人干扰素γ (Human IFN-γ)是可溶性二聚体细胞因子，是II型干扰素的唯一成员。它主要由自然杀伤细胞(NK)和自然杀伤T细胞(NKT)分泌，发挥免疫作用。干扰素-γ对抵抗病毒、某些细菌和原生动物感染的固有免疫和适应性免疫具有重要作用。干扰素-γ 是巨噬细胞重要的激活剂，也是II型主要组织相容性复合物(MHC II)表达的诱导剂。IFN-γ的异常表达和很多自身炎症和自身免疫疾病相关。除了直接抑制病毒复制，IFN-γ对免疫系统的重要性更体现在其免疫刺激和免疫调控功能。IFN-γ可以有效抑制细胞增殖，当人体内出现异常细胞繁殖速度过快，机体产生干扰素γ来抑制分裂异常的细胞生长，临床中常用来治疗原发性血小板增多症、慢性粒细胞白血病、真性红细胞增多症、原发性骨髓纤维化等不良疾病。

翌圣Human IFN-γ ELISA(酶联免疫吸附测定)试剂盒是一种体外酶联免疫吸附测定试剂盒，用于定量测定血清、血浆中的人干扰素γ(Human IFN-γ)。特异性抗人干扰素γ抗体预包被在高亲和力的酶标板上。酶标板孔中加入标准品、待测样本，经过孵育，样本中存在的人干扰素γ与固相抗体结合。洗涤去除未结合的物质后，加入检测抗体孵育结合，经洗涤，再加入酶结合物(Streptavidin-HRP)孵育结合。洗涤后，加入显色底物 TMB，避光显色。颜色反应的深浅与样本中人干扰素γ的浓度成正比。加入终止液终止反应，在450 nm 波长(参考波长570 - 630 nm)测定吸光度值。

 

产品信息

货号	97024ES48 / 97024ES96
规格	48 T / 96 T
检测范围	15.63-1000 pg/mL
检测方法	双抗夹心法
检测物种	人
检测时长	4.5小时
灵敏度	9.64 pg/mL
稀释线性	84 - 115%
回收率	86 - 126%
板内差	4.2%
板间差	7.3%

 

实验数据

1. 标曲数据

数据拟合绘制标准曲线，生成的标曲用于实验数据分析。

标准曲线图

浓度（pg/mL）	显色值		平均值	校准值
1000	2.715	2.784	2.749	2.751
500	1.649	1.675	1.662	1.651
250	0.860	0.844	0.852	0.871
125	0.443	0.439	0.441	0.441
62.5	0.285	0.238	0.262	0.236
31.25	0.142	0.144	0.143	0.145
15.63	0.088	0.095	0.092	0.106
0	0.042	0.046	0.044	/

2. 灵敏度检测

IFN-γ的最低检测限为9.64 pg/mL，通过使用重复检测20次零孔OD值的均值与标准差计算得出。

3. 精密度检测

酶标板内精密度

3个已知浓度的样本酶标板内重复测定10次，评估酶标板内的精密度。

酶标板间精密度

3个已知浓度的样本酶标板间重复检测30次，评估酶标板间的精密度。

项目	板内精密度			板间精密度
样本	1	2	3	1	2	3
	10	10	10	30	30	30
平均值	434.9	99.4	23.0	440.6	100.6	22.6
标准差	18.1	4.1	1.0	28.9	5.3	2.3
变异系数（%）	4.2%	4.1%	4.3%	6.5%	5.3%	10.3%

4. 回收率检测

 通过不同水平的IFN-γ添加于样本中来测定回收率，其回收率如下:

样本类型	平均回收率(%)	范围（%）
血清	114.6	98.3-126.2
血浆	101.6	94.8-119.5
细胞培养上清	99.5	94.9-104.3

5. 稀释线性检测

血清稀释比例	平均期望值(%)	范围（%）
1:02	98.1%	86.4-104.2
1:04	100.0%	89.3-103.6
1:08	107.2%	102.4-115.7
1:16	97.7%	86.4-104.5

 

细胞培养上清稀释比例	平均期望值(%)	范围（%）
1:02	103.8%	101.4-106.1
1:04	107.8%	100.5-113.2
1:08	104.6%	100.3-108.2
1:16	99.1%	95.9-103

6. 样本值

应用本试剂盒，检测若干健康志愿者的样本，志愿者的用药史不详。

样本类型	样本数目	平均值（pg/mL）	样本值（pg/mL）
血清	10	3.5	n.d.-34.8
血浆	8	n.d.	n.d.
细胞培养上清	4	n.d.	n.d.

n.d. 指样本浓度值低于检测范围内得15.63 pg/mL

7. 测定特异性

本试剂盒识别天然和重组人干扰素γ。下述因子进行了特异性的评估，没有观察到明显的交叉反应和干扰影响。

Recombinant protein:
Human IFN-α	Mouse IFN-γ	Rat IFN-γ
Human IFN-β	Mouse IFN-α	Bovine IFN-γ
Human IL-6	Mouse IFN-β	Canine IFN-γ
Human TNF-α	Equine IFN-γ	Porcine IFN-γ