产品描述
异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)是β–半乳糖苷酶的活性诱导物质,常用于蓝白斑筛选及IPTG诱导的细菌内的蛋白表达等。当pUC系列的载体DNA(或其他带有lacZ基因载体DNA)以lacZ缺失细胞为宿主进行转化时、或用M13噬菌体的载体DNA进行转染时,如果在平板培养基中加入X–Gal和IPTG,由于β–半乳糖苷酶的α–互补性,可以根据是否呈现白色菌落(或噬菌斑)而方便地挑选出基因重组体。此外,它还可以作为具有lac或tac等启动子的表达载体的表达诱导物使用。
产品性质
中文名称(Chinese Synonym) |
异丙基-β-D-硫代半乳糖苷 |
英文名称(English Synonym) |
Isopropyl β-D-1-thiogalactopyranoside; Isopropyl β-D-thiogalactoside; |
CAS号(CAS NO.) |
367-93-1 |
分子式(Molecular Formula) |
C9H18O5S |
纯度(Purity, HPLC) |
≥99% |
外观(Appearance) |
白色粉末 |
分子量(Molecular Weight) |
238.30 g/mol |
结构式(Structure) |
运输与保存方法
冰袋运输。粉末-20℃避光保存,有效期2年。
注意事项
1)含有IPTG的培养基4℃避光保存,须在1周内使用。
2)为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
3)本产品仅作科研用途!
储存液配制
1)称取0.238 g IPTG;加入10 mL去离子水充分溶解IPTG粉末,配制0.1 M的储存液;
2)用5-10 mL去离子水润湿0.22 μm针孔过滤;
3)0.22 μm滤膜除菌上述IPTG溶液。分装成1 mL,-20℃冻存,有效期可达1年。
蓝白斑筛选
1. X-Gal、IPTG 加入琼脂培养基溶液
1)高压灭菌已加琼脂的培养基,并冷却到50℃左右。
2)每毫升培养基内加入10 μL 20 mg/mL X-gal 溶液、10 μL 0.1 M的IPTG(使其终浓度达到1 mM);
3)加入适量抗生素;
4)混匀后按照平板大小倒入适量培养基,待培养基冷却至室温后,接种细菌于37℃过夜培养。
2. X-Gal、IPTG加到琼脂平板表面
1)于无菌超净工作台制备平板(如LB 琼脂板);
2)取40 μL 0.1 M IPTG和120 μL 20 mg/mL X-gal混合,均匀地涂布于准备好的平板上;
【注】:平板边缘较难充分涂布均匀,容易产生假阳性,因此,为了得到更好结果,建议后续操作中尽可能在平板中间挑取单克隆。
3)37℃孵育直至所有液体被吸收(30 min或更长)。接种细菌于37℃过夜培养直到菌落形成。
HB220811
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