小鼠干扰素γ (Mouse IFN-γ)是可溶性二聚体细胞因子，是II型干扰素的唯一成员。它主要由自然杀伤细胞(NK)和自然杀伤T细胞(NKT)细胞分泌，发挥免疫作用。干扰素-γ对抵抗病毒、某些细菌和原生动物感染的固有免疫和适应性免疫具有重要作用。干扰素-γ 是巨噬细胞重要的激活剂，也是II型主要组织相容性复合物(MHC II)表达的诱导剂。IFN-γ的异常表达和很多自身炎症和自身免疫疾病相关。除了直接抑制病毒复制，IFN-γ对免疫系统的重要性更体现在其免疫刺激和免疫调控功能。干扰素γ可以有效抑制细胞增殖，当体内出现异常细胞繁殖速度过快，机体产生干扰素γ来抑制分裂异常的细胞生长，临床中常用来治疗原发性血小板增多症、慢性粒细胞白血病、真性红细胞增多症、原发性骨髓纤维化等不良疾病。

翌圣Mouse IFN-γ ELISA(酶联免疫吸附测定)试剂盒是一种体外酶联免疫吸附测定试剂盒，用于定量测定血清、血浆中的小鼠干扰素γ(Mouse IFN-γ)。特异性抗小鼠干扰素γ抗体预包被在高亲和力的酶标板上。酶标板孔中加入标准品、待测样本，经过孵育，样本中存在的小鼠干扰素γ与固相抗体结合。洗涤去除未结合的物质后，加入检测抗体孵育结合，经洗涤，再加入酶结合物(Streptavidin-HRP)孵育结合。洗涤后，加入显色底物 TMB，避光显色。颜色反应的深浅与样本中小鼠干扰素γ的浓度成正比。加入终止液终止反应，在450 nm 波长(参考波长570 - 630 nm)测定吸光度值。

 

产品信息

货号	98023ES48 / 98023ES96
规格	48 T / 96 T
检测范围	31.25-2000 pg/mL
检测方法	双抗夹心法
检测时长	4.5小时
灵敏度	5.65 pg/mL
稀释线性	82 - 120%
回收率	79 - 108%
板内差	4.5%
板间差	6.4%

 

实验数据

1. 标曲数据

数据拟合绘制标准曲线，生成的标曲用于实验数据分析。标准曲线图

2. 灵敏度检测

IFN-γ的最低检测限为5.65 pg/mL，通过使用重复检测20次零孔OD值的均值与标准差计算得出。

3. 精密度检测

酶标板内精密度

3个已知浓度的样本酶标板内重复测定8次，评估酶标板内的精密度。

酶标板间精密度

3个已知浓度的样本酶标板间重复检测24次，评估酶标板间的精密度。

项目	板内精密度			板间精密度
样本	1	2	3	1	2	3
	8	8	8	24	24	24
平均值	1093.5	274.5	61.2	1062.9	272.2	59.8
标准差	70.3	8.5	2.4	100.6	15.9	2.3
变异系数（%）	6.4	3.1	3.9	9.5	5.9	3.9

4. 回收率检测

 通过不同水平的IFN-γ添加于样本中来测定回收率，其回收率如下:

样本类型	平均回收率(%)	范围（%）
血清	84.3	80.3-89.1
血浆	87.5	79.1-97.5
细胞培养上清	98.7	86.4-108.6

5. 稀释线性检测

血清稀释比例	平均期望值(%)	范围（%）
1:02	100.9	91.7-112.3
1:04	100.9	94.3-107.0
1:08	108.6	96.7-119.3
1:16	117.8	115.9-120.2

 

血浆稀释比例	平均期望值(%)	范围（%）
1:02	106.8	96.3-113.0
1:04	97.6	93.0-103.1
1:08	108.1	104.6-114.4
1:16	112.8	111.4-115.6

 

细胞培养上清稀释比例	平均期望值(%)	范围（%）
1:02	91.1	87.0-94.1
1:04	96.5	93.9-101.3
1:08	99.7	92.1-104.3
1:16	90.3	82.4-104.1

6. 样本值

应用本试剂盒，检测若干健康志愿者的样本，志愿者的用药史不详。

样本类型	样本数目	平均值（mg/mL）	样本值（mg/mL）
血清	4	n.d.	n.d.
血浆	4	51.1	n.d.-118.6
细胞培养上清	4	28.3	n.d.-66.8

n.d. 指样本浓度值低于检测范围内得31.25 pg/mL

7. 测定特异性

本试剂盒识别天然和重组小鼠干扰素γ。下述因子进行了特异性的评估，没有观察到明显的交叉反应和干扰影响。

Recombinant human:		Recombinant Mouse:
IFN-γ	IL-6	IL-1α	IL-10
IL-1α	IL-10	IL-1β	IL-12
IL-1β	IL-12	IL-2	IL-13
IL-2	IL-13	IL-3	TNF-α
IL-3	TNF-α	IL-4	VEGF
IL-4	VEGF	IL-6