推荐应用
Bst DNA聚合酶来源于Bacillus stearothermophilus DNA Polymerase I, 含有 5'→3'DNA聚合酶活性和强链置换活性,但缺乏5'→3'核酸外切酶活性,可用于 DNA链置换反应、等温扩增LAMP(Loop-mediated isothermal amplification)和快速测序等。
WS Bst DNA 聚合酶是在Bst Plus DNA 聚合酶的基础上采用可逆性适配体修饰技术获得的温启动等温扩增聚合酶,能够在室温下完全封闭酶的活性,防止非特异性扩增,提高反应效率,可在室温下建立反应,更适合高通量、大规模筛选场景。另外,该温启动Bst聚合酶不需要单独的激活步骤,在>60℃时1min内完全释放酶活。
1、扩增性能
使用温启动Bst酶(Cat#14412ES)配置的RT-LAMP预混液16729(蓝色)、16730(无甘油,黑色),和市面上同类产品Supplier A(红色)同时扩增,结果显示:在不同体系下,16729/16730的扩增性能与Supplier A无显著差异,且特异性更好。

图1. 使用14412ES配置的LAMP体系与同类产品扩增性能比较
2、室温配置体系
使用温启动Bst酶(Cat#14412ES)配置成荧光染料法的LAMP试剂,选择特异性一般的猫细小病毒引物,进行LAMP扩增,结果显示:适配体修饰的温启动Bst酶能在室温下抑制反应的进行,显示为本底信号低,非特异性扩增出峰时间晚于无适配体修饰的Bst酶在常温和冰上配置的体系。

图2. 使用14412ES配置的LAMP体系与无适配体修饰的Bst酶配置的体系室温建立反应比较
-25~-15℃保存,有效期2年,避免反复冻融。
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