Exosome(外泌体)是由活细胞分泌的直径约为30-150 nm的小囊泡,具有典型的脂质双分子层结构;存在于细胞培养上清液、血清、血浆、唾液、尿液、羊水以及其它生物体液中;Exosome携带有多种蛋白质、脂类、DNA和RNA等重要信息,不仅在细胞与细胞间的物质和信息传递中起重要作用,更有望成为多种疾病的早期诊断标志物。
本试剂盒外泌体绿色荧光示踪染料能将脂质尾巴的绿色荧光染料(PKH67)结合到细胞膜脂质区域上。该试剂盒可以在染色过程中增加染色效率,同时维持细胞活力。可用于外泌体的标记染色实验,监测细胞吞噬作用。
产品组分
编号 |
组分 |
规格 |
40781-A |
PKH67 |
20 μL(1mM) |
40781-B |
Dilution Buffer |
200 μL |
产品性质
化学名称(Chemical name) |
PKH67 |
CAS号(CAS NO.) |
N/A |
分子式(Formula) |
N/A |
分子量(Molecular weight) |
200 |
外观(Appearance) |
liquid |
激发波长(Ex) |
λex 490 nm |
发射波长(Em) |
λem 502 nm |
运输和保存方法
注意事项
操作方法
1.外泌体蛋白定量:取适量外泌体进行BCA蛋白浓度测定以确定外泌体蛋白量;
2.染料工作液制备:用Dilution buffer将PKH67储存液稀释10倍,配制浓度为100 μM的染料工作液(避光操作,工作液应根据实验用量适当配置,现配现用);
3.外泌体染色:
(1)在外泌体中加入染料工作液,建议加入剂量如下:
外泌体蛋白量 |
加入染料工作液剂量 |
10~200 ug |
50 μL |
200~500 ug |
100 μL |
500~1000 ug |
200 μL |
(2)加入染料工作液后将离心管盖紧,通过涡旋振荡器混匀1 min,再静置孵育10min;
(3)向孵育后的外泌体-染料复合物中加入10 mL的1x PBS混匀;
(4)按照外泌体提取方法再次提取外泌体以去除多余染料;
(5)取200 μL 1×PBS重悬沉淀物,沉淀即为染色后的外泌体。
注意:过度染色会导致外泌体膜完整性丧失,最佳PKH67染料/外泌体用量需根据自身实验而决定。
HB2201104