肿瘤坏死因子α（TNF-α），也称为恶病质素，又名TNFSF1A，是一种多效细胞因子，在炎症、细胞凋亡和免疫系统发育中起核心作用，可由多种免疫细胞、上皮细胞、内皮细胞和肿瘤细胞产生。TNF-α受体主要是TNFR1和TNFR2，其信号可以激活caspase 8、转录因子NF-κB和激酶JNK等。人TNF-α的氨基酸组成与小鼠TNF-α有79%的同源性，TNF-α的生物学功能似乎没有明显的种属特异性。研究表明TNF-α一方面对某些类型的感染具有抵抗力，另一方面又引起炎症，在病理过程中起着矛盾的作用。TNF-α也可能影响葡萄糖摄取与胰岛素抵抗密切相关。同时TNF-α在肿瘤增殖、迁移、侵袭和血管生成中也起着关键作用。

翌圣Mouse TNF-α ELISA(酶联免疫吸附测定)试剂盒是一种体外酶联免疫吸附测定试剂盒，用于定量测定血清、血浆中的小鼠肿瘤坏死因子α(Mouse TNF-α)。特异性抗小鼠肿瘤坏死因子α抗体预包被在高亲和力的酶标板上。酶标板孔中加入标准品、待测样本，经过孵育，样本中存在的小鼠肿瘤坏死因子α与固相抗体结合。洗涤去除未结合的物质后，加入检测抗体孵育结合，经洗涤，再加入酶结合物(Streptavidin-HRP)孵育结合。洗涤后，加入显色底物 TMB，避光显色。颜色反应的深浅与样本中小鼠肿瘤坏死因子α的浓度成正比。加入终止液终止反应，在450 nm 波长(参考波长570 - 630 nm)测定吸光度值。

 

产品信息

货号	98029ES48 / 98029ES96
规格	48 T / 96 T
检测范围	31.25-2000 pg/mL
检测方法	双抗夹心法
检测物种	小鼠
检测时长	4.5小时
灵敏度	7.82 pg/mL
稀释线性	84 - 124%
回收率	81 - 119%
板内差	3.8%
板间差	5.3%

 

实验数据

1. 标曲数据

数据拟合绘制标准曲线，生成的标曲用于实验数据分析。标准曲线图

2. 灵敏度检测

TNF-α的最低检测限为7.82 pg/mL，通过使用重复检测20次零孔OD值的均值与标准差计算得出。

3. 精密度检测

酶标板内精密度

3个已知浓度的样本酶标板内重复测定8次，评估酶标板内的精密度。

酶标板间精密度

3个已知浓度的样本酶标板间重复检测24次，评估酶标板间的精密度。

项目	板内精密度			板间精密度
样本	1	2	3	1	2	3
	8	8	8	24	24	24
平均值	940.0	241.4	57.9	942.6	236.5	59.6
标准差	40.0	9.5	1.9	64.0	9.2	3.2
变异系数（%）	4.3	3.9	3.3	6.8	3.9	5.3

4. 回收率检测

 通过不同水平的TNF-α添加于样本中来测定回收率，其回收率如下:

样本类型	平均回收率(%)	范围（%）
血清	112.3	103.0-119.1
血浆	94.0	81.0-104.5
细胞培养上清	90.0	82.6-98.0

5. 稀释线性检测

血清稀释比例	平均期望值(%)	范围（%）
1:02	104.4	102.0-107.1
1:04	106.0	98.0-112.4
1:08	116.9	108.1-122.1
1:16	97.6	88.1-108.7

 

血浆稀释比例	平均期望值(%)	范围（%）
1:02	107.1	95.2-115.2
1:04	109.4	105.2-114.0
1:08	118.1	118.2-124.2
1:16	107.2	99.8-113.9

 

细胞培养上清稀释比例	平均期望值(%)	范围（%）
1:02	107.1	94.5-122.9
1:04	104.0	88.3-120.2
1:08	104.7	84.3-123.2
1:16	94.2	85.7-106.1

6. 样本值

应用本试剂盒，检测若干健康志愿者的样本，志愿者的用药史不详。

样本类型	样本数目	平均值（pg/mL）	样本值（pg/mL）
血清	4	n.d.	n.d.
血浆	4	n.d.	n.d.
细胞培养上清	4	n.d.	n.d.

n.d. 指样本浓度值低于检测范围内得31.25 pg/mL

7. 测定特异性

本试剂盒识别天然和重组小鼠肿瘤坏死因子α。下述因子进行了特异性的评估，没有观察到明显的交叉反应和干扰影响。

Recombinant human:		Recombinant Mouse:
IL-1α	IL-10	IL-1α	IL-10
IL-1β	IL-12	IL-1β	IFN-γ
IL-2	IFN-γ	IL-2	VEGF
IL-4	TNF-α	IL-4	RANKL
IL-5	LIF	IL-5	TRAIL
IL-6	RANKL	IL-6
IL-8	TRAIL