates using Occludin antibody. | Immunohistochemistry analysls of paraffin embedded rat pancreas using Occludin antibody. High-pressure and temperature Sodium Citrate pH 6.0 was used for antigen retrieval. | Immunofluorescence analysis of Occludin in NIH/3T3 usingOccludin antibody,and DAPI (blue) |
4. 内皮间质转化(EndMT)与血管纤维化
TGF-β/Smad 通路驱动内皮细胞失去 VE-cadherin 等内皮标志物,获得 α-SMA、CollagenⅠ 等成纤维细胞表型;EndMT 参与斑块纤维化、肺动脉高压血管重构、糖尿病微血管硬化、脑小血管病。
alpha Smooth Muscle Actin Rabbit mAb
| Western blot analysis of alpha smooth muscle Actin in (1)A549 lysates; (2)C2C12 lysates using alpha Smooth Muscle Actin antibody. | Immunohistochemistry analysis of parafin-embedded Human colon using alpha smooth muscle Actin antibody.High-pressure and temperature Sodium Citrate pH 6.0 was used for antigen retrieval | Immunofluorescence analysis of alpha Smooth Muscle Actin in A431 using alpha smooth muscle Actin antibody. |
5. 程序性细胞死亡:凋亡、焦亡、铁死亡
长期氧化应激、高糖、胆固醇结晶刺激可诱导内皮凋亡;炎症小体激活介导焦亡,释放 IL-1β、IL-18 放大局部炎症;脂质过氧化、GPX4 耗竭驱动内皮铁死亡,加速斑块不稳定与微血管丢失。
6. 血管新生异常
缺血后适度内皮增殖与管腔形成可代偿供血;持续炎症、VEGF/Notch 失衡会出现畸形新生血管、渗漏血管,促进斑块内出血、糖尿病视网膜病变、肿瘤血管增生。
二、血管内皮细胞功能紊乱与血管病变机制研究配套抗体清单
1. 内皮细胞特异性标志物(定位与表型鉴定,IF/IHC 基础)
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靶点 |
货号 |
抗体类型 |
推荐应用 |
机制说明 |
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CD31 |
兔多抗 |
IHC-P,ICC/IF,ELISA,WB |
经典内皮标记;血管密度、微血管计数、内皮定位金标准;斑块新生血管染色常用 |
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VE-Cadherin(CD144) |
兔多抗 |
IHC-P,ELISA,WB |
内皮黏附连接;屏障完整性、EndMT 下降标志;内皮紊乱 / 渗漏时表达降低、膜分布断裂 |
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vWF(血管性血友病因子) |
兔单抗 |
IHC-P,WB |
内皮 Weibel-Palade 小体;损伤时释放,介导血小板黏附;急性内皮激活指标 |
典型文献图融合方案:CD31+ZO-1 共染评估微血管内皮紧密连接;VE-Cadherin+α-SMA 区分正常内皮与发生 EndMT 的细胞;CD31+Iba1 观察血管 - 巨噬细胞交互。
2.NO/eNOS 通路(内皮舒张功能核心)
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靶点 |
货号 |
抗体类型 |
推荐应用 |
机制说明 |
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eNOS(NOS3) |
兔多抗 |
IHC-F,IHC-P,ICC/IF,ELISA,WB |
内皮一氧化氮合酶;总蛋白水平;功能更关键看磷酸化与解偶联状态 |
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p-eNOS(Ser1177) |
兔单抗 |
WB |
eNOS 激活形式;Akt 上游促进 Ser1177 磷酸化;内皮保护干预常用靶点 |
3.紧密连接 / 屏障功能标志物(血管通透性、血脑屏障、微血管渗漏)
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靶点 |
货号 |
抗体类型 |
推荐应用 |
机制说明 |
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ZO-1 |
兔多抗 |
IHC-P,WB |
紧密连接支架;内皮屏障受损时膜连续性破坏、胞内碎片化 |
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Occludin |
兔多抗 |
HC-P,ICC/IF,WB |
跨膜紧密连接蛋白;脑微血管、视网膜内皮渗漏敏感指标 |
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Claudin-5 |
兔多抗 |
IHC-F,IHC-P,ICC/IF,ELISA,WB |
微血管 / 血脑屏障关键紧密连接蛋白;卒中、糖尿病血管病变显著下调 |
4.内皮黏附分子与炎症通路(白细胞招募、动脉粥样硬化早期事件)
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靶点 |
货号 |
抗体类型 |
推荐应用 |
机制说明 |
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ICAM-1 |
兔多抗 |
IHC-F,IHC-P,ICC/IF,FC,ELISA,WB |
细胞间黏附分子;单核 / 中性粒细胞黏附,内皮活化标志 |
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VCAM-1 |
兔单抗 |
IHC-P,ICC/IF,FC,IP,WB |
血管细胞黏附分子;动脉粥样硬化早期、TNF-α/IL-1β 诱导显著上调 |
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|
NF-κB p65 |
鼠单抗 |
IHC-F,IHC-P,ICC/IF,IP,WB |
促炎转录核心;内皮损伤后核转位,驱动黏附分子与炎症因子转录 |
5.氧化应激与抗氧化通路(内皮损伤上游驱动力)
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靶点 |
货号 |
抗体类型 |
推荐应用 |
机制说明 |
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Nrf2 |
兔单抗 |
IHC-P,ICC/IF,IP,CHIP,WB |
内皮抗氧化总开关;血管病变中核转位不足;干预靶点 |
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HO-1 |
兔单抗 |
IHC-F,IHC-P,ICC/IF,IP,WB |
Nrf2 下游;减轻 ROS、抑制内皮黏附分子、抗 EndMT |
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xCT(SLC7A11) |
兔单抗 |
WB、IF |
胱氨酸转运、GSH 合成;维持内皮脂质过氧化防御 |
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GPX4 |
兔单抗 |
IHC-F,IHC-P,ICC/IF,WB |
铁死亡守门蛋白;内皮铁死亡、斑块不稳定相关 |
6.内皮间质转化 EndMT 与基质重塑(血管纤维化、斑块硬化)
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靶点 |
货号 |
抗体类型 |
推荐应用 |
机制说明 |
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α-SMA |
兔单抗 |
IHC-P,ICC/IF,FC,WB |
肌成纤维细胞标志物;EndMT 后内皮获得该表型 |
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Collagen Ⅰ |
兔单抗 |
IHC-P,ICC/IF,FC,WB |
细胞外基质沉积;血管壁纤维化、斑块硬化指标 |
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Smad2/3 / p-Smad3 |
兔多抗 |
ICC/IF,FC,IP,CHIP,WB |
TGF-β 下游核心通路;驱动 EndMT 与基质合成 |
7.凋亡、焦亡、程序性死亡(内皮丢失、斑块易损)
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靶点 |
货号 |
抗体类型 |
推荐应用 |
机制说明 |
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Cleaved-Caspase-3 |
鼠多抗 |
IHC-P,ICC/IF,ELISA,WB |
内皮凋亡执行分子;CD31 共染标记凋亡内皮 |
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NLRP3 |
兔单抗 |
IHC-P,ICC/IF,WB |
炎症小体;介导内皮焦亡、IL-1β 成熟释放 |
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GSDMD-N |
兔单抗 |
WB |
焦亡关键执行片段;斑块、糖尿病微血管炎症常用 |
8.血管新生与生长因子通路(缺血代偿、病变异常新生)
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靶点 |
货号 |
抗体类型 |
推荐应用 |
机制说明 |
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VEGFR2 |
兔多抗 |
IHC-F,IHC-P,ICC/IF,ELISA,WB |
内皮主要 VEGF 受体;增殖、迁移、通透性调控 |
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